毛细管区带电泳测定尿17-羟皮质类固醇

目的 :应用高效毛细管区带电泳 (CZE)技术分离和检测人尿内 1 7-羟类皮质类固醇 (1 7-OHCS) ,以解决微色谱柱 -分光光度测定尿 1 7-OHCS时 ,多酚类化合物对测定的干扰。方法 :标本用活性高岭土吸附尿内色素 ,以茶碱作内标 ,中性苯乙烯 -二乙烯苯树脂微色谱柱吸附尿中 1 7-OHCS。乙醇解吸附 ,采用毛细管区带电泳进一步分离并测定。结果 :运用CZE法分离了人尿 1 7-OHCS ,皮质醇浓度在 2～ 5 0mg .L- 1 范围内具有良好的线性关系 (r=0 .994) ,方法平均回收率 96 .1 7% ,日内及日间CV均小于 5 % ,最低检测限度为 0 .3mg .L- 1 。结论 :与微色谱柱 -分光光度法相比 ,CZE法检测尿内 1 7-OHCS无干扰 ,方法简便、快速、可靠。     

HNE1细胞株光动力学治疗前后形态学的动态变化

目的 探讨体外光动力学治疗（ＰＤＴ）引起鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞死亡的作用机制。方法对鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１体外光动力学治疗前后形态学变化进行动态观察。结果 对照组ＨＮＥ１细胞培养３ｈ,６ｈ,１２ｈ,２４ｈ和４８ｈ后细胞形态与正常培养组ＨＮＥ１细包开始变形皱缩,细胞界限模糊,细胞透光度和立体感较差,治疗２４～４８ｈ后细胞发生凋亡。结论 体外光动力学治疗对ＨＮＥ１具有明显的杀伤效应并ＨＮＥ１细胞凋亡。ＰＤ     

LMP1通过Survivin抑制60Co诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的　研究EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)介导凋亡抑制蛋白 (Survivin)表达对辐射效应的影响。方法　利用LMP1可调控表达鼻咽癌细胞系 (Tet on LMP1HNE2 )诱导LMP1表达 ,同时 60 Co照射 5Gy ,采用形态学观察、流式细胞术和半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)活性检测等方法 ,分析LMP1表达对60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡的影响。用反义Survivin寡核苷酸阻断Survivin表达 ,观察Sur vivin表达阻断对60 Co辐射效应的影响。结果　LMP1表达抑制60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡 ,LMP1表达60 Co照射组形态学和流式细胞术检测凋亡率 (32 .7%± 2 .1% ,6 .3% )明显低于LMP1表达阴性组 (6 6 .0 %± 3.0 % ,2 9.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;转染Survivin反义寡核酸后细胞凋亡率 (5 9.3%± 3.2 % ,3.0 % )明显高于对照组 (2 6 .0 %± 2 .6 % ,8.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;同样转染Survivin反义寡核酸组Caspase 3活性 (3.78nmol/ 10 6)高于对照组 (2 .79nmol/ 10 6)。结论　提示LMP1通过介导Survivin表达而抑制60 Co照射诱导凋亡 ,Survivin反义核酸协同辐射诱导肿瘤细胞凋亡 ,Survivin作为增敏放射治疗靶 ,具有潜在的临床意义。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对人肺腺癌细胞毒作用及机理研究

粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)不仅具有造血刺激作用,而且还参与机体的免疫调节以及细胞毒作用.本研究应用人肺腺癌细胞株(A59)细胞体外培养,观察GM-CSF对其的作用,并对GM-CSF细胞毒作用机理进行了初步探讨,结果如下.1 材料与方法1.1 材料重组人GM-CSF系厦门特宝生物工程公司产品;噻唑蓝(MTT)SERVA分装;蛋白酶k系SIGMA公司产品;RNA酶系华美生物技术公司产品;A59细     

乙型肝炎及其相关病变中FoxB1检测和临床意义

目的研究FoxB1在乙型肝炎发生、发展中表达的临床意义。方法①收集临床确诊为乙型肝炎并排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒合并感染的乙肝住院病人血清278例,其中进展为肝硬化阶段者14例,肝癌阶段者12例,并随机抽取60名健康者血清,检测乙型肝炎病毒（HBV）DNA载量、FoxB1浓度和丙氨酸氨基转移酶活性;②分析乙型肝炎病人血清中FoxB1浓度与HBV—DNA载量谷丙转氨酶（ALT）活性的相关性,并依据乙型肝炎患者不同病情进展程度,分别比较肝癌组、肝硬化组、乙型肝炎组与健康组之间FoxB1因子浓度的差异。结果@278例肝炎病人血清中,HBV—DNA载量≥10^5拷贝／ml组FoxB1因子浓度为（12．5±6．9）pg／ml,HBV—DNA载量〈10^5拷贝／ml组为（12．7±9．3）pg／ml,健康人群组为（12．2±9．7）pg／ml,三组间FoxB1浓度无统计学意义（P〉0．05）。②278例ALT异常组血清中FoxB1浓度为（17．4±20．5）pg／ml,健康对照组血清中FoxB1浓度为（12．2±9．7）pg／ml,ALT异常组FoxB1浓度略高于健康对照组（P〈0．05）,血清FoxB1水平与ALT呈正相关（r=0．701）。③乙型肝炎组FoxB1浓度为（12．6±8．7）pg／ml,肝硬化组为（60．1±38．1）pg／ml、肝癌组为（68．5±37．3）pg／ml,肝癌组、肝硬化组中FoxB1浓度显著高于乙型肝炎组（P〈0．05）,而肝癌组与肝硬化组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论FoxB1水平与肝细胞损伤ALT释放有关,可能参与肝癌病变,对乙型肝炎演化为肝硬化、肝癌有一定的预示作用,可作为病情进展的风险因子,并且可能成为治疗乙型肝炎病毒所致肝硬化、肝癌的新靶标。’     

Cdk3在结肠癌变过程中的表达及其意义

目的:研究Cdk3在结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达,探讨Cdk3在结肠癌变过程中的演变规律及其意义.方法:用免疫组织化学和原位杂交的方法检测22例结肠癌组织、22例结肠腺瘤组织、24例结肠息肉组织中Cdk3蛋白和mRNA的表达.结果:Cdk3蛋白和mRNA在结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达呈核.质型,以质为主.图像分析结果显示,结肠癌组织中Cdk3蛋白表达平均光密度值(0.80±0.36)明显高于结肠腺瘤组织(0.48±0.22)和结肠息肉组织(0.25±0.13)(P<0.05),结肠腺瘤组织中Cdk3蛋白表达平均光密度值明显高于结肠息肉组织(P<0.05),结肠癌组织中的阳性细胞数(266.5±40.2)明显高于结肠腺瘤组织(132.0±37.4)和结肠息肉组织(129.3±26.7).结论:Cdk3在结肠癌变过程中表达逐步增强,在结肠癌组织中异常高表达,可能在结肠癌变过程中发挥重要作用.     

人类白细胞抗原——氨基酸残基配型在肾移植中的应用

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-氨基酸残基配型在肾移植中的临床应用价值.方法应用HLA氨基酸残基配型(ResM)标准及传统的六抗原配型标准(AgM).分析在尸肾移植中HLA--氨基酸残基配型对肾移植结果的影响.结果采用ResM标准可大幅度提高相配几率,0、1mm组受者由1.8%提高到42.9%;2mm组受者由1.8%提高到41.1%.结论新的ResM标准具有实用性与可行性,可大幅度提高移植供受者的相配几率,适合于肾移植的临床应用.     

维甲酸抑制鼻咽癌端粒酶和hTR表达及诱导凋亡的研究

目的:探讨维甲酸(RA)诱导鼻咽癌端粒酶及hTR表达下降和凋亡改变。方法:10-5mol/L维甲酸处理HNE1细胞后,采用TRAP PCR ELISA、逆转录巢式PCR、凋亡指数及透射电镜检测端粒酶、hTR表达及凋亡改变。结果:加入维甲酸6 d后,HN E1细胞形态不规则,细胞悬浮,细胞数减少,端粒酶及hTR表达受抑制,间接定量显示端粒酶活性(0.68±0.14)U只及对照组(1.16±0.46)U的1/2,凋亡指数及细胞明显高于对照组(P<0.05)。结论:维甲酸能明显抑制鼻咽癌细胞中端粒酶及hTR表达,并诱导该类肿瘤细胞增殖受阻及发生凋亡改变。     

食物变态反应性疾病原因筛查

目的分析过敏原特异性IgE、IgG在食物变态反应性疾病患者中的意义,为食物变态反应性疾病的防治提供依据。方法采用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法检测食物过敏疾病患者血清中总IgE、食物特异性IgE、IgG。IgE检测283例,IgG检测120例。结果食物特异性IgG阳性101例,阳性率84.2%。血清总IgE检测276例,阳性率97.5%;食物特异性IgE阳性90例,阳性率31.8%。特异性IgE检测中鱼过敏原特异性IgE的阳性率最高,为12.0%。特异性IgG检测中蛋清/蛋黄IgG阳性率最高,为55%,其次为蟹35%,牛奶29.2%,虾25%。IgG抗体检测儿童与成人对食物过敏种类上存在明显差异,儿童以蛋清/蛋黄、牛奶为主,成人以蟹、虾为主。结论鱼、甲壳类（蟹、虾）、蛋清/蛋黄、牛奶是食物变态反应性疾病的主要过敏原。血清总IgE、食物特异性IgE、IgG抗体检测是食物变态反应性疾病比较可靠的筛查方法。     

GM-CSF对肺癌细胞凋亡及肺泡巨噬细胞抗肿瘤功能的影响

了解ＧＭ－ＣＳＦ对肺癌细胞的杀伤作用以及对其调恨和对ＡＭ抗肿瘤功能的影响。方法：ＭＴＴ观察ＧＭ－ＣＳｆ对人肺腺癌细胞株细胞的杀伤作用以及对肺癌患者ＡＭ杀伤Ａ５４９细胞的影响。透射电镜,凝胶电泳及片段裂解率观察径ＧＭ－ＣＳＦ作用的Ａ５４９细胞凋亡情况。