哺乳动物胚胎干细胞分离与克隆方法研究进展

本文系统介绍了早期胚胎的选择早期的操作和培养等动物胚胎干细胞分离和克隆的关键技术,及应用有关技术所取得的重要成果。     

节育环致膀胱结石1例

患者,女,34岁,已婚,农民,以无明显诱因尿频、尿急、尿痛并发现肉眼血尿3个月就诊。无低热、盗汗,无寒战、高热,无明显腰痛。双肾输尿管及膀胱区无压痛及扣击痛,尿道口无明显红肿及狭窄,无异常分泌物。6年前放置宫内节育器,后无不适。实验室检查:WBC6.6×109/L;尿隐血(+++),蛋白质(++),白细胞满视野。影像检查:B超示     

巴马香猪Toll样受体4基因cDNA的克隆及生物信息学分析

目的观察三聚氰胺急性毒性及中药三金汤对三聚氰胺的清除作用。方法昆明小鼠90只,分为7组灌胃三聚氰胺,2组对照,观察其对小鼠的毒性。昆明小鼠70只分为7组,三金汤预防高、中、低剂量组,三金汤治疗组、三聚氰胺模型组、2组对照,一次性给予三聚氰胺后,观察三金汤对小鼠肾和肺三聚氰胺的清除作用。结果昆明小鼠灌胃三聚氰胺的LD50为9366mg／kg,肾脏未见结晶,肾、肝、肺有炎性细胞浸润。三聚氰胺灌胃后在肾、肺含量分别为327ng／g、177．5ng／g,三金汤预防高剂量组清除三聚氰胺效果最佳,肾、肺三聚氰胺含量分别降低至58ng／g、28．2ng／g。结论本实验条件下,初步认定三聚氰胺属微毒或无毒;中药三金汤对小鼠体内三聚氰胺的清除作用以三金汤预防高剂量组的效果最佳。     

单克隆人胰腺干细胞的形态和蛋白表达特征

目的 研究1例单克隆人胰腺干细胞系的细胞形态和表达特性.方法 10例4～5月龄流产胎儿胰腺组织,胶原酶消化.原代细胞DMEM培养,胰蛋白酶消化传代.在传代中逐渐纯化胰腺干细胞.克隆环筛选单克隆人胰腺干细胞,扩增培养.活力较好的细胞液氮冷冻保存.采用HE和Giemsa染色,观察单克隆人胰腺干细胞的形态特征;通过透射电镜分析其超微结构.用免疫组织化学反应和RT-PCR方法,检测其蛋白水平和mRNA水平的表达特征.结果 1例来源于4月龄男性胎儿的单克隆人胰腺干细胞建系,传50代.液氮保存细胞1×109个以上.单克隆人胰腺干细胞完全贴璧时呈多角形上皮样,单核,圆形或椭圆形,单、双或多核仁.细胞核质比大.线粒体、内质网等细胞器均不发达,胞质内无分泌颗粒,属于发育早期的胰腺上皮样细胞.共表达胰肠同源域因子1(pdx1)、胰高血糖素、巢蛋白及角蛋白19(CK19),不表达胰岛素、周期蛋白34(CD34)、CD44及CD45.转录表达pdx1、胰高血糖素及巢蛋白的mRNA,不转录表达胰岛素.结论首次证实1例共表达pdx1、胰高血糖素、巢蛋白及CK19蛋白的单克隆人胰腺干细胞系.