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目的为制备抗H9亚型A型流感病毒(AIV)独特型杂交瘤细胞系,运用异种动物间共有独特型理论建立的间接ELISA进行检测.方法本试验采用兔抗H9亚型低致病力AIV IgG作为检测抗原,通过预试验确定了包被抗原的工作浓度为800μg/mL,以间接ELISA方法检测融合细胞培养上清液,筛选到产生抗AIV鸡和兔种间共有独特型抗体的杂交瘤细胞.结果间接ELISA试验中P/N值达12,效价达到2-4,证明杂交瘤细胞株分泌目的单克隆抗体的能力强.结论该检测方法排除了分泌抗鸡同种型表位以及超变区其他表位抗体的杂交瘤细胞,从而成为筛选分泌抗H9亚型AIV独特型单克隆抗体杂交瘤细胞株的可靠方法. 相似文献
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抗AIV(H9)独特型单克隆抗体的制备及其免疫原性的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用H9N2亚型AIV作为抗原免疫接种SPF鸡制备高免血清,用饱和硫酸铵法从该血清中提取免疫球蛋白G(IgG)。以该IgG制备弗氏佐剂疫苗免疫SPFBALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS-1在聚乙二醇(PEG)作用下融合,采用间接ELISA检测法,筛选获得3株(2H1D1、2H1G4、3H2D7)分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。3株融合细胞培养上清液中的单克隆抗体效价均为2-4,小鼠腹水中的单抗效价是细胞培养上清液中的300～500倍。经检测表明,3株细胞系产生的单克隆抗体仅与相应的鸡抗H9N2亚型AIV血清发生特异性反应。用2H1D1分泌的抗独特型单克隆抗体制备疫苗与抗AIV灭活疫苗同时免疫SPF鸡收获的高免血清与AIV在MDCK细胞上进行中和实验,中和效价分别为10-1.8/10μl、10-1.6/10μl。由此表明,该抗独特型抗体疫苗具有良好的免疫原性。 相似文献
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目的为制备抗H9亚型A型流感病毒(AIV)独特型杂交瘤细胞系，运用异种动物间共有独特型理论建立的间接ELISA进行检测。方法本试验采用兔抗H9亚型低致病力AIV IgG作为检测抗原，通过预试验确定了包被抗原的工作浓度为800μg/mL，以间接ELISA方法检测融合细胞培养上清液，筛选到产生抗AIV鸡和兔种间共有独特型抗体的杂交瘤细胞。结果间接ELISA试验中P／N值达12，效价达到2^-4，证明杂交瘤细胞株分泌目的单克隆抗体的能力强。结论该检测方法排除了分泌抗鸡同种型表位以及超变区其他表位抗体的杂交瘤细胞，从而成为筛选分泌抗H9亚型AIV独特型单克隆抗体杂交瘤细胞株的可靠方法。 相似文献
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