应用LAMP技术对4种疟原虫进行属种鉴定的初步研究

摘要：目的建立对4种感染人的疟原虫虫属及定量的环介导等温扩增法（100p—mediated isothermal amplification,LAMP）基因检测方法。方法根据恶性疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫、间El疟原虫的18SrRNA基因共有保守序列及LAMP技术原理,设计一套含有6条疟原虫虫属特异性引物的LAMP反应体系,产物经SYBRGreenI进行显色反应及电泳分析,观察其特征条带的情况,利用LAMP技术检测上述4种疟原虫DNA及其它12种相关寄生虫DNA评价反应特异性,利用PCR技术为参照对LAMP技术检测疟原虫虫属试验的敏感性,利用疟原虫重组质粒探索建立疟原虫LAMP定量的可能性。结果4种疟原虫LAMP产物经显色后呈绿色,经电泳后呈特征性梯状条带,阴性对照及其它相关寄生虫DNA无明显扩增,重组质粒浓度在1．42X10^4～1．42X10^9拷贝机l范围内时,反应循环阈值与模板浓度有良好的线性关系（r=0．9995）。与PCR方法相比较,建立的疟原虫虫属LAMP检测方法的敏感性是其10倍,检出限达到1．42X10^1拷N／μl。结论建立的检测疟原虫属种、数量的LAMP方法具有较高的特异性和敏感性,适合疟疾防治检测的需要。     

98例肝吸虫病危险因素分析

目的:探索肝吸虫感染的影响因素,为采取相应干预措施提供科学依据.方法:采用以医院为基础的病例对照研究方法,对确诊病例及选取的对照进行问卷调查.结果:肝吸虫病相关危险因素包括年龄40～50岁(OR=4.034,95％ CI 1.334～12.203);文化程度:文盲及小学(OR=10.294,95％ CI 2.866～ 36.973)、初中(OR=3.219,95％ CI 1.228～8.820);经常及偶尔生食或半生食淡水鱼(OR=20.774,95％ CI 5.992～ 72.025),(OR=14.714,95％ CI 5.564～38.908);经常食用生或半生淡水虾(OR=3.151,95％ CI 1.533～5.865);经常有过抓生鱼后不洗手就抓食物吃(OR=2.759,95％ CI 1.262～6.033).结论:影响肝吸虫感染的主要因素为不同年龄、不同文化程度、是否生食或半生食淡水鱼、是否生食或半生淡水虾、是否有过抓生鱼后不洗手就抓食物吃.     

彭静山眶内四穴治疗眼睑下垂13例

<正> 跟睑下垂,亦称“上胞下垂”、“脸废”,是指上睑不能完全提起,以至遮盖部分或全部瞳仁。可发生单侧或双侧。因眼睑属脾,故临床常用脾经穴来治疗,但疗效不佳。彭静山教授以眶内四穴为主治疗本病取得满意疗效,兹     

使用环介导等温扩增技术快速检测金黄葡萄球菌的初步研究

目的 探索建立一种快速的、简单的检测金黄葡萄球菌的环介导等温基因扩增方法(100p-mediated isothermal amplification,LAMP).方法 针对金黄葡萄球菌clfA基因保守序列,根据LAMP方法的原理,设计LAMP检测反应体系和程序,对方法的特异性、灵敏度、重复性及初始拷贝数的对数值与反应时间(荧光信号值为1×10~4时对应的时间)之间的线性关系进行评估.结果 使用LAMP方法可以在0.5 h内获得检测结果,LAMP检测技术的灵敏度高出经典PCR技术10倍以上,与其他相关致病菌无交叉反应,平均试验间变异系数小于5%,反应时间与模板浓度有良好的线性关系(r~2=0.9501),LAMP法检测临床样本中金黄葡萄球菌的灵敏度为100%,特异度为94.4%,符合性为96.6%.结论 该方法快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点适合基层医疗卫生机构和现场查验机构的广泛应用.     

最新血压标准变化下高血压与心血管疾病关联

目的 本文探究了2020 ISH高血压指南与2017 ACC/AHA高血压指南定义下的血压标准与天津市老年人特别是原定义为高值血压现定义为正常血压人群的心血管疾病发生风险的关联,为进一步评价2020 ISH新指南定义标准在预防心血管疾病的应用中提供参考。方法 基于2014年进入天津市居民健康档案队列,通过整群抽样,选取天津市部分地区60岁以上191 043名老年人的血压测量随访数据。血压诊断采用2种标准:2017 ACC/AHA高血压指南、2020 ISH高血压指南。统计学方法采用卡方检验、独立样本t检验及Cox比例风险模型。结果 介于120/80 mm Hg与130/85 mm Hg之间的血压值在2017年ACC/AHA指南中为高值血压,但在2020年ISH新的血压指南中为正常血压。此区间的51 605名老年人群发生主要心血管事件的风险HR=1.248,95%CI: 1.187～1.313,高于两个标准下均为正常血压的人群,HR有统计学意义。结论 位于120/80～130/85 mm Hg区间的107 575名人群可能会增加CVD发生风险,仍需密切关注。应基于我国实际人口发展状况,采取高血压防线关口前移策略,通过控制发病率降低实现更加有效的防治。