人源化基因修饰猪红细胞与人血清免疫相容性的体外研究

目的 探讨野生型（WT）、四基因修饰（TKO/hCD55）和六基因修饰（TKO/hCD55/hCD46/hTBM）猪红细胞与人血清的免疫相容性和免疫差异。方法 收集20名不同血型志愿者的血液,将WT、TKO/hCD55和TKO/hCD55/hCD46/hTBM猪红细胞、ABO-相容（ABO-C）及ABO-不相容（ABO-I）人红细胞分别暴露于不同血型人血清中,检测血凝集、抗原抗体结合（IgG、IgM）水平和补体依赖细胞毒性,评估2种基因修饰猪红细胞与人血清的免疫相容性。结果 ABO-C组未出现明显凝集;WT组和ABO-I组凝集水平高于TKO/hCD55组和TKO/hCD55/hCD46/hTBM组（均为P<0.001）。WT组猪红细胞裂解水平高于ABO-C组、TKO/hCD55组和TKO/hCD55/hCD46/hTBM组;ABO-I组猪红细胞裂解水平高于TKO/hCD55组、TKO/hCD55/hCD46/hTBM组（均为P<0.01）。TKO/hCD55组猪红细胞IgM和IgG结合水平均低于WT组和ABO-I组;TKO/hCD55/hCD46/hTBM组猪红细胞IgG和...     

miRNA93和miRNA192在H3N2亚型SIV病毒复制及宿主抗病毒免疫中的作用

目的 探讨分离于广西猪流感病毒SW/Guangxi/NS2783/2010和SW/Guangxi/NS650/2012跨种属感染人肺腺癌A549细胞的miRNA93和miRNA192对病毒复制及宿主抗病毒免疫的影响。方法 通过测定不同稀释浓度的病毒感染细胞HA滴度值,确定病毒最佳稀释浓度。荧光定量PCR检测病毒感染细胞后miRNA93和miRNA192表达,Western blot检测病毒NP和HA蛋白表达水平;转染miRNA93和miRNA192抑制剂后,重新检测miRNA93、miRNA192、IFN-β及病毒NP、HA蛋白表达水平。结果 不同稀释度病毒感染人A549细胞后HA滴度的结果显示病毒SW2783的最佳稀释度为10^-3,而SW650的HA滴度无明显变化趋势,提示病毒SW2783对人A549细胞具有较好的适应性和感染能力。荧光定量PCR和Western blot结果提示两株病毒感染细胞后病毒NP和HA蛋白表达均先升高后降低,加入miRNA93抑制剂,两株病毒NP和HA蛋白的表达均上调;加入miRNA192抑制剂,病毒SW2783的HA蛋白表达下调（P=2.10×10^-4）,而SW650的HA蛋白表达上调（P=5.45×10^-5）,NP蛋白反而下调（P=0.034）;ELISA结果提示病毒SW2783和SW650感染细胞后炎症因子IFN-β表达水平随感染时间延长而升高。结论 研究表明miRNA93和miRNA192的表达与SIV病毒增殖及宿主抗病毒免疫有关,可作为干预猪流感病毒跨种属感染的新靶点。     

转录因子GATA3对Kaposi肉瘤相关疱疹病毒感染细胞增殖和凋亡的影响

目的观察转录因子GATA3对Kaposi肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)感染细胞增殖和凋亡的影响。方法培养KSHV感染细胞i SLK-BAC与KSHV未感染细胞i SLK-Puro,采用实时定量PCR(real-time PCR)法和Western blot检测GATA3的表达情况;分别用CCK8法和流式细胞术检测过表达GATA3后细胞的增殖能力与凋亡水平。结果 GATA3在i SLK-BAC细胞中的mRNA和蛋白表达水平均低于其在i SLK-Puro细胞中的表达水平;过表达GATA3后i SLK-BAC细胞增殖能力下降,凋亡率升高。结论转录因子GATA3能够抑制KSHV感染细胞系i SLK-BAC的增殖,并促进其凋亡。     

血清长链非编码RNA LSINCT5在乳腺癌中的表达与临床意义

目的探讨长链非编码RNA(long-noncoding RNA,lnc RNA)LSINCT5在乳腺癌患者血清中的表达水平及其临床应用价值。方法分别搜集90例乳腺癌患者、88例乳腺良性疾病患者及94例体检健康者血清标本,以及35例乳腺癌患者术前和术后血清标本;荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组血清中LSINCT5的表达水平,并分析其与临床病理参数的相关性;采用电化学发光免疫测定法(ECLI)检测各组血清中CA153、CEA的表达水平,并进行多元Logistic回归分析;绘制ROC曲线评估血清LSINCT5对乳腺癌的诊断效能。结果乳腺癌组血清LSINCT5表达水平[1.45(0.76,3.16)]明显高于良性疾病组[1.08(0.66,1.45),H=3.188,P=0.004]和健康人对照组[1.21(0.80,1.44),H=2.626,P=0.026];术后血清中LSINCT5表达水平[0.85(0.49,1.31)]较术前明显降低[1.10(0.67,2.23),U=0.764,P=0.005];此外,血清LSINCT5水平与乳腺癌患者TNM分期、淋巴结转移、PR、和Ki-67有关(P0.05),而与年龄、病理类型、ER和Her2无关(P0.05);血清LSINCT5单独诊断乳腺癌的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.60,敏感性和特异性分别为39.7%和100%,均高于传统标志物CA153(AUC~(ROC)=0.59,25.0%,95.6%)和CEA(AUC~(ROC)=0.54,33.8%,82.4%),且3项指标联合后其诊断效能(AUC~(ROC)=0.66,45.6%,100%)高于各项单独检测。结论乳腺癌患者血清中LSINCT5高表达,可能作为乳腺癌诊断的一个潜在的生物学标志物。     

终末期肾病患者的抑郁症状

<正>随着透析技术的进步及医疗保险的贯彻实施,接受血液透析治疗的终末期肾病(End Stage Renal Disease,ESRD)患者越来越多,生存时间越来越长,ESRD患者的心血管系统、血液系统、骨骼疾病等躯体并发症与体征异常已引起人们的广泛关注,而ESRD患者可能出现的如神经衰弱、焦虑症、抑郁症、恐惧感等精神或神经症候群则容易被忽视。据统计,在普通人群中大约有1.1%～15%的男性和     

猪流感病毒基因池中的新成员:新甲型H1N1流感病毒基因片段的存在及潜在威胁

新甲型H1N1流感病毒(2009 pandemic H1N1 virus,pdm/09)于2009年在人群中暴发以后,迅速在全球范围内传播,引起了21世纪的第一次流感大流行。pdm/09是由人的流感病毒、禽流感和猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)经过重配后形成的病毒,它的基因片段已经进入了猪流感病毒当中并开始产生新的变异毒株,这些新的变异流感毒株在欧亚大陆、北美大陆及中国南部的各个地区被不断报道和发现,这表明猪源性pdm/09在人间流行后可返传给猪,成为猪流感病毒基因池中的固有组成,获得与SIV重组形成新的重配病毒的能力,并可能仍然具有感染人类的潜能。因此,必须关注新型重配病毒的进化:包括其在猪群中的生长适应、以及适应性感染人的进化过程。不仅如此,还必须加强对猪群及人群流感病毒的检测,了解重配病毒在人和猪两个种群中的进化过程。     

小剂量多巴胺对大鼠颅脑创伤后水通道蛋白4表达的影响

目的观察小剂量多巴胺对大鼠颅脑创伤后水通道蛋白4（AQP4）表达的影响。方法49只成年雄性wistar大鼠,随机分为对照组（7只）、创伤组（21只）及多巴胺干预组（21只）,多巴胺干预组小剂量多巴胺5μg（kg&#183;min）持续给药．创伤组给予等量的生理盐水,对照组不予处理。分别予伤后0．5h、2h、6h、12h、24h、48h、72h断头取脑．采用半定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检;刚脑组织AQP。1mRNA表达及其变化规律。结果创伤组脑组织AQP4mRNA在伤后0．5h开始表迭上调,2h、6h、12h依次增高,24h达到峰值后回落。多巴胺干预组AQP4mRNA在伤后0．5h表达上调,12h达到峰值,后逐渐回落。与创伤组相比,多巴胺干预组在相应时间点AQP4tuRNA表达减少（P〈0．05）,并使AQP4mRNA峰值提前。结论小剂量多匕胺可以减少AQP4mRNA在大鼠颅脑创伤后的表达,减轻创伤后脑水肿．加快脑水肿的恢复,具有脑保护作用。     

六基因编辑猪-食蟹猴异种肾移植围手术期监测初步报道

目的 探讨六基因编辑猪-非人灵长类动物异种肾移植模型的构建。方法 将人源化基因编辑猪（GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM）的肾脏移植给食蟹猴,观察受体存活情况及恢复血流灌注后肾脏情况。定期监测肾脏实质回声、血流变化及大小;进行血常规、肾功能检测及电解质检测;监测尿液、粪便及体质量动态变化。食蟹猴生命终点取移植肾、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、盲肠行病理学检查。结果 受体术后7 d死亡。恢复血流后,肾脏灌注良好,器官质地柔软,色泽正常。受体生命终点时见肾脏腹侧有少量脓性分泌物附着,明显充血肿大,呈“大红肾”外观。术后随时间延长,肾实质回声增高,血流减少,皮质逐渐增厚,肾周及腹腔有少量积液。受体术后外周血红细胞、血红蛋白、白蛋白及血小板进行性下降,血清肌酐在术后7 d升高至308μmol/L,K+变化不大。术后即有淡黄色尿液排出,术后3 h内即恢复饮食及饮水并排淡黄色成形大便1次。术后1 d内尿液颜色逐渐变淡红至恢复正常,尿常规检测结果相符。术后2 d晨起排褐色血便2次,量较多,予以奥美拉唑进行抑酸治疗,至术后4 d大便恢复正常。β2-微球蛋白在术后7...     

五类人群应慎吃螃蟹

秋风起,螃蟹肥,一年一度的吃蟹时节已经到来.但美味螃蟹并非人人适宜享用.专家提醒,五类人群面对"横行君子"时应当谨慎.     

超声弹性成像联合常规超声在甲状腺结节良恶性鉴别中的诊断价值探究

目的:分析超声弹性成像(Ultrasound Elastography,UE)联合常规超声在甲状腺结节良恶性鉴别诊断中的应用价值.方法:选取本院 60 例甲状腺结节患者作为研究对象,均行常规超声与UE检查,以病理结果为诊断的"金标准",比较常规超声与UE检查单独与联合鉴别恶性甲状腺结节的敏感度、特异度及准确性.结果:常规超声鉴别恶性甲状腺结节的敏感度为 68.75%,特异度为 77.27%,准确性为 75.00%;UE鉴别敏感度为 62.50%,特异度为 81.82%,准确性为76.67%;UE联合常规超声鉴别敏感度 93.75%,特异度 95.45%,准确性 95.00%;常规超声联合UE诊断特异度、准确性明显高于常规超声、UE单一诊断(P＜0.05),诊断敏感度明显高于UE单独应用(P＜0.05).结论:UE联合常规超声可有效提高甲状腺结节良恶性鉴别诊断特异度与准确性.