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人胰岛素样生长因子1的真核细胞表达及其鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 构建人胰岛素样生长因子1(IGF-1)的真核细胞表达质粒。方法 用PCR方法从人的肝细胞cDNA文库中克隆出IGF-1cDNA,然后定向插入真核细胞表达载体pcDNA3中,并用脂质体方法转染COS7细胞。用ELISA法和人胚肺纤维母细胞以及NIH3T3纤维细胞增殖法分别测定转染细胞上清液中IGF-1的含量和生物活性。结果 重组的真核细胞表达质粒pcDNA3-IGF-1所含的IGF-1cDNA序列和插入方向均正确,其转染的COS7细胞分泌较高浓度的IGF-1,并且具有明显促进纤维细胞增殖的能力。结论 本实验所构建的重组真核细胞表达质粒pcDNA3-IGF-1能够高效表达有活性的IGF-1,对进一步研究IGF-1体内表达的生理和病理作用有一定意义。 相似文献
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