GRP78基因短发夹RNA表达载体的构建和鉴定

目的构建葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因短发夹RNA表达载体并鉴定,为探讨GRP78对胃癌发生发展作用及机制提供前期基础。方法运用核糖核酸(RNA)干扰技术构建靶向干扰GRP78蛋白短发夹RNA(GRP78-shRNA)载体,载体经转化、抽提及测序,用脂质体将GRP78-shRNA载体瞬时转染至SGC-7901胃癌细胞中,应用荧光显微镜、反转录定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹(Western blot)观察GRP78表达情况。结果GRP78-shRNA载体测序显示序列正确;转染GRP78-shRNA载体的SGC-7901胃癌细胞可见绿色荧光;qRT-PCR和Western blot结果显示,转染GRP78-shRNA载体的SGC-7901胃癌细胞中GRP78基因和蛋白表达降低。结论成功构建并鉴定GRP78基因短发夹RNA表达载体。     

BDNF在生精功能障碍中潜在作用的研究进展

生精功能障碍是男性不育的主要原因,其致病因素包括炎症、氧化应激、细胞过度凋亡和激素水平变化等。研究表明,脑源性神经营养因子(BDNF)对精子的发生发挥着重要作用。为了解BDNF对生精功能障碍的作用,本文综述了BDNF在炎症、激素、氧化应激和细胞凋亡等生精功能影响因素中的作用,为BDNF作为一种潜在的改善生精功能障碍药物提供理论基础。     

GRP78蛋白在胃癌中的表达及作用

目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在胃癌中的表达及作用。方法收集不同临床分期和分化程度的胃癌标本48例,癌旁正常胃黏膜组织28例。运用免疫组织化学技术检测胃癌及其转移癌组织中GRP78蛋白的表达;采用MTT及Transwell观察GRP78蛋白对SGC-7901胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果免疫组织化学结合临床病理分析结果显示:GRP78蛋白位于胞质,且在胃癌组织中GRP78蛋白较正常胃黏膜组织明显增加,其阳性表达率与胃癌的直径、分化、淋巴结转移、分期、复发有关(P＜0.05)。MTT及Transwell结果显示:干扰GRP78蛋白表达可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖和迁移能力。结论GRP78蛋白在胃癌组织中高表达,其表达水平与胃癌肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期及预后有关。     

链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响

目的 探讨链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法 20只8周龄雄性ICR小鼠，随机分为溶媒对照组和模型组，腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重；第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量，HE染色检测精子存活率及睾丸形态，称量睾丸、附睾的重量；Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组小鼠空腹血糖显著增高，体重降低（P<0.01）；睾丸及附睾重量显著下降（P<0.01）、精子数量显著下降（P<0.05）；睾丸形态结构破坏，生精小管萎缩，管腔直径变小，各级生精细胞排列紊乱，管腔内精子数量减少；睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低（P<0.05）;METTL3、FTO蛋白质表达显著降低（P<0.05）。结论 STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍，其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。