跟骨粉碎骨折40例治疗体会

跟骨骨折为跗骨骨折中最常见者，约占全部跗骨骨折的60％。致伤原因多为高处坠落伤，由于跟骨的解剖结构特殊，病理解剖复杂，跟骨骨折后关节面塌陷，给临床治疗带来困难。我院2002年9月～2006年6月采用切开复位跟骨接骨板内固定来治疗涉及跟骨关节面的粉碎骨折40例，疗效满意，报告如下。     

基孔肯雅病毒中和表位的筛选及表达

目的:寻找基孔肯雅病毒中和表位,并将其表达为重组融合蛋白.方法:对噬菌体展示12肽库进行了生物淘洗,随机挑取噬菌体克隆,使用 ELISA方法筛选并鉴定阳性克隆,分析阳性克隆的DNA序列,将其翻译成氨基酸序列进行同源性比较.将其中一个表位连同M13噬菌体PⅢ蛋白结构域Ⅰ～Ⅱ的编码序列用PCR技术扩增后插入原核表达载体pQE30,用IPTG诱导融合蛋白表达.结果与结论:从经过3轮淘洗的噬菌体中随机挑选123个克隆,从中筛选到20个阳性克隆,其中包含7种不同的氨基酸序列,这些序列缺乏同源性,表明该单抗表位应为构象型表位.在室温培养条件下成功地在大肠杆菌周质腔表达了一种可溶性的表位融合蛋白,经亲和层析得到了纯化的表位融合蛋白.     

改良后踝入路治疗三踝骨折在基层医院的应用

三踝骨折是在基层医院常见的骨折。近年来,随着交通及老龄化社会的发展,其发生率明显增高。踝关节骨折脱位处理不当,可导致肢体的严重病残。其手术难点在于切口致皮肤坏死及后踝的显露。我院2010年6月～2013年10月利用改良踝关节后外侧入路,加内踝入路治疗三踝骨折,取得良好效果,现报告如下。     

用于大容量人源天然噬菌体抗体库的表达载体的构建及鉴定

目的构建一个应用于大容量Fab段天然噬菌体抗体库的表达载体。方法用定点突变技术将表面呈现噬菌粒载体pDF上的BssHⅡ酶切位点改为BglⅡ酶切位点,然后分别在抗体轻链和重链位置插入自杀基因SacB,构建含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB;利用抗乙肝表面抗原抗体的基因为模板,PCR扩增重链和轻链基因片段。将PCR扩增的轻链基因和重链基因分别插入载体pDF-D-SacB内,利用电转化的方法将其转入Trans1-Blue大肠杆菌,构建2个初级质粒,再利用初级质粒超感染BSl365菌,使其轻链与重链发生重组,获得重组质粒,进一步获得抗乙肝表面抗原抗体的噬菌体。之后利用该噬菌体感染大肠杆菌Trans1-Blue进行扩增,得到大量抗乙肝表面抗原的噬菌体抗体。最后,通过酶联免疫吸附剂测定检测所获得的抗体。结果通过向pDF重轻链区域插入SacB基因,改造抗体基因克隆位点,构建了pDF-D-SacB载体;经检测,pDF-D-SacB可以表达具有功能的Fab噬菌体抗体,可以在分泌Cre蛋白酶的细菌胞内发生预期的Cre-Loxp介导的定点重组。结论所获得的含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB适用于构建大容量噬菌体抗体库。     

基于核酶自剪切机制稳定分泌丙型肝炎病毒的细胞模型

Objective To construct a stable HCV-producing cell model for anti-HCV drug research. Methods The HCV-ribozyme recombinant plasmid pJFHl-Rbz was constructed to generate the exact 5' and 3' ends of HCV genomic RNA by placing two self-cleaving ribozymes at both ends of the HCV JFH-1 cDNA. The plasmid was then transfected into HepG2 cells and the resultant clones were screened with G418. Subsequently, immunofluorescence and Western blot were performed to detect the expression of HCV core protein, HCV RNA level was quantitated by TaqMan real-time PCR method and HCV particles was detected by electron microscopy. Results HCV core protein was detected in die screened cell clone, and the level of HCV RNA was up to 1 ×107 in the culture medium. Electron microscopy showed the viral particles in the culture suspension were approximately 55 nm in diameter. IFN-treating experiment demonstrated that the HCV RNA level decreased with the increasing concentration of IFN α. Conclusions We constructed a stable HCV-producing cell model which can be used for anti-HCV drug research.     

苦瓜胶囊联合二甲双胍治疗2型糖尿病46例

目的:观察苦瓜胶囊联合二甲双胍缓释片治疗2型糖尿病的临床疗效。方法:将90例患者随机分为观察组46例、对照组44例。对照组口服二甲双胍缓释片1.0 g/次,2次/d,饭后服用。观察组在对照组治疗的基础上给予苦瓜胶囊,3粒/次,3次/d,饭后半小时服用。2组均连续治疗14周。观察治疗后2组空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(PBG)、体质量指数(BMI)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血胰岛素(INS)、血C肽(C-P)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)。结果:FBG、2h PBG、BMI、Hb A1c、等指标观察组治疗后均较治疗前明显降低(P0.05),与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P0.05)。FINS、2h INS、FC-P、2h C-P等指标观察组治疗后均较治疗前明显升高(P0.05),与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P0.05)。HDL-C观察组治疗后较治疗前明显升高(P0.05),与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P0.05)。其余指标2组治疗后均无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。不良反应发生率观察组为13.64%,对照组为13.95%,2组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:苦瓜胶囊联合二甲双胍缓释片治疗2型糖尿病临床疗效满意。     

化浊颗粒对2型糖尿病大鼠肝组织微小RNA-21/PTEN/PI3K/AKT信号通路的调控作用

目的 观察化浊颗粒对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠肝组织微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)/磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/PI3K/AKT信号通路的调控作用。方法 将40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、罗格列酮组。除正常对照组外,其余组别采用高糖、高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立T2DM大鼠模型。造模后中药组及罗格列酮组分别以化浊颗粒和罗格列酮灌胃,模型组与正常对照组给予生理盐水灌胃。连续灌胃10周后处死各组大鼠,Q-PCR检测大鼠肝组织中miR-21、PTEN、PI3K、AKT mRNA水平,Western blot检测大鼠肝组织PTEN、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。结果 与正常对照组比较,模型组PTEN蛋白及mRNA表达下调,miR-21、PI3K、AKT mRNA表达水平升高,PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,中药组及罗格列酮组大鼠肝组织中PTEN蛋白及mRNA表达上调,m...     

浅谈《黄帝内经》中蕴涵的哲学思想

《黄帝内经》不仅是一部医学名著,而且在一定程度上反映了社会、思维和其他自然科学学科的成就,其在理论上的最大特色之一是把中国哲学思想与医学巧妙地结合起来,它包含着丰富的朴素唯物主义和辩证法思维。     

黄金胶囊改善2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性研究

目的: 探讨黄金胶囊对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗(IR)的影响,并初步探讨其作用机制。 方法 :采用给大鼠腹腔一次性注射小剂量链脲佐菌素(STZ),并加饲高热量饮食(富含脂肪和蔗糖),制备T2DM伴IR大鼠模型,观察黄金胶囊对糖尿病大鼠体重、血糖、血清胰岛素和胰岛素敏感性指数的影响。 结果 : 黄金胶囊能降低T2DM伴IR模型大鼠空腹血糖;黄金胶囊能降低病鼠高胰岛素血症,提高了胰岛素敏感性指数;实验中未发现明显的不良反应。 结论 : 黄金胶囊对T2DM伴IR大鼠有降血糖及改善其IR的作用。     

抗基孔肯亚病毒人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建和表达

目的：表达具有中和活性的抗基孔肯亚病毒人．鼠嵌舍抗体。方法：用RT-PCR法克隆具有中和活性的抗基孔肯亚病毒鼠源单克隆抗体CHIK-IF1的轻重链可变区基因，克隆人IgG1恒定区基因组基因，构建了轻重链嵌舍基因和表达质粒pCdhfrlL，pcDNA3、1H，共转染二氢叶酸还原酶缺陷型CHO细胞，用ELISA检测培养上清中嵌舍抗体的表达，MTX加压筛选表达量高的克隆，扩大培养收集上清并纯化，纯化的嵌合抗体进行SDS-PAGE、Western印迹检测和抗原结合活性的检测。结果与结论：在CHO细胞中成功表达了抗基孔肯亚病毒的嵌舍抗体，为制备抗基孔肯亚病的被动免疫制剂奠定了良好的基础。