中医辩证治疗椎-基底动脉缺血性眩晕54例

椎-基底动脉缺血性眩晕是以椎-基底动脉硬化、颈椎退行性变以及血粘度增高等为病理基础,临床主要表现与头位及体位变化有关的眩晕.本病常见于中老年人,由于小脑及脑干依靠椎-基底动脉的供血,当椎-基底动脉发生病变时,脑部血流不畅,供血不足,常出现眩晕等症状.笔者近年来采用中医辩证治疗本病54例并与对照组进行对比研究,取得满意疗效,现报道如下.     

乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes对血管内皮细胞EGFR表达的影响

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes介导表皮生长因子受体(EGFR)对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)EGFR表达影响,探讨肿瘤组织血管内皮细胞异常表达EGFR的机制。方法超速离心及密度梯度离心法提取MDA-MB-231细胞源exosomes;免疫细胞化学法检测MDA-MB-231细胞EGFR的表达;Western blot法检测MDA-MB-231细胞、exosomes及HUVECs EGFR蛋白表达;免疫细胞化学法检测HUVECs与exosomes共培养24h后EGFR的表达;RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞与实验组HUVECs细胞EGFR mRNA的表达。结果 EGFR在MDA-MB-231细胞中呈高表达,MDA-MB-231细胞及exosomes可见相对分子质量为170×103的EGFR蛋白呈阳性反应带,HUVECs呈阴性反应带;HUVECs与exosomes共培养24h后,镜下可见实验组部分HUVECs细胞质有淡黄色或棕黄色颗粒,EGFR阳性表达率为(21.4±3.1)%,与对照组(无EGFR蛋白表达)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。MDA-MB-231细胞EGFR mRNA表达阳性,而实验组HU-VECs EGFR mRNA表达阴性。结论 MDA-MB-231细胞源exosomes携带癌基因EGFR,并能介导其向周围血管内皮细胞转移,这可能是肿瘤内皮细胞异常表达EGFR的一种方式。     

几种组织培养上清液对造血祖细胞体外增殖分化的比较

目的：寻求既经济又有效的造血生长因子样活性物质。方法：采用造血祖细胞体外培养与造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术,检测胎肌培养上清液、骨液基质细胞培养上清液、胸腺细胞培养上清液与脾细胞培养上清液对造血祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍix增殖分化的影响。结果胎肌培养上清液和对ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＦＵ－Ｍix的体外地产殖与分化有明显刺激作用。而胸腺与脾细胞条件培养上清液对ＢＦＵ－Ｅ的生长有显著促进作用。结论：胎肌培养上清液中可能含ＧＭ－ＣＳＦ样活性物质。而胸腺与脾细胞培养上清液具有较高ＩＬ－３样活性,可以利用组织与细胞培养上清液替代重组造血生长因子进行造血细胞的实验研究和临床诊断。     

移植性人白血病小鼠模型的建立

目的:建立移植性人白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠模型,探讨人白血病细胞在SCID小鼠体内的生物学行为,为研究药物等因素治疗白血病的体内方法奠定基础。方法:在SCID小鼠腹腔或静脉分别接种5×106～1×107个K562细胞,应用组织细胞化学、RT-PCR、流式细胞术、组织病理监测SCID小鼠的外周血、骨髓、肝脏、脾脏的白血病细胞。结果:K562细胞经静脉或腹腔途径均可植入SCID小鼠体内,形成白血病模型;3w时外周血即可见白血病细胞,肝、脾脏增生期细胞达40.11%、41.66%;发病晚期,模型动物骨髓细胞中CD13+细胞占10.15%;接种K562细胞后能检测到人DQα,ABL-BCR基因,接种K562细胞后3～4w即可见白血病细胞累及肝、脾、肾、骨髓等主要脏器。结论:SCID小鼠接种K562白血病细胞能成功建立白血病动物模型,CD13阳性率能快速、客观地判断模型中肿瘤细胞浸润程度。     

慢性阻塞性肺疾病相关性肺动脉高压的血流动力学和肺功能相关性研究

目的：观察 COPD 相关性肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)患者的血流动力学和肺功能的相关性。方法共入选右心导管确诊的 COPD 相关 PH 患者64例。根据平均肺动脉压和心指数分为2组：36例严重 COPD 相关 PH 和28例非严重 COPD 相关 PH。比较2组患者各项肺功能参数的差异,与血流动力学指标进行相关性分析。结果 COPD 相关 PH 患者的 FVC% pred[(55.03±22.2)%]、FEV1%pred 降低[(31.4±13.1)%];残气量%pred[(184.7±63.4)%]以及气道阻力%pred [(450.9±296.8)%]增高;并伴弥散量%pred[(58.5±31.1)%]降低。无论是肺容量通气指标、气道阻力指标还是弥散功能,严重 COPD 相关 PH 和非严重 PH 2组间差异均无统计学意义。严重 COPD 相关PH 低氧血症明显,PaO 2和 SaO 2较非严重 PH 组分别低10.6 mmHg 及6.3%(95% CI ,-16.1~-5.0;-9.1~-3.5;P <0.01)。COPD 相关 PH 的 PaO 2和 SaO 2和肺动脉平均压负相关。结论COPD 相关 PH 患者存在严重阻塞性通气功能障碍以及中度弥散功能障碍,血流动力学受损程度和两者无明显相关性。但严重 COPD 相关 PH 低氧血症更为显著,提示除了通气弥散功能外,肺血管因素有可能参与其中。     

当归多糖对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞的影响

目的 研究当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)的保护作用.方法 BALB/c小鼠按随机数字表法分为10组,每组24只,共计240只.正常组不作任何处理,其余9组经X射线照射后分别给予生理盐水(NS)、2 mg/kg APS和8 mg/kg APS,给药至第7、14、21天计数小鼠外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)及骨髓单个核细胞(BMNC);观察BMSC生长达80％贴壁所需时间及形成的成纤维细胞集落(CFU-F)数量;流式细胞术检测BMSC细胞周期、凋亡率及表面黏附分子CD54、CD106的表达水平.结果 与正常组比较,NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少(P＜0.05);BMSC达80％贴壁所需时间明显延长,CFU-F数明显减少(P ＜0.05);G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例显著降低(P ＜0.05);BMSC细胞凋亡率明显增高(P＜0.05);CD54、CD106表达明显降低(P＜0.05).2 mg/kg APS、8 mg/kg APS组与NS组相比,外周血各指标、BMNC数及CFU-F数明显增加(P＜0.05);BMSC达80％融合时间显著缩短(P＜0.05);G0/G1期比例明显降低,S期比例显著增加(P＜0.05);凋亡率显著降低(P＜0.05);CD54、CD106表达明显增高(P＜0.05).第21天8 mg/kg APS组各指标均恢复正常.结论 APS可能是通过提高BMSC贴壁及增殖能力,加速BMSC由G0/G1期向S期转换,降低BMSC凋亡率,上调CD54、CD106表达来促进辐射损伤后小鼠造血功能的恢复.     

当归多糖抑制氧化损伤延缓造血干细胞衰老

目的:观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSCs)活性氧(ROS)、总抗氧化能力(T-AOC)及p16 mRNA表达的影响,探讨ASP延缓HSCs衰老的可能机制.方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组、衰老组,并分别予ASP干预;衰老组采用X线3.0 Gy/8 F全身均匀照射,建立小鼠HSCs衰老模型;正常、衰老ASP干预组在建模期间均予ASP灌胃;而正常组、衰老组予等体积NS灌胃.免疫磁珠分离HSCs.通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、细胞周期分析和混合集落培养观察HSCs生物学特性变化;流式细胞术与免疫荧光检测ROS产量;比色法检测T-AOC;荧光定量PCR检测p16 mRNA表达.结果:与正常组比较,3.0 Gy/8 F的X线能显著增加衰老组HSCs SA-β-Gal染色阳性率和G1期比例;增加ROS产量,上调p16 mRNA表达;混合集落形成能力和T-AOC下降.与衰老组比较,ASP能显著降低衰老组HSCs的SA-β-Gal染色阳性率和G1期比例,减少ROS产量,下调p16 mRNA;增加混合集落形成能力和T-AOC.结论:3.0 Cy/8 F的X线能诱导小鼠HSCs衰老;ASP则能通过抑制氧化损伤及下调p16 mRNA表达延缓小鼠HSCs衰老.     

兔肋软骨膜和肋软骨来源的间充质干细胞的比较

目的 探讨从兔肋软骨膜和肋软骨中分别提取间充质干细胞的方法以及两者间的比较. 方法 取3～4周新西兰大白兔,共20只.酶消化及贴壁培养法分别获取软骨膜细胞和软骨细胞,体外培养观察其生长、形态、表型特征及其诱导成骨、成脂的分化潜能. 结果 从肋软骨膜中分离的原代细胞聚集成团,多为圆形和多边形;从第2代开始细胞以梭形为主,呈漩涡状排列,已传至第15代.从肋软骨中分离的原代细胞连接成片,以铺路石形态为主,第2代和第3代细胞逐渐转变成梭形;但第5代出现细胞老化,只传至第6代.免疫细胞化学染色发现,两种原代细胞均不表达CD29、CD90和CD34,从第2代开始均表达CD29、CD90,仍不表达CD34.原代软骨细胞表达Ⅱ型胶原,第2代细胞弱表达,第3代细胞开始不表达Ⅱ型胶原;而软骨膜细胞不表达Ⅱ型胶原.两种来源的第3代细胞经诱导均可分化为成骨细胞或者脂肪细胞. 结论 从兔肋软骨膜和软骨中均可获得干细胞.软骨细胞在体外可去分化成为干细胞.但软骨膜来源的干细胞的生长明显优于软骨来源的干细胞.     

真菌2572的抗白细胞介素6受体活性成分研究

目的从真菌2572的代谢产物中分离白细胞介素6受体(IL-6R)拮抗剂。方法利用多种色谱技术对活性部位进行分离纯化,并根据MS、NMR等光谱方法对化合物的结构进行了鉴定。结果从真菌2572代谢产物活性部位中得到两个化合物2572A和2572B。结论2572A已知为6-epi-5′-hydroxymycosporulone,有IL-6R拮抗活性,2572B为核黄素,活性较弱。