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矽肺及矽尘作业工人生物监测指标的探讨 总被引:8,自引:0,他引:8
目的探讨与纤维化有关的血清检测指标作为矽尘作业生物监测标志物的意义。方法取被测者空腹静脉血分离血清,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中转化生长因子β1(TGFβ1)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、层黏连蛋白(LN)的水平,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,氯胺T法测定羟脯氨酸(Hyp)含量。结果接尘组LN[(121.6±20.5)μgL]比对照组[(99.4±12.1)μgL]明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而TGFβ1、Hyp、TNFα、SOD水平两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。矽肺组TGFβ1、LN水平高于接尘组和对照组,SOD水平低于接尘组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);TNFα有下降的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。血清TGFβ1水平与血清LN、Hyp水平呈正相关(r值分别为0.68、0.52,P<0.05)。经过逐步判别分析,从指标中筛选出3个有统计学意义的变量(TGFβ1、SOD、LN),用它们建立判别方程,对照组的错判率是3.23%,矽肺组的错判率是12.12%。结论血清TGFβ1、SOD和LN水平作为矽肺生物监测标志物有一定意义,其实用价值仍有待研究。 相似文献
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目的:研究盐皮质激素受体(MR)在博来霉素诱导的实验性肺纤维化进展过程中的作用及机制。方法:将126只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、博来霉素组和MR阻断剂螺内酯干预组,气管内一次性滴注博来霉素(2.5 mg/kg)溶液建立实验性小鼠肺纤维化模型,螺内酯干预组每天按螺内酯20 mg/kg经灌胃给药。于术后12 h、1 d、2 d、3 d、7 d、14 d和28 d处死小鼠,采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用real-time PCR检测各组肺组织中胶原1(Col1)、Col3、转化生长因子β(TGF-β)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及MR mRNA的表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,博来霉素组及螺内酯干预组小鼠在滴注博来霉素后经历了典型的急性炎症期(12 h~3 d)、纤维化进展期(14 d)和纤维化晚期(28 d)。阻断MR下调早期炎症反应并减轻了纤维化程度。(2)螺内酯干预可以有效降低MR mRNA表达水平;阻断MR在急性炎症期显著下调MCP-1 mRNA的表达,在14 d显著下调TGF-β、Col1和Col3 mRNA表达水平。结论:(1)阻断MR可以明显减轻博来霉素诱导的肺纤维化程度;(2)阻断MR可能通过在急性炎症期调节MCP-1和TGF-β的表达,减轻炎症反应,并在纤维化进展期,下调TGF-β的表达,从而抑制肺纤维化的进展。 相似文献
3.
目的 应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响.方法 通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株.用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能.结果 成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80%.CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降(P<0.05);流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低(P<0.05);Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱(P<0.05).结论 建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低. 相似文献
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目的 构建小鼠 Krüppel 样因子 4(KLF4)慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达小鼠腹腔巨噬细胞 RAW264.7 细胞株。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因 KLF4 后,构建重组质粒 pLVX-KLF4,并 通过 PCR、双酶切和测序方法对其进行鉴定。重组质粒与 pSPAX2、pMD2.G 辅助质粒通过 Lipofectamine® 3000 共转 染 293T 细胞,包装病毒并测定病毒滴度。将获得的慢病毒感染 RAW264.7 细胞,实时定量 PCR 法检测 KLF4 mRNA 的表达。分选流式细胞仪分选 GFP 阳性 RAW264.7 细胞。流式细胞术检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞周期的影响。 EdU 法检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞增殖的影响。结果 经 PCR、双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含小鼠 KLF4 基因的慢病毒穿梭质粒,RT-PCR 证实 Lenti-KLF4 感染的 RAW264.7 细胞中 KLF4 mRNA 表达高于未感染的 对照组 RAW264.7 细胞(P<0.05)。初次浓缩后测定小鼠 KLF4 基因重组慢病毒的滴度为 2.05×108 TU/mL。分选出 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞。KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞周期变化显示为 S 期延长,G0/G1 期缩短。EdU 检 测显示 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞增殖活性增高。结论 成功构建了 KLF4 的慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞株,KLF4 过表达促进了 RAW264.7 细胞的增殖。 相似文献
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目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组:野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(shMR)组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果:(1) MR shRNA能明显抑制RAW 264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2) 从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组(P<0.05),说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3) WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期比例明显下降,增殖指数下降(P<0.05)。(4) WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。 相似文献
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【目的】观察中药有效成分土槿乙酸(pseudolaric acid B,PB)对脂多糖(lipopolysaccharudes,LPS)诱导的RAW264.7源性巨噬细胞表型偏移的影响,初步探讨其可能的作用机制。【方法】LPS诱导小鼠RAW264.7源性巨噬细胞建立体外细胞模型,实时定量PCR法检测PB处理前后RAW264.7源性巨噬细胞表型偏移的变化,划痕实验和流式细胞术分别检测细胞迁移能力及细胞周期。【结果】PB能够降低LPS诱导的RAW264.7源性巨噬细胞M1表型标志物IL-1β、i NOS、TNF-α的m RNA表达水平,提高M2表型标志物Arg1、Mrc1的m RNA表达水平,使其细胞迁移能力降低、细胞阻滞在G0和G2期。【结论】PB可抑制LPS诱导的RAW264.7源性巨噬细胞向M1型偏移,对巨噬细胞中介的相关疾病可能具有潜在的免疫调节作用。 相似文献
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生产场所矽尘环境瞬时浓度与时间加权平均浓度关系的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
[目的 ]探讨生产场所矽尘环境瞬时浓度 (EIC)与其时间加权平均浓度 (TWA)间的关系。 [方法 ]在铸造厂、耐火材料厂和锡矿同时测定矽尘EIC和TWA。提出理想瞬时浓度的概念 ,基于理想瞬时浓度及其取值集合S的共同框架来分析EIC与TWA两者的关系 ,推导出TWA理论 =μeσ2 / 2 。以该公式将上述 3家厂矿EIC换算为理论TWA ,并与相应TWA实测值比较。 [结果 ]理论与实测TWA间的差别在耐火材料厂和锡矿均无显著性 (t =1.961和t =1.746,均P >0 0 5 ) ,该公式成立 ,而在铸造厂则否 (t=7.772 ,P <0 .0 5 )。 [结论 ]生产性矽尘EIC与TWA之间在多数情况下存在一定的函数关系 ,经TWA理论 =μeσ2 / 2可将EIC转换为TWA ,这对于我国制订粉尘职业接触限值时确定其TWA限值 ,以及对于TWA的上限值容许上移多少这一国际上有争论的问题均有指导作用 相似文献
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正确运用生物医学软件可以培养医学研究生科学缜密的思维方式,提高其科研和创新能力。按需定位课程目标和内容,结合现代化的教学手段和实用性的考核形式,对《生物医学软件应用》课程设置进行探索。使研究生更全面掌握生物医学软件的相关知识与技能,为其顺利开展科研工作奠定良好基础。 相似文献
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【目的】建立测定螺内酯脂质体含量及包封率的高效液相色谱方法。【方法】分别采用透析法和超速离心法分离螺内酯脂质体和游离药物,以HPLC法测定药物含量,计算包封率。【结果】在选定色谱条件下,辅料不干扰测定,螺内酯在0.5~8.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999,n=6),日内日间精密度(RSD)均〈2%,平均加样回收率为99.85%。透析法可使螺内酯脂质体和游离药物得到良好的分离。【结论】透析法测定螺内酯脂质体的含量及包封率准确可靠、操作简便。 更多还原 相似文献