用单克隆抗体观察慢性肝炎患者细胞免疫状况的变化

本文用多种单克隆抗体对32例慢性肝炎患者的细胞免疫状况进行了研究。结果发现患者肝组织内淋巴细胞和单核、巨噬细胞浸润明显增加,坏死区浸润细胞主要是T_3~+和T_8~+细胞。B淋巴细胞浸润极少,浸润淋巴细胞表面IL—2受体阳性细胞与外周血淋巴细胞表面IL—2受体阳性细胞率均无改变。患者外周血单个核细胞改变为T_3~+下降,T_4/T_8比例下降,单核、巨噬细胞、B淋巴细胞及淋巴细胞表面HLA—DR、DP、DQ标志与正常人无差异。     

冰冻切片免疫过氧化物酶染色法在抗细胞性单克隆抗体筛选和鉴定中的应用

本文介绍一种快速准确地筛选和鉴定抗细胞性单克隆抗体(单抗)的冰冻切片免疫过氧化物酶染色技术。它既能筛选融合后的大量单抗(一般在3小时以内能筛选200～400孔杂交瘤细胞上清液);又可根据组织固有结构及细胞分区分布的特性,作为全面鉴定单抗的重要方法。我们运用此法从12次融合中,筛选并经克隆化获得291个单抗,进一步全面鉴定后得到抗T细胞等101个单抗。此外还讨论了消除非特异性染色的体会。     

转铁蛋白受体在肝癌细胞上的表达

作者用抗转铁蛋白受体单克隆抗体抗TfR McAb,(D71)检测17例原发性肝癌患者肿瘤组织。发现14例肝癌细胞呈现特异性结合,阳性率为82.4％。其余3例肝癌细胞未检测到转铁蛋白受体(TfR),可能与肝癌细胞的分化程度或分泌程度有关。同时用抗A-FP单克隆抗体与CD71进行比较,发现肝癌胞细TfR含量高于A-FP含量。该发现为肝癌的诊断及导向治疗提供了新的较好的载体。     

应用RNA干扰技术抑制PDE5A3基因在人阴茎海绵体平滑肌细胞表达

目的应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达,探讨应用该技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性.方法构建6个靶向人PDE5A3基因的短发夹RNA(shRNA)重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48 h后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测PDE5A3基因的表达抑制效果.结果抑制率最高的1、2、4号重组质粒使PDE5A3基因表达在mRNA水平分别抑制(66.26±4.02)%,(54.90±3.06)%,(23.83±3.61)%;在蛋白质水平分别抑制(64.14±3.32)%,(49.21±2.96)%,(29.85±4.91)%.结论RNAi能明显抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的ED基因治疗新方法.     

用武系列单克隆抗体检测健康成人外周血淋巴细胞亚群

本文应用国产自制武系列抗人淋巴细胞单克隆抗体与进口OKT系列对比检测103例健康成人外周血T淋巴细胞的正常值。经免疫荧光法检查,Wu71(抗人金T)与外周血单个核细胞反应,Wu167(抗人辅助性T亚群)和Wu448(抗人抑制性T亚群)分别与43.8±9.0％(30％～61％)和31.3±7.0％(20％～48％)外周血单个核细胞反应。Wu167/Wu448之值为1.48±0.5(0.88～2.48)。本文结果还证实上述结果与相应抗人全T单抗(OKT_3),OKT_4,OKT_8的测定值相此无显著性差别。不同性别和不同年龄组的细胞及亚群测定值统计表明:T细胞总数随年龄增长有下降趋势,以男性中老年组与青年组之间差异较显著。T_4受年龄影响较小而性别之间差异较大,女性的T_4及T4/T8明显高于男性。T_8除男性老年组明显低于男性青年组外,其余均无明显差异。     

检测淋巴细胞亚群的花环试剂的试制研究

本文在我国首次报道采用醛化红细胞作载体,预先使葡萄球菌A蛋白红与细胞结合,然后通过A蛋白将抗T等单克隆抗体或异种抗小鼠Ig血清包被于红细胞表面成为花环试剂。其特异、敏感、稳定性好,效期长,使用方便,可用于T亚群的测定或抗淋巴细胞单克隆抗体的筛选检定。是实验研究和临床检验中有广泛实用价值的一种试剂。     

冰冻切片免疫过氧化物酶染色法在抗细胞性单克隆抗体筛选和鉴定中的应用

本文介绍一种快速准确地筛选和鉴定抗细胞必单克隆抗体(单体)的冰冻切片免疫过氧化物酶染色技术。它既能筛选融合后的大量单抗(一般在3小时以内能筛选200～400孔杂交瘤细胞上清液);又可根据组织固有结构及细胞分区分布的特性,作为全面鉴定单抗的重要方法。我们运用此法从12次融合中,筛选并经克隆化获得291个单抗、进一步全面签定后得到抗T细胞等101个单抗。此外还讨论了消除非特异性染色的体会。     

腺病毒载体介导shRNA抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5基因表达的研究

磷酸二酯酶5型(PDE5)作为基因治疗勃起功能障碍(ED)的分子靶点目前已逐渐成为研究热点.我们构建了以大鼠PDE5(rPDE5)为靶基因的重组腺病毒表达载体,将重组腺病毒转染大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞后,通过细胞内转录产生的短发夹RNA(shRNA)来诱导针对rPDE5基因的RNA干扰(RNAi),并分别从mRNA和蛋白水平检测其对rPDE基因表达的抑制情况.现报告如下.     

检测淋巴细胞亚群花环试剂的研究

本文在国内首次报道采用醛化红细胞作载体,预先使葡萄球菌A蛋白与红细胞结合,然后通过A蛋白将抗T等单克隆抗体或异种抗小鼠Ig血清包被于红细胞表面成为花环试剂,其特异、敏感、稳定性好,效期长,使用方便,可用于T亚群的测定或抗淋巴细胞单克隆抗体的筛选检定。     

精神分裂症外周血T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白测定

作者测定48例精神分裂症患者外周血 E 花环形成率 IgG、IgA、IgM 值,单克隆抗体检测 T 细胞及其亚群变化,并与健康对照组相比。各项结果均无明显差异,但 T_H/T_S 比值降低,表明 T 抑制细胞(T_S)功能相对亢进,不支持精神分裂症为自身免疫性疾病。此外,病程、家族史及是否用抗精神病药物,对上述各项指标均无明显影响。