酵母双杂合系统AD端阴离子交换蛋白C-末端表达质粒的构建

利用PCR方法，从阴离子交换蛋白1（AE1）全长cDNA中扩增出约350bp c末端cDNA片段，测序后将其克隆至pGADT7载体上，用醋酸锂法构建好的pADT7-AE1-c末端转染酵母菌HA109，观察其在选择性培养基上的表达情况。结果表明，获得了530bp AE1c－末端cDNA,pGADT7-AE1-c末端对酵母无毒性，不能激活检测基因，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。     

单纯全麻与全麻复合硬膜外阻滞用于开胸手术的比较

胸科手术具有创伤大,应激反应强烈,手术时间长,术后疼痛明显等特点,麻醉实施有一定难度。本文旨在研究单纯全麻与全麻复合硬膜外阻滞用于开胸手术时麻醉药用量、血流动力学、血糖浓度等变化,以供临床参考。     

CFSE检测马传染性贫血病毒疫苗免疫马T细胞增殖方法的建立

目的:以流式细胞术(FCM)检测马传染性贫血病毒(EIAV)抗原特异性的T淋巴细胞增殖.方法:将新鲜分离的马外周血单个核细胞(PBMC)进行CFSE 染色, 经纯化病毒体外刺激并培养5 d后, 进行T淋巴细胞亚型标记, 检测特异性增殖的CD4 和CD8 细胞比例.结果:对马PBMC的染色浓度、特异性刺激物的种类及反应时间等条件进行了优化.可对马外周血抗原特异性T淋巴细胞不同亚型的增殖水平进行定量评价 .结论:FCM检测方法为研究马传染性贫血病毒疫苗免疫保护机制提供了一个有效的手段; 该法也可以为其他病毒的免疫学研究提供借鉴.     

前锯肌平面阻滞与胸椎旁神经阻滞在非插管胸腔镜手术中的应用效果比较

目的 比较前锯肌平面阻滞(serratus anterior plan block,SAPB)与胸椎旁神经阻滞(thoracic paravertebral nerve block,TPVB)在非插管胸腔镜手术(non-intubated video-assisted thoracoscopic surgery,NIVATS)中的应用效果。方法 选取2022年1—10月山东省济宁市第一人民医院收治的60例行NIVATS的患者为研究对象，采用随机数字表法分为观察组和对照组，每组30例。麻醉诱导前，观察组给予SAPB，对照组给予TPVB。比较分析两组患者的手术相关指标，麻醉前(T₀)、开胸后15min(T₁)、开胸后30min(T₂)、术毕(T₃)、拔除喉罩后15min(T₄)的血流动力学指标[平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、心率(heartrate,HR)],T₀、T₂、T₄时刻...     

腹腔镜手术患者CLMA喉罩、SLIPA喉罩与PLMA喉罩气道管理的效果

目的 比较经典型喉罩(CLMA喉罩)、SLIPA喉罩和食管引流型喉罩(PLMA喉罩)用于腹腔镜手术患者气道管理的效果.方法 择期行腹腔镜手术患者123例,年龄20～64岁,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,随机分为3组:CLMA组(C组,n=41)、SLIPA组(S组,n=42)和PLMA组(P组,n=40).麻醉诱导后置入喉罩,行间歇正压通气.测定气道密封压后实施气腹.评估喉罩置入难易性.记录首次喉罩置入情况、喉罩置入时间、麻醉恢复时间和不良反应的发生情况.于气腹前及气腹压至12 mm Hg时记录气道吸气峰压(PIP)及气道密封压＜PIP的发生情况.结果 C组有1例患者更换喉罩型号后置入成功,其余患者均首次喉罩置入成功,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较,S组喉罩置入时间和麻醉恢复时间缩短,喉罩置入容易,P组喉罩置入时间延长,气道密封压升高,气道密封压＜PIP的患者减少(P＜0.05).与S组比较,P组喉罩置入时间和麻醉恢复时间延长,喉罩置入稍难,气道密封压升高,气道密封压＜PIP的患者减少(P＜0.05).与气腹前比较,各组气腹至12 mm Hg时PIP升高(P＜0.05).三组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CLMA喉罩、SLIPA喉罩和PLMA喉罩均可保证有效通气,不良反应少.SLIPA喉罩置入更简单,而PLMA喉罩气道密封效果好,更适用于腹腔镜手术患者.     

酵母双杂合系统BD端血型糖蛋白A 表达质粒的构建

目的:获得血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段,并构建酵母双杂合BD端表达质粒。方法:利用RT-PCR方法,从K562细胞mRNA中扩增GPAcDNA片段,约410bp。测序后将其克隆至pbridge载体上。用醋酸锂法将构建好的pbridge-GPA转染酵母菌AH109,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果:克隆到的410bpGPAcDNA编码的氨基酸序列基本与公布序列相同。pbridge—GPA转染酵母菌后,在SD/Gal/—His/Ura培养基上出现1mm大小白色菌落。结论:获得了血型糖蛋白AcDNA克隆,pbridge—GPA对酵母无毒性,不能激活检测基因,可作为酵母双杂合系统中的靶基因。     

保留自主呼吸喉罩全麻在胸腔镜手术患者中的应用效果

目的 探讨保留自主呼吸喉罩全麻在胸腔镜手术患者中的应用效果。方法 选取2022年1月至6月山东省济宁市第一人民医院行胸腔镜手术患者60例,按照随机数字表法将其分为观察组和对照组,各30例。观察组行保留自主呼吸喉罩全麻,对照组行双腔气管插管全麻。比较两组手术时间、插管前后平均动脉压差值、插管前后心率差值、术中全麻药用量、最低脉搏血氧饱和度(SpO₂)、最高呼气末二氧化碳分压(PetCO₂)、术野暴露评分、纵隔摆动及呛咳发生率;比较两组麻醉前(T₀)、开胸后30 min(T₁)、关胸后30 min(T₂)动脉血氧分压(PaO₂)及动脉血二氧化碳分压(PaCO₂);比较两组术后拔管时间、麻醉恢复室停留时间、首次下床时间、胸管留置时间、术后住院时间;比较两组术后麻醉相关并发症及肺部并发症发生情况。结果 两组未见纵隔摆动发生。观察组插管前后平均动脉压差值、心率差值低于对照组,术中瑞芬太尼、舒芬太尼用量少于对照组,最高PetCO₂     

血型糖蛋白AcDNA的克隆及其酵母双杂交系统BD端 pGBkT1—GPA质粒的构建

目的 :检测红细胞膜跨膜蛋白质———血型糖蛋白Ａ(ＧＰＡ)对酵母细胞是否有毒性及其能否激活检测基因 ,以进一步揭示ＧＰＡ与带Ⅲ蛋白的相互关系。材料与方法 :培养红白血病细胞 (Ｋ562 )直到细胞总数达到1 0 9以上 ,收获细胞 ,用于粗提核内容物的制备。收集增殖状态Ｋ562细胞 1 0ｍＬ ,提取总ＲＮＡ以ｏｌｉｇｏ(ｄＴ)为引物反转录合成ｃＤＮＡ。参照ＧＰＡＧＥＮＢＡＮＫ数据库中检索到的序列设计引物 ,ＰＣＲ扩增ＧＰＡｃＤＮＡ。ＰＣＲ产物纯化后 ,进行补平 ,平端连接于ＰＵＣ1 9质粒上。将经过阳性选择的重组质粒纯化、测序。双酶切Ｐ…     

鸡干扰素基因的分子克隆与序列测定

目的：从接种新城疫Ｆ４８Ｅ９病毒的Ｌａ Ｓｏｔａ疫苗免疫鸡体外有丝分裂原刺激的脾淋巴细胞中克隆鸡干扰素基因。方法：应用逆转录多聚酶链式反应技术扩增,常规平端连接、转化及序列测定技术进行验证。结果：研究表明克隆得到的基因与国外报道的鸡胚成纤维细胞干扰素基因。结论：鸡在该状态下其脾淋巴细胞表达鸡胚成纤维细胞干扰素ｍＲＮＡ。