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目的探讨芪归益肾方(黄芪、当归、川芎、怀牛膝)通过调控微小RNA-141(miR-141)的表达对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)小鼠肾脏纤维化的影响及其机制。方法采用UUO方法建立肾间质纤维化模型。30只雄性Balb/c小鼠随机分为以下5组,假手术组,模型组,洛汀新组(50 g/kg),芪归益肾方高(50 g/kg)、低(10 g/kg)剂量组。术后连续灌胃10 d后将小鼠处死,留取各组小鼠肾组织。肾组织标本用HE染色观察组织形态学改变,免疫组织化学法检测转化生长因子-β(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胶原蛋白IV(collagen IV,Col IV)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)表达,实时定量聚合酶链式反应(realtime quantitative polymerase chain reaction PCR,RT-PCR)法检测miR141、TGF-β1表达。结果 HE染色显示除假手术组外,其余各组存在不同程度的肾间质纤维化改变,而药物组病理损伤较模型组减轻(P0.05);免疫组织化学结果表明,芪归益肾方高、低剂量组和洛汀新组TGF-β1、Col IV表达明显低于模型组,而MMP-9表达则明显高于模型组(P0.05);RT-PCR结果表明,与模型组比较,芪归益肾方高、低剂量组和洛汀新组miR-141表达明显升高,而TGF-β1表达明显降低(P0.05)。结论在小鼠UUO模型中,芪归益肾方可能通过调控miR-141表达来影响TGF-β1和MMP-9表达,减少ECM成分的异常积聚,从而抑制肾脏纤维化进展。 相似文献
5.
目的: 探讨P53 抑制肺腺癌A549细胞干细胞特性及其机制。方法: 收集2014年3月至2015年12月解放军第85医院胸外科手术切除的30例非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma, NSCLC)患者癌组织及癌旁组织,采用Real-time PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中miR-145的表达。构建人P53 基因的真核表达载体(pcDNA3.1-P53)和突变载体\[pcDNA3.1-P53 R273H(CGT-CAT)\],设计靶向P53基因的siRNA,分别转染A549细胞;细胞分为对照转染组(Vector或NC-siRNA)和实验组(Flag-P53或P53-siRNA);Western blotting检测P53蛋白过表达和干扰效率,Real-time PCR检测OCT4和miR-145的表达,荧光双报告基因和Western blotting技术检测证实A549细胞中干细胞多能性调节基因(OCT4)为miR-145的靶标分子。结果: NSCLC组织中miR-145的表达水平明显低于癌旁组织\[(2.31±0.13) vs (3.51±0.27),P<0.01\];P53明显促进A549细胞中miR-145的表达\[(1.84±0.14) vs (1.00±0.00),P<0.01\];miR-145 mimics显著抑制A549细胞中pGL3-OCT4-3′-UTR活性(P<001)和OCT4蛋白表达水平(P<0.05),而转染miR-145抑制剂可进一步增加OCT4表达水平,且逆转P53对A549细胞的干细胞特性的抑制作用。结论:P53通过促进miR-145表达下调OCT4表达,进而明显抑制A549细胞的干细胞特性,该结果为肺腺癌的临床诊断和治疗提供了新途径。 相似文献
6.
失眠,是经常不能获得正常睡眠为特征的一类病证,中医称之为不寐,主要表现为睡眠时间、深度的不足,轻者入睡困难,或寐而不酣,时寐时醒,或醒后不能再寐,重则彻夜不寐,常影响人的正常工作、生活、学习和健康。临床治疗失眠的方 相似文献
7.
目的探讨多钢板联合微创经皮钢板内固定术(MIPPO)治疗"四柱损伤"Pilon骨折的疗效。方法自2013-01—2015-05运用多钢板联合MIPPO技术治疗28例"四柱损伤"Pilon骨折,骨折按Rüedi-Allgower分型均为Ⅲ型。结果术后26均获平均18.4(4~28)个月随访,失访2例。术后平均2.3(1.5~4)个月可见到明显的骨痂生长,部分负重,骨折愈合时间平均4.2(3~8)个月,内固定物无松动及断裂,骨折未见移位,可以弃拐行走。疗效按Mazur评分标准,优14例,良8例,可3例,差1例,优良率84.6%。结论采用多钢板联合MIPPO治疗"四柱损伤"Pilon骨折具有固定牢靠,可以早期进行功能锻炼,创伤小,愈合率高,软组织并发症少等优点。 相似文献
9.
目的探讨基因间长链非编码RNA 152(LINC00152)靶向调控微小RNA-103a-3p(miR-103a-3p)表达及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测正常肺上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞(ANIP-973、NCI-H157、A549和NCI-H1975)的LINC00152水平。选取LINC00152水平最高的细胞分别转染LINC00152特异性小干扰RNA(si-LINC00152组)或无关序列(si-NC组),另设未转染细胞为对照组。QPCR检测LINC00152水平,活细胞计数CCK-8法、Transwell小室和划痕实验测定细胞增殖、侵袭和迁移能力,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的水平;荧光素酶报告实验验证LINC00152靶向结合miR-103a-3p的能力。结果NSCLC细胞的LINC00152水平均高于BEAS-2B细胞(P<0.05),尤其是NCI-H1975细胞的最高。si-LINC00152组的LINC00152水平为0.352±0.087,低于对照组的1.058±0.219和si-NC组的1.126±0.139(P<0.05)。与si-NC组和对照组相比,si-LINC00152组NCI-H1975细胞转染48、72 h的增殖活力下降(P<0.05);si-LINC00152组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(27.386±2.428)%和(78.840±5.031)个,低于si-NC组的(77.675±4.803)%和(179.208±13.264)个及对照组的(76.371±5.385)%和(174.003±15.678)个(P<0.05);与si-NC组和对照组相比,si-LINC00152组的MMP-2和MMP-9水平均降低,而PTEN水平升高(P<0.05)。对照组和si-NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告分析证实,miR-103a-3p模拟物降低了野生型LINC00152的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。结论LINC00152在NSCLC细胞中高表达并发挥促癌作用,与NSCLC的迁移侵袭密切相关,LINC00152与miR-103a-3p间的相互作用在NSCLC靶向治疗中有一定潜能。 相似文献
10.
患者女,52岁。10年前右前臂出现一五分钱币大小的环状皮疹,持续2年后进行局部激素封闭治疗,皮疹迅速泛发全身。临床皮损结合组织病理,诊断为播散型环状肉芽肿。 相似文献