肝脏可溶性复合物不同剂量、不同途径移植对肿瘤细胞增殖抑制的体内外实验

目的:肝脏可溶性复合物具有保护肝脏、刺激肝组织再生等生物学活性,观察天然物质肝脏可溶性复合物对肿瘤细胞生长增殖的抑制作用.方法:实验于2006-05/2007-02在四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室实验肿瘤研究室完成.①分离人胚胎、成年及新生小鼠肝脏组织,生理盐水清洗、剪碎、筛网过滤,用生理盐水制备混悬液,3 000 r/min离心,收集上清,制备肝脏可溶性复合物.②体外实验:用上述不同来源的肝脏可溶性复合物体外处理肿瘤细胞,四甲基偶氮唑盐比色法测定其对乳腺癌细胞EMT6增殖的影响.③体内实验:观察成年鼠肝脏可溶物质对乳腺癌细胞EMT6体内生长的抑制作用及其对荷瘤鼠生存状况的影响,包括不同给药剂量及不同给药途径两个实验,给药途径包括在接种肿瘤细胞部位的对侧腋下、同侧腋下、腹腔注射及灌胃等.结果:①体外实验显示不同来源的肝脏可溶性复合物能明显抑制肿瘤细胞EMT6增殖率,肿瘤增殖抑制率均显著高于血清白蛋白处理组(P＜0.05),并呈剂量依赖性.②成年鼠肝脏可溶物质8mg/L组抑瘤率高于2,4 mg/L组(P＜0.05),未观察到明显毒副效应.③比较不同给药途径,成年鼠肝脏可溶物质同侧注射组的抑瘤率较其他3组的抑瘤率高(P＜0.05),各成年鼠肝脏可溶物质给予组的体质量增长率比相应生理盐水对照组高(P＜0.05).④与相应生理盐水对照组比较,在同侧腋下注射成年鼠肝脏可溶物质的小鼠生存期明显延长(P＜0.05).结论:肝脏可溶性复合物具有抑制肿瘤细胞生长的作用,并且呈一定的剂量依赖性.不同的给药途径中,在接种肿瘤细胞部位的同侧腋下给药抑瘤效果最好.     

国产乙酰血卟啉和血卟啉二钠盐在体内外吸收和分布的研究

作者对国产AHP、HPD在体内外的吸收及分布进行了研究。观察到正常肝、肾,恶性肿瘤细胞均能吸收AHP、及HPD。将AHP、HPD分别注入小鼠体内后,进行6～216小时动态观察,以生化方法测其含量,最高吸收峰在6～12小时,以肝脏及恶性肿瘤含量最高,恶性肿瘤组织储留可达216小时。     

肿瘤转移抑制基因nm23H_1产物在人鼻咽癌中表达的研究

采用ＳＰ免疫组化技术，以ＮＤＰＫ／ｎｍ２３Ｈ１特异的单克隆抗体为探针，对人鼻咽癌中ｎｍ２３Ｈ１的表达及其与颈淋巴结转移的关系进行了研究。结果：３１例鼻咽癌中ｎｍ２３Ｈ１基因产物表达的阳性率为４１．９％（１３／３１）。其中无转移组的阳性率为５２．３％（１１／２１），有转移组的阳性率为２０％（２／１０），两组间具有显著性差异（Ｐ＜０．０１），而在转移的颈淋巴结组织中ｎｍ２３Ｈ１产物表达极微或无表达，其阳性率为０，与无转移组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。上述结果说明，肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３Ｈ１产物的表达，在无转移组呈高表达，在有转移组及淋巴结转移组中呈低表达，其表达与转移呈负相关，说明人鼻咽癌的转移与ｎｍ２３Ｈ１基因的低表达密切相关     

肺癌DC融合细胞诱导的抗肿瘤免疫应答

目的 研究肺癌DC融合细胞FLD－A11体内外诱导免疫应答的能力,方法 用MTT法测定FLD－A11细胞诱导淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测其诱导淋巴细胞分泌IL－2的水平;LDH释放法测定FLD－A11细胞免疫后小鼠脾淋巴细胞的特异性CTL活性。结果 FLD－A11有有效刺激淋巴细胞的增殖反应（SC：RC＝1：50时,SI＝2.38）,诱导淋巴细胞分泌IL－2。FLD－A11细胞免疫后,小鼠的胸腺和脾脏重量均高于对照组（P＜0.05）,脾淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性显著高于对照组。结论 FLD－A11细胞具有诱导初次抗肿瘤免疫应答的能力,不仅能在体外诱导淋巴细胞的增殖和IL－2的分泌,而且体内免疫接种也能引起小鼠免疫器官的增生反应,产生针对Lewis肺癌的特异性CTL杀伤作用。     

乳酸脱氢酶在判断卵巢恶性肿瘤预后中的价值

作者对24例卵巢恶性肿瘤患者血清乳酸脱氢酶进行了动态观察。结果表明,患者病情变化与其血清 乳酸脱氢酶变化基本相符。病情稳定或好转者,血清乳酸脱氢酶则随之下降;肿瘤复发者,血清乳酸脱 氢酶则上升;血清乳酸脱氢酶增高并持续不降者,则预后不良。故作者认为血清乳酸脱氢酶可作为患者 预后和复发观察的生物化学指标。     

胃液乳酸脱氢酶在判断胃癌预后中的价值

作者等以胃液乳酸脱氢酶(LDH)为指标,配合纤维胃镜,对21例胃癌患者进行了动态观察,结果表明经~(00)钴放射治疗或手术治疗后,胃液LDH下降,若癌肿复发或转移时,胃液LDH又上升,说明胃液LDH活性升高或降低,与肿瘤的存在或消退有关,可作为胃癌预后观察的生化指标。     

体外诱导成熟树突状细胞的研究

目的：探讨在体外从干细胞中诱导出成熟DC的适宜环境。方法：分别将人胎肝、骨髓和脾细胞以及小鼠骨髓和脾细胞在体外用GM－CSF和TNF－α诱导,观察了第3、5、7天DC的收获情况。进一步用S－P免疫细胞化学染色检测了mBmDC和fLDC有关分子表达。结果：在体外通过GM－CSF和TNF－α的作用,小鼠骨髓、人胎肝、骨髓细胞呈典型的毛刺状胞浆突起,第5天的收获率分别为：39.5％、67.2％、12.9％,而基本不能从脾细胞中诱导出成熟DC,获得的DC能与MAbCD80、MAbCD40呈强阳性反应。结论：在GM－CSF和TNF－α的共同作用下,能在体外从人胎肝、 骨髓和小鼠骨髓干细胞中获得成熟DC,其DC能表达高高水平的B7－1和CD40分子,这为大量获得DC提供了一种简便可行的手段,为研究DC的生物学特征及其抗原提呈功能提供了丰富的材料,为开展以DC为基础的各种免疫治疗研究奠了良好的基础。     

正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤LD_5的纯化及其性质研究

以正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤,经一系列离子交换层析及亲和层析,获得了高纯度的LD_5。对三种组织的LD_5的部分酶动力学参数、亚基分子量及等电点的比较研究表明:H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤的LD_5对丙酮酸的K_m值较正常C_(57)鼠肝LD_5显著降低,而LD_5含量(mg/g组织)、LD_5占LDH总活性的百分率均较正常高;三种组织的兔抗鼠LD_5间呈现交叉免疫反应。本研究所获的三种兔抗鼠LD_5抗体为进一步研究癌变时LD_5活性升高的分子机理奠定了基础。     

高强度聚焦超声对人乳腺癌细胞的生长抑制作用及机理研究

目的　研究高强度聚焦超声 (HIFU)对人肿瘤细胞的杀伤作用 ,并探索其作用机理。方法　用不同强度HIFU处理人乳腺癌细胞 MCF- 7,用台盼蓝排斥法染色、细胞增殖试验 (MTT法 )、克隆形成实验研究 HIFU对癌细胞的杀伤和生长抑制作用 ;用流式细胞术检测 HIFU对癌细胞周期、凋亡及相关基因表达的影响。结果　用 HIFU处理后 ,癌细胞死亡率升高 ,增殖活性降低 (P<0 .0 5 ) ,克隆形成下降 (P<0 .0 0 1) ,G0 /G1 期细胞数增加 (P<0 .0 5 ) ,S期细胞数减少 (P<0 .0 1) ,凋亡指数升高 (P<0 .0 1) ,热休克蛋白表达升高 (P<0 .0 5 ) ,P5 3、BCL- 2、FAS表达阳性细胞数与对照组比 ,无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论　 HIFU对人乳腺癌细胞有明显的杀伤及抑制生长和克隆形成作用 ,其机理与抑制 DNA合成有关 ;HIFU具有诱导癌细胞凋亡作用 ,可能与 P5 3、BCL- 2、FAS的介导和调控无关。     

小鼠肺癌细胞与树突状细胞融合的研究

目的 使肺癌细胞表达共刺激分子,探讨其作为疫苗的可能性。方法 小鼠骨髓细胞在体外经GM－CSF和TNF－α诱导,使之成为成熟树突状细胞（BmDC)。将其与小鼠Lewis肺癌细胞AL9901融合,并以S－P免疫细胞化学染色法检测融合细胞和BmDC上有关分子的表达。结果 通过GM－CSF和TNF－α诱导获得BmDC,以诱导5d时收获为佳。获得的BmDC能高表达B7－1和CD40分子,与肺癌细胞融合后,获得的融合细胞仍能高表达B7－1和CD40分子。结论 通过将小鼠肺癌细胞与树突状细胞融合,使肺癌细胞获得了BmDC表达的B7－1和CD40分子,从而提高了其免疫原性,为制备肺癌疫苗奠定了基础。