地塞米松对阿霉素诱导的肾小球足细胞活动力的影响

目的探讨地塞米松（dexamethasone,Dex）改善阿霉素(adriamycin,ADR)诱导的肾小球足细胞活性的机制。方法将体外培养的小鼠肾小球足细胞分为3组:ADR组,Dex预处理组（Dex+ADR）和空白对照组。采用划痕实验、Transwell实验、异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白（FITC-BSA）方法进行肾小球足细胞功能分析。另取SD雄性大鼠72只,随机分为ADR组（尾静脉注射ADR 7.5 mg/kg）,Dex治疗组（ADR+Dex,尾静脉注射ADR 7.5 mg/kg后24 h,再注射Dex 1 mg/kg）和对照组（尾静脉注射等量生理盐水）,分别给药后7 d、14 d、21 d和28 d收集24 h尿液,测定24 h尿蛋白。采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测nephrin表达变化。电镜下平均足突宽度（FWP）进行相关分析。结果划痕实验和Transwell结果显示,与空白对照组相比,ADR诱导肾小球足细胞活性升高,而Dex预处理后,肾小球足细胞的活力明显下降,与ADR组的差异有统计学意义（P<0.05）。FITC-BSA结果显示,与空白对照组相比,ADR诱导肾病肾小球足细胞FITC-BSA滤过率升高（P<0.05）;与ADR组相比,Dex预处理组肾小球足细胞FITC-BSA滤过率降低（P<0.05）。实时荧光定量PCR和Western Blot结果显示,与对照组大鼠比较,ADR诱导的肾病组肾小球足细胞nephrin表达升高（P<0.05）,而Dex预处理后,大鼠肾小球足细胞nephrin 表达下调（P<0.05）。电镜下结果显示,ADR组大鼠FWP高于正常组（P<0.01）;与ADR组相比,Dex治疗组FWP降低（P<0.01）。与对照组相比,ADR注射14 d开始,大鼠24 h尿蛋白增多（P<0.01）,第28天达到峰值（P<0.001）。与ADR组相比,Dex治疗组大鼠第14、21和28天24 h尿蛋白下降（P<0.001）。结论Dex下调nephrin表达,进而拮抗ADR诱导的体外肾小球足细胞活动力升高,参与缓解肾病大鼠的蛋白尿发生。     

降糖药物与低血糖事件的相关性

目的调查实践中2型糖尿病患者使用降糖药物与低血糖事件发生的相关性。方法回顾总结兰州大学第二医院VIP糖尿病科2型糖尿病合并药物性低血糖患者的病例资料,对150例研究对象进行分析,收集了性别、年龄、降糖药物使用情况等数据,对收集的相关变量先进行单因素卡方检验,再将上述因素进行多因素Logistic回归分析。结果单因素分析结果显示有差异的变量是单用胰岛素、联合用药种类,多因素Logistic回归分析结果显示不同年龄组2型糖尿病患者低血糖的发生与单用胰岛素及联合用药种类有关系。结论不同年龄组的2型糖尿病患者发生药物性低血糖与单用胰岛素及降糖药物的联合用药种类相关。     

内毒素诱导致新生大鼠肺损伤中肾病理改变及转录因子-κB和转化生长因子-β1表达的研究

目的研究内毒素(LPS)诱导致新生大鼠肺损伤模型中肾病理改变及转录因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的变化。方法用3～5日龄SPF级大鼠尾部静脉注射LPS建立新生大鼠急性肺损伤(ALI)模型。实验分为对照组、6 h模型组和12 h模型组。按实验要求时间杀死大鼠,无菌留取标本。用全自动生化仪检测新生大鼠的肾功能,用试剂盒检测丙二醛(MDA)含量变化和超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)活性,用免疫组化法检测NF-κB和TGF-β1的表达水平。结果对照组、6 h模型组和12 h模型组的大鼠血清肌酸酐的含量分别为(15.02±0.48),(45.96±1.25)和(97.65±1.43)μmol·L^-1,血尿素氮的含量分别为(6.84±0.53),(10.35±0.84)和(14.68±0.25)μmol·L^-1,肾组织中MDA含量分别为(2.02±0.41),(3.21±0.63)和(5.01±0.18)nmol·mg^-1,SOD活性分别为(28.74±0.69),(18.25±...     

乙肝病毒X蛋白抑制小鼠足细胞系MPC5增殖并促进其凋亡

目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对条件永生型小鼠足细胞系(MPC5)增殖与凋亡的影响。方法用携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证转染效率。实验分空白对照组(MPC5 group)、阴性对照组(MPC5-pEX-neo group)、HBx转染组(MPC5-pEX-HBx group)。MTT法检测足细胞存活率;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中nephrin、STAT3、JAK2、p-STAT3和p-JAK2、caspase-3蛋白表达。结果 HBx转染MPC5细胞48 h后HBx表达最高。HBx转染组中nephrin蛋白表达水平显著低于空白对照及阴性对照(均P0.01)。转染HBx基因后足细胞增殖明显受抑,同时凋亡率显著增高(均P0.01)。此外,HBx转染组STAT3、p-STAT3、JAK2和p-JAK2蛋白表达较空白对照及阴性对照组均显著增高(均P0.01), caspase-3在HBx转染组中的表达也显著增高(均P0.01)。结论 HBx可下调足细胞中nephrin蛋白表达,抑制足细胞增殖,并促进其凋亡的发生。其作用机制可能与STAT3/JAK2信号通路活化有关。     

封堵治疗甘肃省高原、亚高原地区婴幼儿动脉导管未闭的疗效和安全性

目的 评价甘肃省高原、亚高原地区婴幼儿动脉导管未闭（PDA）封堵治疗的安全性及有效性。方法 选择2008年1月至2018年1月于甘肃省人民医院行封堵治疗的PDA患儿300例,年龄为6个月至3岁,其中高原地区123例、亚高原地区177例。术中封堵前经右心导管测量肺动脉压,根据PDA的形态选择适宜的封堵器,对有轻度肺动脉高压的患儿行封堵治疗,对有中-重度肺动脉高压患儿则行试封堵治疗。术后1、3、6个月随访时行超声心动图检查,并根据右房室瓣反流速度评估肺动脉压的变化。结果 300例PDA患儿封堵前即刻血管造影显示缺损,缺损直径为1～10（4.5±2.8）mm。封堵后293例患儿无残余分流。299例患儿封堵手术成功,其中97例伴中-重度肺动脉高压的患儿均行吸高氧试验,对吸高氧后血氧饱和度<95%的21例患儿行试封堵治疗。235例患儿采用PDA封堵器进行封堵,53例微小动脉导管采用德国PFM医疗集团生产的Duct-Occlud弹簧圈,11例患儿采用膜部室间隔缺损封堵器。1例3岁患儿封堵后即刻肺动脉收缩压增高,其家属放弃进一步治疗。术后6个月299例患儿的肺动脉收缩压、平均肺动脉压均有不同程度的降低。结论 封堵治疗甘肃省高原、亚高原地区婴幼儿PDA成功率高;试封堵治疗是一种鉴定严重肺动脉高压性质非常可靠的方法;术中根据个体情况选择合适的封堵器械能取得良好的临床效果。     

干扰素α对乙型肝炎病毒X蛋白诱导小鼠足细胞系凋亡的影响及分子机制研究

目的 观察干扰素α（INF-α）对乙型肝炎病毒X （HBx）蛋白诱导的小鼠足细胞系（MPC5）凋亡的影响及其分子机制。方法 以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平。将MPC5细胞分为对照组：正常条件下培养的MPC5细胞;INF-α组：正常MPC5细胞与INF-α共培养;HBx组：HBx诱导的MPC5细胞;HBx+INF-α组：HBx诱导的MPC5细胞与INF-α共培养。不同实验条件下干预48 h后,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测足细胞裂孔隔膜相关蛋白（nephrin、CD2AP、synaptopodin）和细胞骨架相关蛋白（TRPC6）的mRNA及其蛋白的表达。结果 pEX-HBx转染MPC5细胞后48 h HBx mRNA表达最高（P < 0.05）。HBx组MPC5细胞凋亡率显著高于对照组、INF-α组和HBx+INF-α组（P < 0.05）。与对照组和INF-α组相比,HBx组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显降低,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显增高（P < 0.05）。与HBx组相比,HBx+INF-α组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显增高,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显降低（P < 0.05）。结论 INF-α可抑制HBx诱导的MPC5细胞凋亡,其机制可能与INF-α可调节HBx诱导的足细胞裂孔隔膜相关蛋白（CD2AP、nephrin、synaptopodin）和细胞骨架相关蛋白（TRPC6）的异常表达恢复正常有关。