肝细胞癌变过程中核转录因子-κB表达的基础与临床研究

目的观察肝细胞癌（HCC）形成过程中核转录因子-kB（NF-kB）动态改变及临床价值。方法雄性SD大鼠以2-乙酰氨基芴（2-FAA）制备肝癌模型，经病理组织学分析肝细胞形态学变化，定量观察NF-kB动态变化。并以自身配对法收集经手术切除后的肝癌及其癌周组织，定量分析肝癌组织中NF-kB表达及病理学特征。结果诱癌后肝细胞发生颗粒样变性、不典型增生、到高分化肝细胞癌形成；在此过程中，NF-kB表达呈梯度增加。NF-kB阳性表达呈棕黄色颗粒状染色，癌组织NF-kB点灶状表达，定位于胞浆和细胞核；癌周组织NF-kB主要定位于胞浆，未见细胞核阳性。人肝癌组NF-kB明显高于癌周组织（P〈0．01），癌组织NF-kB表达阳性率为100％，癌周组织为68．6％（X^2=13．1，P〈0．01）。其表达与分化程度、肿瘤数目和肿瘤直径无关。结论NF-kB表达参与肝癌的发生、发展,活性抑制可能是肝癌基因治疗的新靶点。     

运动神经元190kD蛋白的免疫化学研究

运动神经元１９０ｋＤ蛋白的免疫化学研究（南通医学院神经科学研究所２２６００１张爱国张沛云严志强姚登兵顾晓松）近年来的研究表明，某些神经系统特异蛋白质可能与神经组织的某种功能相关，以其作为细胞的分子标志物的作用正在受到广泛利用。本研究取死后３ｈ内人脊神...     

嗅觉受体在背根节神经元和坐骨神经中的表达与鉴定

目的:探讨背根节神经元和坐骨神经中存在嗅觉受体基因的表达。方法:采用表达谱芯片检测坐骨神经离断后嗅觉受体在背根节神经元和近端坐骨神经中的表达变化,并用RT-PCR验证芯片结果。结果:背根节神经元和坐骨神经中存在嗅觉受体的表达,而且在坐骨神经离断后它们的表达发生显著改变。结论:首次报道了嗅觉受体在背根节神经元和坐骨神经中的表达,推测嗅觉受体可能在坐骨神经离断后与检测各种刺激信号相关。     

Schwann细胞表达β1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ对神经元轴突生长的影响

为了探讨周围神经Schwann细胞中不同β1,4半乳糖基转移酶-1(β-1,4-GalT-I)表达水平对神经元轴突生长的影响,本实验首先构建了正、反义β-1,4-GalT-I表达质粒,然后将构建的不同浓度的正、反义表达质粒超表达于分离、纯化的大鼠Schwann细胞,最后将转染的Schwann细胞与分离的大鼠背根神经节共培养;根据共培养神经元轴突延伸的数目和面积,分析Schwann细胞中不同β-1,4-GalT-I表达水平对神经元轴突生长的影响。结果发现:转染正义β-1,4-GalT-I的Schwann细胞能促进共培养神经节神经元轴突的长出和延伸。在一定的转染浓度内,这种促神经生长作用随转染浓度增大而增强,而转染反义β-1,4-GalT-I却有相反的作用。提示周围神经Schwann细胞中表达β-1,4-GalT-I可能在维持正常神经的功能和促进损伤神经的修复发挥重要作用。     

实验性铅中毒对睾丸神经生长因子基因表达的影响

目的 探讨实验性铅中毒对睾丸组织神经生长因子（ＮＧＦ）基因表达的影响。方法 小鼠以０．５％醋酸铅自由饮服８周,测定血铅和睾丸铅含量。采用原位杂交法（以地高辛标记ＮＦＧ ＤＮＡ为探针）和ＲＴ－ＰＣＲ方法,观察睾丸组织ＮＧＦ ｍＲＮＡ含量的变化。结果 铅染毒小鼠血铅和睾丸组织铅含量明显升高;原位杂交结果显示,铅染毒小鼠睾丸杂交信号明显减少,ＲＴ－ＰＣＲ结果表明,铅染毒小鼠睾丸组织ＮＧＦ ｍＲＮＡ表达量     

坐骨神经损伤早期背根神经节组织microRNA的表达变化

目的研究大鼠坐骨神经损伤以后短时间背根神经节组织中microRNA(miRNA)的表达变化。方法采用miRNA芯片检测神经损伤0 h(对照组)、3 h和9 h(实验组)背根神经节组织miRNA的表达情况,应用real time Taqman PCR对芯片结果进行验证。结果损伤3 h实验组与对照组比较发生上调和下调1.3倍以上的miRNA分别有4个和2个,损伤9h实验组与对照组比较发生上调和下调1.3倍以上的miRNA分别有7个和5个,real time Taqman PCR检测miR-188和miR-500的表达变化与芯片一致。结论大鼠坐骨神经损伤3h和9h后背根神经节组织中miRNA的表达谱发生改变。     

雪旺氏细胞表达β-1,4半乳糖基转移酶-I对神经元轴突生长的影响

为了探讨周围神经雪旺氏细胞中不同 β -1,4半乳糖基转移酶 -I(β -1,4-galactosyltransferaseI ,β -1,4-GalT -I)表达水平对神经元轴突生长的影响 ,本实验首先构建了正、反义 β -1,4-GalT -I表达质粒 ;然后将构建的不同浓度的正、反义表达质粒超表达于分离、纯化的大鼠雪旺氏细胞 ;最后将转染的雪旺氏细胞与分离的大鼠背根神经节共培养 ,根据共培养神经元轴突延伸的数目和面积 ,分析雪旺氏细胞中不同 β -1,4-GalT -I表达水平对神经元轴突生长的影响。结果发现 :转染正义 β -1,4-GalT -I的雪旺氏细胞能促进共培养神经节轴突的长出和延伸。在一定的转染浓度内 ,这种促神经生长作用随转染浓度增大而增强 ,而转染反义 β-1,4-GalT -I却有相反的作用。提示周围神经雪旺氏细胞中表达 β -1,4-GalT -I可能在维持正常神经的功能和促进损伤神经的修复发挥重要作用     

背根神经节组织中GAP-43基因克隆

目的：克隆新生大鼠背极神经节组织中生长相关蛋白－４３（ＧＡＰ－４３）基因。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ法,从新生大鼠背根神经节组织ｍＲＮＡ中扩增ＧＡＰ－４３基因ＣＤＳ区片段,克隆入Ｔ载体,并经序列测定。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出一特异产物与预期长度７７８ｂｐ相符,Ｔ载体克隆测序与ＧＡＰ－４３基因１００％同源。结论：采用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｔ载体技术获得了新生大鼠背根神经节组织中的ＧＡＰ－４３基因克隆。     

生后不同时期大鼠坐骨神经NGF基因的表达

采用 RT-PCR方法半定量分析生后 1、15、3 0、60、12 0和 3 60 d大鼠坐骨神经中 NGF m RNA表达的变化。结果表明 ,大鼠生后 1d坐骨神经中即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,NGF m RNA的表达量逐步增加 ,并呈严格单调上升的趋势。开始时增加速度较慢 ,但随鼠龄的增加而逐渐加快 ,至 49d时达到最快 ,然后逐渐减慢 ,到 12 0 d时已接近生后稳定表达水平。     

肝细胞癌变过程中核转录因子-кB表达的基础与临床研究

目的 观察肝细胞癌(HCC)形成过程中核转录因子-кB(NF-кB)动态改变及临床价值.方法 雄性SD大鼠以2-乙酰氨基芴(2-FAA)制备肝癌模型,经病理组织学分析肝细胞形态学变化,定量观察NF-кB动态变化.并以自身配对法收集经手术切除后的肝癌及其痛周组织,定量分析肝癌组织中NF-кB表达及病理学特征.结果 诱癌后肝细胞发生颗粒样变性、不典型增生、到高分化肝细胞癌形成;在此过程中,NF-кB表达呈梯度增加.NF-кB阳性表达呈棕黄色颗粒状染色,癌组织NF-кB点灶状表达,定位于胞浆和细胞核;癌周组织NF-кB主要定位于胞浆,未见细胞核阳性.人肝癌组NF-кB明显高于癌周组织(P<0.01),癌组织NF-кB表达阳性率为100%,癌周组织为68.6%(x2=13.1,P<0.01).其表达与分化程度、肿瘤数目和肿瘤直径无关.结论 NF-кB表达参与肝癌的发生、发展,活性抑制可能是肝癌基因治疗的新靶点.