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目的:以抗结核一线药物利福平耐药为研究目标,探索快速评价抗利福平耐药结核分枝杆菌活性的方法。方法:利用PCR技术扩增与利福平耐药相关的rpoB及其突变体,插入载体pMV261构建重组质粒,电击转化入耻垢分枝杆菌进行药物敏感性测定。结果:在利福平浓度为4μg/mL时,表达rpoB-AM和rpoB-GM突变体的重组菌耐药性明显高于未突变组,其MIC提高了4倍以上,而与野生株相比,MIC提高了8倍以上;以ATG为起始密码子表达蛋白组的耐药性都强于以GTG为起始密码组。结论:本研究建立的利福平类药物作用机制的排重系统,可以用于排除某种或某些作用机制相同或类似的活性化合物,避免重复筛选,提高筛选效率,对于抗利福平耐药株的抗结核药物的筛选有着重要意义。 相似文献
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提要研究病毒和促癌物在食管癌形成的作用,用人胚食管上度培养和HPV18E6E7AAV感染。培养细胞分二组,SHEEC1组培养基中加入TPA(5ng/mL)4周。对照组SHEE未加TPA。细胞转化的形态,细胞周期,软琼脂培养和裸鼠致瘤性等指标皆证明SHEEC1已恶性转化。E6E7基因在FISH和PCR检测,两组细胞核皆呈阳性。结论:人胚食管上皮可用HPV18E6E7和TPA在体外协同诱导细胞恶性转化。人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮恶性转化的研究@沈忠英$汕头大学医学院肿瘤病理研究室@蔡维佳$汕头大学医学院肿瘤病理研究室@沈健$汕头大… 相似文献
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HIV-1蛋白酶 (PR) 活性的严格调控对于病毒的生存至关重要。在病毒蛋白表达及病毒颗粒装配过 程中, 处于病毒前体蛋白Gag-Pol中的蛋白酶必须以无活性状态存在, 避免前体蛋白Gag-Pol和Gag被提前酶切加工 (前体蛋白早成熟化)。干扰HIV-1蛋白酶活性的调控机制, 特异性的激活前体蛋白中的蛋白酶, 诱导前体蛋白早成熟化, 就可以直接抑制病毒的复制。根据这一设想, 运用生物发光共振能量转移技术, 建立细胞水平的HIV-1前体蛋白早成熟化激活剂筛选模型, 并通过3 000个化合物的试验性筛选对筛选模型进行评价。研究结果表明该筛选方法灵敏可靠, 特异性高, 重复性好 (Z' 因子为0.905)。 相似文献
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冠状病毒属冠状病毒包含多种人类致病病毒,抗冠状病毒药物研发具有重要价值。开发靶向宿主细胞的抗病毒药物不仅有助于发展新的抗病毒策略,同时有利于解决病毒突变而带来的耐药性等问题。本课题组前期研究发现,细胞周期依赖性蛋白激酶(cell cycle-dependent protein kinases, CDKs)参与冠状病毒的复制,成为潜在的抗病毒靶点。本研究发现广谱CDK抑制剂夫拉平度显著抑制严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2) RNA依赖性RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase, RdRp)活性。进一步研究表明,夫拉平度抑制SARS-CoV-2 RdRp的RNA合成效率。此外,夫拉平度能够有效抑制人类冠状病毒OC43 (human coronavirus OC43, HCoV-OC43)的复制。本研究表明, CDK抑制剂夫拉平度可能是潜在的抗冠状病毒药物。 相似文献
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目前,艾滋病的防治工作主要依靠抗HIV-1药物,临床使用的抗HIV药物主要是逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、融合抑制剂和整合酶抑制剂。逆转录酶抑制剂包括核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI),如Zidovudine(AZT)、Lamivudine(3TC)、Emtricitabine(FrC)等,非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI),如Efavirenz(EFV)、Nevirapine(NVP)、Delavirdine(DLV)等。蛋白酶抑制剂主要有Ritanovir(RTV)、Saquinavir(SQV)、Indinavir(IDV)等。 相似文献