慢病毒载体介导的转基因整合位点研究方法

慢病毒载体整合到宿主细胞的染色体上可以长期稳定表达,目前已成为基因治疗和转基因动物载体研究的热点.慢病毒载体整合的位置效应是影响外源基因表达的重要因素,慢病毒载体整合位点的研究是探索外源基因整合机制的手段之一.转基因整合位点研究的方法主要有5种:荧光原位杂交、个体基因组文库筛选法、反向PCR、接头PCR、锚定PCR.近来的研究后发现整合位点之间可能存在一些共同特征.     

应用接头PCR克隆慢病毒介导的转基因小鼠整合位点旁侧序列

目的 为鉴定慢病毒介导的转基因小鼠中外源基因的整合位点信息,应用接头PCR克隆整合位点旁侧序列.方法 小鼠基因组总DNA酶解后与设计的接头片段连接,根据慢病毒的LTR序列设计巢式PCR引物,克隆转基因小鼠整合位点旁侧序列.结果 成功克隆到转基因小鼠整合位点的旁侧序列,经过测序定位于小鼠染色体上.结论 作为反向PCR的改进,本方法可用于转基因小鼠整合位点旁侧序列的克隆, 为分析整合位点与外源基因表达之间的关系等提供了科学依据.     

我国运动康复人才培育实践与机制剖析——基于多中心治理理论的跨案例研究

目的：运动康复人才是运动康复理念推广与服务践行的主力军，从多领域、新视角来探索我国运动康复人才培育实践，对“健康中国2030”战略的推进实施与体卫融合的落地成效具有重要意义。方法：以多中心治理理论为指导，运用文献资料调研、实地考察、多案例分析等方法，总结凝练我国运动康复人才培育实践中的典型模式，剖析其运行机制。结果：在选取的代表性案例中，我国运动康复人才培育实践形成了具有鲜明特色的学研交叉互促化、专修培训共建制、产品服务导向型3种典型模式，输送了一批与健康促进领域紧密融合的科研攻关、技能服务和经营管理等相关的运动康复人才。结论：我国运动康复人才培育实践蕴含着多元治理主体实现互动培育、差异治理方式体现逐步匹配、系统治理规则呈现趋同规范、共赢治理目标展现双重兼顾的现实境况与发展趋向。