微波及常规加热爆米花中丙烯酰胺含量分析与比较

目的建立爆米花中丙烯酰胺(Am)的分析方法并考察微波及常规加热爆米花中Am的含量。方法采用n,n-二甲基丙烯酰胺(DMA)作内标物,采用固相萃取/离心分离/吸附/GC方法。结果Am的检出限和定量限分别为3μg/L和10μg/L,Am浓度在170~4300μg/L间线性相关系数r=0.9969。试验了7种市售爆米花,其中微波焦糖甜味爆米花检测样本数n=6时,RSD=1.95%。焦糖甜味和奶油咸味两种微波爆米花原料分别经微波膨化(A和D)和常规加热膨化(A′和D′)后,Am含量为:[Am]A=1016.93μg/kg,[Am]D=146.54μgm/kg,[Am]A′=2206.30μg/kg,[Am]D′=970.09μg/kg。结论高糖含量品种经微波膨化后Am含量已略超标,因而具有危害性。但试验范围内微波加工的爆米花总体是安全的,其Am含量明显低于常规加热爆米花。     

黄芩素对miR-183/Kif2a介导乳腺癌细胞增殖和凋亡的机制研究

目的探讨黄芩素对miR-183/Kif2a介导的乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的作用及可能机制。方法噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测黄芩素对乳腺癌细胞增殖活性的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测细胞中miR-183和Kif2a信使RNA的表达,在线靶基因预测软件预测miR-183和Kif2a的靶向关系。转染miR-183抑制剂和pcDNA 3.1-Kif2a,黄芩素处理细胞后,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术测定细胞凋亡,蛋白质免疫印记技术(western blot,WB)检测细胞中G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、p21、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(C-Caspase-3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(C-Caspase-9)蛋白表达。结果经黄芩素处理后的乳腺癌细胞增殖能力下降(P<0.05),细胞中miR-183水平升高(P<0.05),Kif2a信使RNA水平降低(P<0.05)。miR-183靶向结合Kif2a并负向调控Kif2a的表达(P<0.05)。miR-183抑制剂或pcDNA 3.1-Kif2a转染可以逆转黄芩素对乳腺癌增殖、凋亡以及C-Caspase-3、C-Caspase-9、Cyclin D1、p21蛋白表达的作用。结论黄芩素通过miR-183/Kif2a调控乳腺癌细胞增殖和凋亡。     

威海地区男性不育患者Y染色体微缺失和染色体核型分析

目的:通过对威海地区男性不育患者Y染色体微缺失和染色体核型的分析,探讨遗传因素与男性不育之间的相关性,为患者的生育提供指导.方法:通过多重PCR结合琼脂糖凝胶电泳的方法对来院就诊的302例男性不育患者及136例健康男性进行Y染色体微缺失检测,同时用G显带方法分析染色体核型.结果:302例患者中检出染色体异常11例,染色...     

HER-2基因突变在恶性实体瘤中的临床研究进展

近年来,随着在分子水平上对肿瘤发生、发展研究的深入,人们对HER-2这一原癌基因在恶性实体瘤中的作用有了丰富的认识。有研究表明,与传统的HER-2基因扩增相比,某些HER-2 “热点”突变在多种癌症类型中起致癌性驱动作用,且在体外和体内均具有转化能力,有临床试验也验证了以HER-2为靶点的药物对各种携带HER-2突变肿瘤的敏感性。此外,应用下一代测序(NGS)或实时定量PCR（RT-PCR）对活检组织或循环游离DNA(cfDNA)中的基因突变可进行鉴定。本文就HER-2突变在不同恶性实体瘤中的研究现状和临床进展情况进行综述,包括HER-2基因的基本结构与功能、检测方法、突变类型及治疗策略等,以便为下一代抗HER-2靶向治疗提供新的思路和指导。     

替硝唑合剂联合甲醛甲酚封药治疗牙体牙髓病患者的效果

目的：观察替硝唑合剂联合甲醛甲酚封药治疗牙体牙髓病患者的效果。方法：选取80例牙体牙髓病患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组与观察组各40例。对照组采用甲醛甲酚封药治疗,观察组在对照组基础上联合替硝唑合剂封药治疗。比较两组疗效、不良反应发生率、复发率和治疗前后龈沟液炎性指标[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果：观察组治疗总有效率为95.00%,高于对照组的80.00%,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组不良反应发生率为5.00%,低于对照组的22.50%,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组复发率为2.50%,低于对照组的20.00%,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后,两组IL-6、TNF-α水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：替硝唑合剂联合甲醛甲酚封药治疗牙体牙髓病患者可提高治疗总有效率,降低不良反应发生率、复发率和龈沟液炎性指标水平,优于单纯甲醛甲酚封药治疗效果。     

程序性死亡受体1的检测方法及其在乳腺癌中表达的研究进展

近年来,肿瘤的免疫治疗已成为继传统手术、放疗、化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗手段之后新的治疗方法,尤其以程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)位靶点的免疫检查点抑制治疗使得非小细胞肺癌、黑色素瘤等恶性实体肿瘤患者获得了有效持久的临床获益。PD-L1的检测是免疫检查点抑制剂治疗的关键环节,但在乳腺癌中的其检测方法和判定标准尚未统一。就PD-L1的检测方法以及其在乳腺癌各分子分型中的表达进行综述。     

下调miR-421靶向Sirt3调控HepG2肝癌细胞生长和侵袭的机制研究

目的探讨下调miR-421靶向Sirt3调控肝癌细胞生长和侵袭的机制。方法 RT-PCR方法测定肝癌细胞和正常肝细胞中miR-421表达变化。在肝癌细胞中转染miR-421 inhibitor,MTT测定细胞增殖变化,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力变化,Western blotting检测细胞中MMP-9和MMP-2蛋白表达变化。在线靶基因预测软件发现Sirt3可能是miR-421的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在肝癌细胞中共转染miR-421 inhibitor、Sirt3 siRNA,利用上述方法测定细胞增殖、侵袭、迁移能力和MMP-9、MMP-2蛋白表达水平。结果 miR-421在肝癌细胞中的表达水平高于正常肝细胞。miR-421 inhibitor转染后的肝癌细胞增殖能力下降,细胞侵袭和迁移能力降低,细胞中MMP-9和MMP-2蛋白表达减少。Sirt3受到miR-421的靶向负调控作用。Sirt3 siRNA能够逆转miR-421 inhibitor对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移和MMP-9、MMP-2表达的抑制作用。结论下调miR-421靶向Sirt3抑制HepG2肝癌细胞生长和侵袭。     

CAR-T细胞免疫疗法在实体瘤中的研究进展

嵌合抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor T cell,CAR-T）成功治疗复发难治性白血病的历史已超过十年,如今,已有多款CAR-T细胞疗法获批用于治疗白血病和淋巴瘤等血液系统癌症,标志着免疫细胞治疗时代的到来。大量研究结果提示,CAR-T细胞疗法在实体瘤治疗领域同样充满潜力,但相关临床研究数据却不令人满意。CAR-T细胞疗法在实体瘤中面临靶抗原特异性不足、肿瘤物理屏障、异常代谢及免疫抑制性肿瘤微环境等多重不利因素,需要继续深入相关机制的研究,借助基因工程技术对CAR-T细胞进行改造,进一步提升其对实体瘤的疗效。本文就近年来CAR-T细胞疗法在实体瘤中的研究进展做一述评,探讨未来CAR-T细胞治疗的挑战和发展方向。     

真核表达p27构建胃癌顺铂耐药细胞模型的研究

目的:构建p27真核表达载体并导入胃癌SGC-7901细胞获得稳定表达p27的稳定细胞株,以研究p27在胃癌SGC-7901细胞顺铂耐药中所发挥的功能。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增出p27编码区,并将其连接到pCDNA 3.0-Flag载体上,转染293T细胞后分别用定量PCR和Western blot检测其表达情况,并通过Western blot检测SGC-7901细胞过表达Flag-p27稳定细胞株是否构建成功。通过CCK-8药物敏感性实验检测p27在胃癌细胞顺铂耐药中所发挥的功能。结果:双酶切和测序结果表明,pCDNA 3.0-Flag-p27构建成功,并在293T中成功表达,胃癌SGC-7901细胞过表达Flag-p27细胞株建立成功,通过耐药曲线表明过表达p27可以引起SGC-7901细胞顺铂耐药。结论:成功构建了带Flag标签的p27真核表达载体,为进一步研究p27在胃癌耐药中的功能奠定了基础。