人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7编码区序列变异研究

目的获取人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列并进行变异分析,为新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术获取人乳头瘤病毒16型感染宫颈脱落细胞。设计特异性引物,扩增人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析。结果通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞的分型检测,获得了人乳头瘤病毒16型感染阳性标本;选择其中3份阳性标本核酸为模板,通过特异性引物均成功扩增出大小介于750 bp和1 000 bp之间的目的序列;分别克隆到T载体上并测序,得到3条人乳头瘤病毒16型早表达基因E6/E7的编码区序列,克隆并测序后向GenBank核酸数据库提交获收录,登录号分别为EU869316、EU869317和EU869318;经BLAST分析,3条序列与GenBank序列PPH16（Accession：K02718）的E6/E7编码区序列一致性均为99%,且存在8种碱基置换,其中4种为同义突变,另4种则可引起所编码的相应氨基酸残基改变。结论本研究得到了与HPV高危型16型PPH16高度相似的E6/E7编码序列,为HPV致病机制和新型分子检测方法研究奠定了基础。     

晚期流产合并下肢血栓性静脉炎一例

晚期流产合并下肢血栓性静脉炎一例朱宜南孙洪青周瑞芳患者２９岁。自然流产２天。发烧、下肢肿痛１天，于１９９５年３月２１日入院。末次月经１９９４年９月２６日。孕期经过正常。两天前在家中自然流产。次日晨起感双下肢疼痛，不能站立及行走。中午突发高热入当地医院...     

广州东部妇女宫颈人乳头瘤病毒16型感染及基因分析

目的 研究广州东部妇女中人乳头瘤病毒16型(HPV-16)宫颈感染分布,分析其早基因E6/E7的多态性,分析L1和E6基因定量与病程的关系.方法 通过导流杂交基因芯片技术检测宫颈脱落细胞的HPV-16感染;通过特异性扩增获取病毒早基因E6/E7序列,克隆测序并进行多态性分析;荧光定量PCR技术对E6基因和L1基因进行定量分析.结果 806例宫颈脱落细胞样本中HPV-16感染阳性36例(4.5%),其中18例(50.0%)宫颈细胞发生高度以上病变;7例(4例低度或以下病变,3例高度以上病变或浸润癌)阳性标本得到E6/g7序列有15个位点分别出现变异;高度病变组(A组,11例)与低度或以下病变组(B组,14例)的L1基因和E6基因定量数据对数值均有显著差异(P<0.05),但L1/E6比值差异无统计学意义(P=0.19).结论 本地区在17～62岁妇女中HPV-16感染阳性发生率约4.5%,50.0%发生高度以上宫颈病变,本研究显示病毒基因拷贝数与宫颈病变程度可能有关,L1/E6比值未能提示病毒整合的发生.     

广州东部HPV基因型分布及其优势基因型E6／E7核酸序列分析

目的研究广州东部人乳头瘤病毒基因型分布特征,并获取优势基因型早基因E6／E7的核酸序列,进行变异分析,为本课题组下一步新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的人乳头瘤病毒基因分型检测,分析本地区基因型分布特征,确定优势基因型;根据GenBank序列设计特异性引物,用于扩增优势基因型的早基因E6／E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析。结果通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的分型检测,检测了536份宫颈脱落细胞标本,HPV阳性占27.2％（146／536）,其中多基因型感染占29.5％（43／146）,高危型感染中52型为优势基因型,频数达23.3％（37／159）。HPV感染与52型HPV感染的年龄分布显示低年龄组（即A组,≤25岁）妇女最高。3份52型HPV感染阳性标本的核酸模板,通过特异性引物均成功扩增出大小接近750bp的目的序列;分别克隆到T载体上并测序,得到3条人乳头瘤病毒52型早表达基因E6／E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析;3条序列经BLAST分析,与GenBank数据库HPV52型序列（Accession：X74481）的E6／E7编码区序列一致性均为99％,三条序列（EU924143、EU924144、EU924145）存在6种碱基置换,其中2种可引起所编码的相应氨基酸残基改变。结论本研究可确认广州东部地区妇女宫颈感染HPV中A组（17-25岁）具有最高的感染率;宫颈感染HPV的优势基因型为52型;我们通过克隆策略得到了与HPV高危型52型X74481高度相似的E6／E7编码序列,为课题组后续进行的HPV致病机制和新型分子检测方法研究提供了重要基础。     

米索前列醇配伍催产素预防产后出血

目的 :探讨米索前列醇配伍催产素在防治产后出血中的应用效果。方法 :将 14 5例阴道分娩的有产后出血高危因素的产妇随机分为观察组 75例和对照组 70例。观察组在胎儿娩出后立即口服米索前列醇 40 0 μg。对照组在胎儿娩出后静脉点滴催产素 2 0U + 5%葡萄糖 50 0mL。两组均在胎肩娩出后常规肌肉注射催产素 10U。结果 :两组产后2h出血量比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;产后出血病例两组有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :口服米索前列醇配伍催产素在预防产后出血方面具有简单快捷、价廉、高效、安全的优点 ,可试用于产科高危病人 ,特别是对有产后出血高危因素者更应预防性使用