HBV Pre S2单链抗体基因在大肠杆菌中的克隆及初步表达

利用基因重组技术，在成功构建ＨＢＶ Ｐｒｅ Ｓ２单链抗体基因基础上，引人ＥｃｏＲ Ｉ和Ｓａｌ Ｉ酶切位点，克隆到原核高效表达质粒ｐＢＶ２２０中，筛选到２个重组克隆，经转染大肠杆菌ＤＨ５α，４２℃热敏诱导５～６小时后，超声裂解细菌产物在包被有ｐｒｅ Ｓ２抗原的阻断ＥＬＩＳＡ中，有明显的阻断亲本３Ｂ９单抗对ｐｒｅ Ｓ２抗原的亲和活性，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中，分子量２．８×１０~４处显示一条表达产物带，表达产物占菌体总蛋白的４％左右。初步表明单链抗Ｐｒｅ Ｓ２基因抗体在大肠杆菌中表达，且有较好的Ｐｒｅ Ｓ２抗原结合活性。