Effects of chimeric molecule of recombinant Dsg3EC1-2 with toxin PE40 on T and B lymphocytes in Pemphigus Vulgaris

Objective:To observe the effects of the recombinant chimeric toxin Dsg3EC1-2PE40 on T and B lymphocytes isolated from Pemphigus Vulgaris (PV) patients to further study its biological therapeutic function for PV. Methods :Recombinant chimeric toxin Dsg3EC1-2PE40 was first identified, expressed and purified, and then its effects on T and B lymphocytes of PV patients in vitro were detected and quantified by ELISPOT assay and MTT assay. Results :The purity of the expressed protein Dsg3EC1-2PE40 was up to 80%. In ELISPOT assay, with Dsg3EC1-2PE40, the overall number of B cells that produce anti-Dsg3 antibodies among PV patients was only about 60% of the comparable number with Dsg3EC1-2. The proliferation of T cells of PV patients was inhibited markedly by Dsg3EC1-2PE40. There was significant difference between the different groups with Dsg3EC1-2PE40 and Dsg3EC1-2. Conclusion:The recombinant chimeric toxin Dsg3EC1-2PE40 decrease the number of B cells that produce anti-Dsg3 antibodies in PV patients and can inhibit or kill T cells of PV patients in vitro.     

61种中草药体外对淋病奈瑟菌的抑菌试验

６１种中草药体外对淋病奈瑟菌的抑菌试验唐书谦，叶庆佾第三军医大学第一附属医院皮肤科（邮政编码６３００３８）一、材料和方法１．供试药物：由本院门诊中药房提供。２．供试培养基：桂敏培养基，广西南宁皮研所研制。３．供试菌种：Ａ株为淋菌标准菌株（编号：ＧＣ７...     

Expression of stem cell factor in hair follicl epithelium

Thedermalepidernlalinteractioninthehairfollicleisahotspotincytobiologlcalstudies.anytoklnesplayimportantrolesinin(luctionofbiologicafactivitiesbetweentilegermalandepidermal].Stemcellfactor(St'F).whichwasfoundinrecentyears.isacyloklnerelatedicthestir\-tval.growl11anddevelopmentofthehemop()leticstemcellsandcanexertimportanlbiologicaleffectsonthedevelopmentofkeratlnocytesandnlelanocytes"/'.Inthisstudy.theexpressionofSCFInhumanhairfollicleepitheliumwasin\'estigateclwithimmunohistochemistryandI)…     

新型隐球菌动物接种实验观察

临床为了观察分离出的隐球菌的毒力,以鉴别是否为新型隐球菌(以下简称新隐),或制备动物感染模型以供教学或药物研究,均需进行动物接种,但对接种的某些问题尚无一致意见。现将本科真菌室对小白鼠不同途径接种的实验结果报道如下。 1 材料与方法 将从患者分离鉴定后的新隐,转种于沙博氏琼脂37℃孵育3天,用生理盐水制备成每ml约50万个孢子的悬液。实验动物为本校动物室自繁杂种小白鼠,按接种途径分颅内、尾静脉和腹腔3组,各10只。     

皮肤组织工程的基础研究:三磷酸腺苷酶染色法定性及定量观察猪表皮朗格汉斯细胞

目的:观察三磷酸腺苷ATP)酶染色的猪表皮朗格汉斯细胞密度和形(态。方法:用改良的JuhlinATP酶染色法,对小型香猪表皮进行染色,显示朗格汉斯细胞。结果:猪表皮朗格汉斯细胞为棕黑色树突状,测得猪腹部表皮的朗格汉斯细胞平均密度为750个/mm。2结论:ATP酶染色法可以对猪表皮朗格汉斯细胞进行染色,并可以定量、定性观察猪表皮朗格汉斯细胞。     

外周血嗜碱粒细胞磁珠分选法分选及意义

目的 探讨磁珠分选法(MACS)负性筛选方法获得高纯度嗜碱粒细胞用于速发型过敏反应的研究.方法 以Ficoll密度梯度离心分离细胞.用活性抗体标记的免疫磁珠进行MACS分选,用激光共聚焦方法鉴定嗜碱粒细胞活性.结果 Ficoll密度离心后,获得嗜碱粒细胞的纯度为(12.6±3.87)%,MACS纯化后,其纯度可提高到(95.6±3.96)%,细胞活性为(98.6%±0.83)%.激光共聚焦证实,纯化后的嗜碱粒细胞活化后CD63表达增强,细胞功能完整.结论 用MACS负性筛选方法可获得高纯度的嗜碱粒细胞,细胞功能完整,可用于速发型过敏反应的研究.     

细胞培养中污染支原体的检查

目的 探讨细胞培养中简便可靠的支原体污染的检查法.方法 收集本室现有不同批次的种子细胞和试剂等,根据检查方法 不同分类.①DNA荧光染色检查法:包括成纤维细胞(I:ibroblast,Fb)、角朊细胞(Keratinocyte,KC)小牛血清、Vero细胞-1、A549细胞、Vero细胞-2、DMEM完全培养基、DMEM尤抗菌素培养基、1640培养基、胎牛血清、鼠尾胶原、牛尾胶原、壳多糖、硫酸软骨素透明脂酸酶、磷酸盐缓冲液、D-Hanks液等待检标本16种.②培养检查法:包括Fb、KC和小牛血清3种主要标本,采用"精氨酸支原体肉汤培养基"、"支原体半流体培养基"培养法.结果 DNA荧光染色法检查16种标本,阳性率为18.75%(3/16).培养法检查:Fb、KC和小牛血清3种主要标本中,阳性率为33.3%(1/3).结论 细胞培养中支原体检查方法 ,DNA荧光染色法较之培养法具有简单、方便,相对需时较短等优点,结果 稳定、可靠.     

重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40对寻常型天疱疮患者T、B淋巴细胞的影响

目的探讨重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40对寻常型天疱疮患者外周血淋巴细胞的影响。方法对重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40进行表达,并分离纯化；分别以不同浓度重组嵌合毒素作用于寻常型天疱疮患者外周血淋巴细胞,通过ELISPOT法、MTT比色试验及~3H-TdR掺入试验来观察重组嵌合毒素对T、B淋巴细胞的影响。结果纯化后的重组嵌合毒素纯度达80％以上,它能够特异性与天疱疮抗体IgG结合,而与正常人IgG不结合。重组嵌合毒素可使寻常型天疱疮外周血产生抗体的B细胞数量减少约40％左右；在重组嵌合毒素作用下,T细胞的增殖、代谢较重组Dsg3EC_(1-2)明显降低,两者间差异有统计学意义(P<0．01)。结论重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40可以抑制寻常型天疱疮外周血B细胞的抗体产生作用,对寻常型天疱疮外周血T细胞具有明显的抑制或杀伤作用。     

毛乳头细胞凝集性生长与细胞外基质分泌关系的组织化学研究

目的：研究毛乳头细胞的凝集性生长方式与其产生的细胞外基质之间的关系。方法：用人头皮分离的低传代毛乳头细胞与毛发上皮细胞共同培养形成的毛乳头细胞凝集性生长区及非凝集生长区的毛乳头细胞进行阿新蓝、过碘酸雪夫氏染色，观察染色反应的强弱。结果：新分离的毛乳头，阿新蓝和过碘酸雪夫氏染色均呈强阳性，培养的毛乳头细胞凝集性生长区阿新蓝－过碘酸雪夫氏染色亦显示强阳性，而非凝集区的毛乳头细胞显色呈弱阳性。结论：培养的毛乳头细胞凝集性生长后，合成分泌细胞外基质的功能较非凝集生长的毛乳头细胞明显增强。