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用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切已构建的含单纯疱疹病毒I型胸苷激酶(HSV-1TK)基因的pUC18/TK质粒,将切出的TK基因片段克隆入原核表达载体pWR450-1中,构建成HSV-1TK基因重组表达质粒pWR450-1/TK。以HSV-1TK特异性引物TK1For和TK2Rev进行PCR鉴定可扩增出预期的503bp的TK基因编码区部分序列;EcoRⅠ和HindⅢ双酶切质粒pWR450-1/TK,可切出约1150bp的DNA片段,表明重组质粒中已插入HSV-1TK基因片段。用IPTG诱导pWR450-1/TK/JM109,表达出相对分子质量（Mr）约为97000的TK和β-半乳糖苷酶(Mr55000)融合蛋白。薄层扫描显示,该融合蛋白含量占菌体蛋白总量的27.47％。 相似文献
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