HIV/AIDS患者精子中病毒核酸的检测

目的 检测HIV/AIDS患者精子中HIV核酸。 方法 制备33位HIV/AIDS患者精子样本,采用荧光原位杂交（FISH）,以生物素标记的HIV gag及 HIV pol作为双探针对这些患者精子进行HIV核酸检测。 结果 在9例(27.2%)患者中检测到阳性荧光信。结论 本结果进一步证实HIV/AIDS患者精子存有HIV核酸,并提示FISH是一种检测患者精子病毒核酸灵敏而可靠的方法。     

乙肝病毒S蛋白诱导人精子凋亡的分子机制

目的： 探讨乙肝病毒S蛋白(HBs)诱导人精子凋亡的分子机制。方法：人精子与不同浓度(0、25、50、100 μg/mL)HBs共孵育3 h后,应用Annexin V-FITC/PI双染法检测HBs对精子早期凋亡指标磷脂酰丝氨酸外翻情况,用流式细胞术检测精子细胞内半胱氨酸蛋白酶-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)活化,用TUNEL结合流式细胞术检测精子DNA的损伤。结果：人精子与25~100 μg/mL HBs共孵育3 h后,Annexin V-FITC＋/PI－精子,Caspase-3、-8、-9阳性精子,TUNEL阳性精子的比率均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且均呈剂量依赖趋势。结论：25~100 μg/mL HBs可诱发人精子胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,胞内Caspase-3、-8、-9激活和DNA损伤,从而致使人精子凋亡以影响精子的功能。     

乙肝病毒S蛋白对人精子氧化应激的影响

目的:乙肝病毒(HBV)可通过血睾屏障将病毒DNA整合到男性生殖细胞的基因组中,诱发多种染色体畸变,而且还能破坏精子线粒体功能,导致精子活力受损,受精率和受精指数下降,但其机制未明。本研究主要考察乙肝病毒S蛋白(HBs)对人精子氧化应激的影响。方法:人精子与不同浓度(0、25、50、100 μg/mL)HBs共孵育3 h后,用流式细胞术检测精子内活性氧(ROS)的变化情况,应用酶标仪检测精子细胞内丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(TAC)。结果:人精子与25~100 μg/mL HBs共孵育3 h后,ROS阳性精子比率、人精子细胞膜MDA水平显著高于对照组,而TAC 水平显著低于对照组(P<0.05或0.01)。MDA水平以及ROS阳性精子比率的升高与HBs呈剂量依赖关系(r0.62,r0.75;P均<0.01)。TAC水平的降低与HBs呈剂量依赖关系(r-0.89;P<0.01)。结论:HBs可诱导人精子内ROS升高、TAC降低,从而产生氧化应激,使细胞膜脂质过氧化进而影响人精子的功能。     

HIV/AIDS 28例患者精子形态特点分析

目的分析HIV/AIDS患者精子的形态学特点,探讨HIV感染对精子形态学的影响。方法收集已确诊HIV/AIDS患者,采用精子分析仪分析其精子形态学特点。结果收集了28例HIV/AIDS患者,分析精子的形态学结构发现,患者精子畸形率在24.2%~93.9%之间,平均（67.7±11.2）%,精子畸形以头部畸形为主,尤以小头畸形常见（54.2±15.7）%;其次可见大头、无定形头、圆形头等。颈部畸形率为（4.16±4.23）%,以颈部粗壮、不规则为主。尾部畸形率为（3.28±4.93）%,主要以尾部弯曲为主。结论 HIV/AIDS患者精子形态学存在明显的异常,HIV感染对患者精子的形态有明显的影响。     

EGCG通过调控SIRT1-P53通路诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡

 目的: 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)调控人卵巢癌SKOV-3细胞活力和凋亡的分子机制。方法: SKOV-3细胞给予EGCG(0~50 μmol/L)、SIRT1激动剂SRT1720(1 μmol/L)和SIRT1抑制剂EX527(1 μmol/L)处理后,用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time PCR检测Bax和Bcl-2 mRNA的表达水平;采用SIRT1去乙酰化酶活性检测试剂盒检测SIRT1酶活性;使用Western blot法检测SIRT1、乙酰化P53和P53的蛋白表达变化。结果: 与正常对照组相比,单独给予EGCG或EX527处理之后SKOV-3细胞活力下降,凋亡率增加;SIRT1的酶活性和蛋白表达水平均明显下降;P53的乙酰化水平显著增加。与EGCG组相比,SRT1720预处理组的细胞活力上升,凋亡率下降,Bax/Bcl-2的相对比值及激活型caspase-3的蛋白水平明显下降,并且SIRT1的酶活性和蛋白表达水平显著增加,P53的乙酰化水平下降。结论: EGCG可通过调控SIRT1-P53通路抑制卵巢癌SKOV-3细胞活力并诱导其凋亡。     

HIV病毒父婴垂直传播的研究进展

人免疫缺陷病毒(human immunodetlcieney virus,HIV)的传播途径除性传播、血液传播和围产期传播外,还存在经男性生殖细胞垂直传播的可能性.本文对HTV经人精子垂直传播的相关线索以及在HTV传播过程中发挥HIVol受体功能的辅助受体等内容作简要综述.     

病毒感染对睾丸结构与功能的影响及其机制

睾丸是精子发生的主要场所,已证实寨卡病毒、腮腺炎病毒、人类免疫缺陷病毒等多种病毒感染后,可造成男性感染者生育力下降,甚至不育。睾丸具有免疫豁免及固有免疫防御特性,在维持生精微环境平衡及正常的精子发生过程中具有重要作用。病毒感染可破坏睾丸免疫平衡,引发感染或睾丸炎,损害生育能力。本文从免疫学角度就病毒感染对睾丸结构与功能的影响及其机制进行综述,旨在为病毒感染者生育力改善措施的研究提供新的思路。     

非梗阻性无精子症患者采用睾丸显微取精术联合睾丸组织混悬液冷冻的临床效果

目的探讨睾丸显微取精术(micro-TESE)联合睾丸组织混悬液冷冻治疗不同病理类型的非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)行卵胞质内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的临床结局。方法回顾性分析2016年3月—2017年3月期间本中心经MicroTESE手术获取精子并进行睾丸组织混悬液冷冻的NOA患者的ICSI结局。结果 70例NOA患者中,micro-TESE获得精子30例(42.9%)。睾丸生精细胞成熟阻滞者(maturation arrest,MA)的获精率(sperm retrieval rate,SRR)显著低于生精功能低下者(hypo-spermatogenesis,H-S),差异有统计学意义(P=0.00),但同唯支持细胞综合征(Sertoli cell only syndrome,SCOS)比较,差异无统计学意义(P=0.64)。而早期睾丸生精细胞成熟阻滞(early MA)的SRR[20.8%(5/24)]低于晚期生精细胞成熟阻滞(late MA)[43.8%(7/16)]。30例睾丸组织混悬液解冻行ICSI注射,临床妊娠率为46.7%(14/30)。其中,MA组临床妊娠率为41.7%(5/12);H-S组临床妊娠率为47.1%(8/17);SCOS组1例行ICSI后临床妊娠。结论在辅助生殖技术中,睾丸显微取精术联合睾丸组织混悬液冷冻治疗NOA患者,临床结果满意。     

FITC标记无唾液酸胎球蛋白对人精子去唾液酸糖蛋白受体的定位

背景与目的： 采用FITC标记的无唾液酸胎球蛋白(FITC-ASF)对人精子去唾液酸糖蛋白受体(ASGP-R)进行定位和监测。 材料与方法： 采用FITC标记ASGP-R天然配体无唾液酸胎球蛋白得到FITC-ASF,进一步使用FITC-ASF对人精子表面ASGP-R标记,通过免疫荧光和流式细胞术检测其应用于外源ASF蛋白与该受体结合情况。 结果： FITC-ASF能够较好的标记人精子表面ASGP-R,并成功应用于外源蛋白与该受体的结合。 结论： 本研究为获得一种适合临床广泛应用的新的简便易行的ASGP-R监测方法提供了实验基础。     

乙肝表面S蛋白与人精子相互作用的初步研究

目的：研究乙肝表面S蛋白（HBs）与人精子表面去唾液酸糖蛋白受体（ASGP-R）的结合情况,探讨乙肝病毒（HBV）侵入人精子的早期机制。方法：HBs预先与人精子孵育一定时间后,采用异硫氰酸荧光素标记的ASGP-R单克隆抗体对人精子表面ASGP-R标记,通过流式细胞术考察HBs与该受体结合情况。结果：HBs在浓度25μg／mL时孵育1h,ASGP-R单克隆抗体浓度10μg／mL时,观察到标记的人精子的平均荧光强度显著降低。结论：HBV可能通过HBs与人精子表面ASGP-R受体结合而侵入精子,为进一步研究HBV侵入精子的早期机制提供了初步基础。