叶柏教授治疗克罗恩病经验

叶柏教授认为,克罗恩病应从“脾虚湿热瘀毒”论治,认为脾虚为发病之本,标实有湿、热、瘀、毒不同,提出健脾扶正、益气温中以治其本,化湿清热、活血解毒以治其标,早期以标实证为主,清化活血解毒,还需顾护胃气;后期本虚为主时补益脾胃,佐以清化活血解毒;标本并重时则标本兼顾,扶正祛邪并施.并注意生活调摄、慎防外邪,以及汲取外科经验,内外兼顾.     

人星状病毒非结构蛋白nsP1a／1表达纯化及多克隆抗体的制备

目的：表达纯化人星状体病毒（ human astrovirus, HAstV）非结构蛋白nsP1a／1,免疫动物制备多克隆抗体。方法利用PCR技术扩增nsP1a／1基因序列,构建到大肠埃希菌原核表达系统中表达重组nsP1a／1蛋白,使用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化,十二烷基磺酸钠?聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS?PAGE）和二噻啉甲酸（BCA）实验对重组蛋白的纯度与浓度进行分析,以重组的nsP1a／1蛋白为抗原,免疫雄性SPF级SD 大鼠获得多抗血清,用 ELISA 测定抗体效价、 Western 印迹检测抗体特异性。结果nsP1a／1?pET28a原核表达载体构建成功,将其转化至大肠埃希菌BL21（DE3）细菌中诱导表达了重组蛋白,免疫大鼠获得的多抗血清几何平均效价达到1∶406374。结论本实验成功地运用原核表达系统表达并鉴定了人星状体病毒非结构蛋白nsP1a／1,为进一步研究人星状病毒的复制及病毒感染的临床诊断奠定基础。     

戊型肝炎病毒感染HepG2细胞蛋白质组学研究

比较人肝癌细胞系HepG2细胞感染和未感染HEV后细胞内蛋白质表达谱的变化,为初步探索HEV在宿主细胞内感染机制及致病机理奠定基础。方法 RT-nPCR和免疫荧光确认HEV感染HepG2细胞后,利用同位素标记相对和绝对定量( isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)技术比较HEV感染组与未感染组HepG2细胞蛋白质表达差异。结果 HEV感染导致328种蛋白发生变化,与未感染组相比,262种蛋白表达上调,66种蛋白表达下调。结论 HEV感染HepG2细胞导致大量蛋白差异表达,功能预测表明这些蛋白涉及到宿主的物质代谢、细胞信号转导、免疫蛋白、细胞骨架成分等方面,为今后研究HEV感染机制和致病机理奠定基础。