预移植在胚胎移植中的意义

目的 :评价预移植在胚胎移植中的作用。　方法 :在超声波引导下胚胎移植 114个周期 ,其中 10 1个周期进行预移植。比较预移植与未预移植周期临床妊娠率和胚胎种植率 ;按预移植与实际胚胎放置深度差值分组 ,并比较两组妊娠率和胚胎种植率。　结果 :预移植周期与未预移植周期临床妊娠率和种植率统计学差异无显著性(5 9.4 1%和 6 1.5 4 % ,35 .81%和 31.4 3% ,P均 >0 .0 5 ) ;按预移植与实际胚胎放置深度差值分组后 ,两组妊娠率和种植率统计学差异也无显著性 (6 1.5 4 %和 5 8.6 7% ,4 0 .79%和 34.0 9% ,P均 >0 .0 5 )。　结论 :在胚胎移植技术中 ,预移植不能准确指引胚胎移植深度     

锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达

目的人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程,本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1表达的影响。方法制备Ad-Flag-KLF12重组腺病毒,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)结合重组腺病毒介导的KLF12过表达实验,阐述人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中KLF12对IGFBP-1表达调控作用。结果成功获得滴度为2×1011ifu/ml的重组KLF12腺病毒,该腺病毒可在人子宫内膜间质细胞中高表达Flag-KLF12融合蛋白;体外分离培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br-cAMP和醋酸甲羟孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)联合诱导蜕膜化后,KLF12的mRNA表达随着诱导时间延长逐渐降低,72h降低最明显,较未刺激降低约70%;过表达KLF12显著抑制8-Br-cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中IGFBP-1mRNA的表达,并以时间依赖的方式明显抑制IGFBP-1的分泌(P0.01);过表达KLF12明显抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1启动子转录活性。结论锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1的表达与分泌。     

PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中协同作用及机制

目的初步探讨PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中的协同作用。方法采用不同浓度的PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路抑制剂rapamycin与PD98059分别单独及联合作用于胃癌细胞SGC-7901。采用CCK8法检测SGC-7901细胞增殖情况;实时荧光定量PCR检测关键基因m RNA的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化。结果 Rapamycin(12.5、25、50、100、150、200 nmol/L)与PD98059(25、50、100、200、300、400μmol/L)单独作用可抑制SGC-7901细胞增殖活性,联合作用也可抑制其活性,且联合组的抑制作用强于单独作用(P0.05)。与rapamycin、PD98059单独作用相比,联合组对AKT、m TOR、MEK、ERK基因m RNA表达和p-AKT、p-m TOR、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达的抑制作用明显增强(P0.05)。联合组阻滞于G0/G1期的细胞比例显著增多,且具有更强的促凋亡作用。结论 PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中具有一定的协同调控作用。     

不同冷冻方法造成的冻融胚胎卵裂球损伤对于移植完整胚胎发育潜能的影响

目的探讨分裂期胚胎经玻璃化冷冻法和慢速程序冷冻法冻融后,不同胚胎卵裂球的存活状态对移植完整胚胎后胚胎发育潜能的影响。方法回顾性分析994个（共2 081枚分裂期胚胎）冻融胚胎移植（FET）周期,根据胚胎冷冻保存方法和复苏后胚胎的卵裂球完整与否分为四组：玻璃化冷冻复苏后胚胎卵裂球均完整组（A组）552例,玻璃化冷冻复苏后胚胎卵裂球部分损伤组（B组）156例,慢速程序化冷冻复苏后胚胎卵裂球均完整组（C组）115例,慢速程序化冷冻复苏后胚胎卵裂球部分损伤组（D组）171例,四组均选择完整胚胎进行移植。比较四组的临床妊娠率、胚胎种植率及抱婴回家率。结果 B、D组复苏的胚胎数显著高于A、C组（P均〈0.01）,在临床妊娠率、胚胎种植率和抱婴回家率的比较中,A组显著高于B组（54.89%、44.87%,37.67%、31.39%,46.37%、35.90%（P均〈0.05）,C组与D组比较均无统计学差异（P均〉0.05）。结论经不同冷冻保存技术解冻的无卵裂球损伤的优质胚胎,都具有较高的发育潜能。玻璃化冷冻技术中,卵裂球损伤胚胎中剩余胚胎的发育潜能低于复苏后均完整的胚胎;而慢速程序化冷冻技术中,胚胎卵裂球损伤对剩余胚胎的发育基本无影响。     

基础甲状腺功能与IVF-ET妊娠结局的相关性研究

目的研究基础甲状腺功能三项(TSH、FT3、FT4水平)与体外受精-胚胎移植妊娠结局之间的关系。方法以2014年9月至2015年5月在南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行长方案体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植术(IVF/ICSI-ET)并行新鲜胚胎移植的不孕症患者作为研究对象。于IVF前月经第2~4天空腹留血,检测基础甲状腺功能三项:促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)。纳入甲状腺功能三项均正常的患者486例,分析基础甲状腺功能与IVF/ICSI妊娠结局的关系。结果 (1)486例患者中临床妊娠305例,活产249例,早期自然流产23例;(2)临床妊娠组与未妊娠组比较,TSH、FT3、FT4水平均无统计学差异(P0.05),临床妊娠组女方年龄小[(29.4±3.9)vs.(30.7±4.3)岁,P=0.001)]、子宫内膜厚[(11.0±2.2)mm vs.(9.9±1.9)mm,P0.001)];(3)活产组与早期自然流产组相比,基础TSH、FT3、FT4差异均无统计学意义(P0.05);(4)基础TSH≥2.5mIU/L的患者与TSH2.5mIU/L者的临床妊娠率、活产率、早期自然流产率和新生儿出生体重均无统计学差异(P0.05)。结论基础甲状腺功能三项如在正常范围不影响IVF结局,IVF前TSH≥2.5mIU/L但4.2mIU/L时不增加早期自然流产率,也不影响新生儿出生体重。     

短时受精联合早期补救性卵细胞胞质内单精子注射在完全受精失败周期的临床应用

目的:评估短时受精联合早期补救性卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)术在完全受精失败周期的应用结局。方法:10例体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期获取的卵细胞随机分组,分别采用短时受精与过夜受精,比较受精率与胚胎质量。105例常规IVF-ET周期短时受精后,行极体观察,早期判断完全受精失败后行补救性ICSI术,报道临床结局。结果:3h短时受精与过夜受精在受精率与胚胎质量上无明显差异(P>0.05)。短时受精联合早期受精失败补救后,临床妊娠率为53.3%,种植率为38.0%,出生婴儿64名。结论:短时受精联合早期补救性ICSI对常规IVF-ET周期完全受精失败患者的临床结局有明显改善。     

宫腔灌注hCG对反复种植失败及复发性流产患者外周血Treg的影响

目的:探讨宫腔灌注人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)对外周血Treg细胞的调节作用,进而为反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)及复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者宫腔灌注hCG治疗提供理论依据?方法:选择2015年1—7月在南京鼓楼医院生殖中心行辅助助孕RIF的患者14例?RSA患者16例,于自然周期黄体中期行宫腔灌注hCG?分别用流式细胞仪鉴定计数灌注前后的外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞率?结果:宫腔灌注hCG后RIF组患者外周血中Treg的表达率[(2.26 ± 0.63)%]较灌注前[(1.72 ± 0.69)%]显著上升,差异有统计学意义(P < 0.05);宫腔灌注hCG后RSA组患者外周血中Treg的表达率[(2.33 ± 0.56)%]较灌注前[(1.74 ± 0.62)%]显著上升,差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:宫腔灌注hCG能提高RIF及RSA患者种植窗期外周血Treg细胞百分比,诱导免疫耐受,促进胚胎植入,降低流产率?     

CSRM数据报告:2008～2018年中国健康男性精液质量变化分析

目的探讨近10年中国健康男性精液质量的变化情况。方法中华医学会生殖医学分会(CSRM)收集2008~2018年向中国七家精子库8 989位捐精者基本情况及精液参数,按照WHO《人类精液检查与处理实验室手册》标准分析精液体积、精子浓度、前向运动百分率和正常形态率等参数。资料分析方法采用ANOVA分析、偏相关分析、线性回归分析等。结果研究对象总样本量为8 989人,平均年龄为(26.26±5.35)岁。2008~2018年间,精液体积、精子浓度、精子总数、总活力百分率、前向运动精子百分率、精子正常形态率各参数均值有统计学差异(P<0.001);偏相关分析控制年龄、BMI因素,结果显示精液体积、精子总数、前向运动百分率、精子正常形态率均与时间呈负性相关,系数分别为-0.177、-0.135、-0.104、-0.084(P<0.001)。线性回归分析显示精液体积、精子总数、前向运动精子百分率、精子正常形态率变化与时间相关,均呈下降趋势(β=-0.148、-9.988、-0.134、-0.695;P<0.001)。结论 2008~2018年间,中国健康男性精液质量随时间变化呈下降趋势。     

胚胎实验室关键指标质控专家共识

辅助生殖技术(ART)胚胎实验室涉及的配子及胚胎操作流程多而复杂,如何有效选取并利用关键指标对胚胎实验室进行全面质量管理(TQM)显得尤为关键。因此,中华医学会生殖医学分会制定"胚胎实验室关键指标质控专家共识",为我国各地辅助生殖中心胚胎实验室对其进行有效的质量管理提供参考。     

溶剂及凝胶浴对硝酸纤维素膜结构的影响

利用丙酮(AC)、二甲基乙酰胺(DMAc)和二甲基亚砜(DMSO)三种不同溶剂制备硝酸纤维素铸膜液。考察了溶剂的性质及凝胶浴组成对膜结构的影响,利用扫描电镜表征了膜的表面及截面结构,通过成膜过程的热力学和动力学分析解释了不同膜结构的形成原因。结果表明:溶剂的种类及凝胶浴中溶剂的含量对膜结构的影响很大,其变化规律也是不同的。