沙门氏菌属特异性单克隆抗体的制备及初步应用

本文报道提取鼠伤寒和乙型副伤寒沙门氏菌鞭毛聚合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾脏和Sp 2/0骨髓瘤细胞融合,从中筛选出八株分泌抗沙门氏菌属单克隆抗体杂交瘤。其中的3A_3-1杂交瘤细胞株分泌的抗体同国内79个血清型共18l株常见沙门氏菌株进行酶联反应,检出175株,复盖率达96.7％。其中A～F群共110株沙门氏菌,检出108株,复盖率达98.2％。     

试管固相抗体红细胞吸附技术的建立

本文初步建立了试管固相抗体红细胞吸附技术,对实验条件的选择、标本的处理方式等因素进行了探讨.本法具有特异吸附和显著去杂质的特点,对标本适应范围广,结果比常规法清晰,易于判定.本方法检测纯毒素时,具有与反相间接血凝法(RPHA)同样的敏感性,接近或达到了文献报道的最高检出敏感度.模拟标本实验证实其检出的特异性、敏感性均优于RPHA法.     

玻片固相抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF)对菌痢快速诊断效果的评价

玻片固相抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF),用于现场实际便标本的快速检验,解决了免疫荧光技术在细菌学快速诊断实际应用中的一些具体问题,有助于本技术在基层检验室的推广普及。本文比较SPAIF和普通免疫荧光技术(CIF)在菌痢快诊上现场应用的效果,并进行了评价。     

玻片固相抗体吸附免疫荧光技术的实验研究——Ⅳ.玻片固相抗体与菌细胞反应的动力学

在液相中抗原抗体反应一般遵守质量作用定律,即游离抗原和抗体与抗原——抗体复合物之间保持动态的可逆性平衡,不同抗原抗体系统有不同的平衡常数K。但是,当抗体为固相时,则抗原抗体反应不严格遵守质量作用定律,缔合速率大大超过解离速率。我们建立的玻片固相抗菌抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF),则不仅抗体是固相的(不动固相),分布于菌细胞上的抗原也是固相的(但为可动固相),这就形成了动与不动的双固相的抗原抗体反应系统,这种反应系统及其动力学特点,尚未见文献报道,本文试图作一初步探讨。     

沙门氏菌单克隆抗体的制备和在快速检出中的应用——Ⅱ.用单克隆抗体ElA法检验食品中的沙门氏菌

本文报道了便用沙门氏菌属持异性单克隆抗体EIA法快速检验沙门氏菌的实验结果。EIA法程序简便、快速。从标本培养开始到全部试验完毕不超过36小时。每10ml标本含1个窗经培养18小时后即可检出;标本中大肠菌浓度即便超过沙门氏菌1000倍仍不影响检出;人工污染食品标本的实验结果证明,少量残留食物不影响结果;所试验的11类食品样品绝大部分适于EIA法检验。     

菌痢粪便标本分离方法的比较观察

本文对166例疑诊“菌痢”病人大便标本以SS和HE平板进行了直接划线分离和GN增菌培养后间接划线分离,结果表明,直接分离的阳性率高于间接分离的阳性率(39.8%:25.9%)。在直接分离中,SS的效果优于HE(37.3%:28.9%)。就不同的菌群来看,GN增菌对志贺氏、福氏和鲍氏都只能降低分离的阳性率,但对宋氏菌却能提高阳性率,尤其是GN→HE组合更为明显。由于直接分离和间接分离的总阳性率仍然高于直接分离,故在有条件的地方,同时作两种分离仍有益处,尤其是宋氏占优势时更应如此。如条件只允许作一种分离,则应采用直接分离,尤其是SS直接分离。     

沙门氏菌单克隆抗体的制备和在快速检出中的应用——Ⅰ.杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体的鉴定

通过细胞融合技术筛选出了八株分泌抗沙门氏菌属的单克隆抗体细胞系,其中的3A_3—1细胞系所分泌的抗体能与所试验的79个血清型181株沙门氏菌中的175株起反应,复盖率达96.7％,其中A～F群的各型沙门氏菌共110株,检出108株,复盖率达98.2％,而与其它肠道菌呈阴性或仅有个别微弱交叉反应,从而为沙门氏菌的检验提供了一种优良的广谱特异试剂。     

玻片固相抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF)对菌痢快速诊断效果的评价

免疫荧光技术用于菌痢病人粪便标本的快速检验,对于宋氏菌(Shigella sonnei)感染,效果良好,其他则有待进一步评价。玻片固相抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF)的建立,解决了免疫荧光技术在细菌学快速诊断实际应用中的一些具体问题,有助于本技术在基层检验室的推广普及。本文比较SPAIF和普通免疫荧光技术(CIF)在菌痢快诊上现场应用的效果,并进行了评价。材料和方法一、标本 1.流行季节末期(10—11月份)在江苏省如东县卫生防疫站收集送检的疑诊“痢疾”粪便标本151份和“腹泻”标本66份。 2.流行高峰期(8月份)在302医院门诊化验室收集疑诊“菌痢”的大便标本100份。     

玻片固相抗体吸附免疫荧光技术的实验研究 Ⅲ.空间位障作用的探讨

文献1、2证明,玻片固相抗菌抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF)具有很高的特异性和稳定性,为了深入阐明有关的理论问题,我们观察了空间位障现象在SPAIF中的作用。首先,我们探讨羊抗兔免疫球蛋白对玻片固相抗体的抑制或封闭机理,即对羊抗兔Ig来说,固相抗体是抗原,它们的兔抗体的结合是抗原决定基与羊抗兔抗体IgG的N端两个结合点的结合,固相抗体本身作为抗菌抗体     

玻片固相抗体吸附免疫荧光技术的实验研究——Ⅴ.玻面固相抗体吸附菌细胞回收培养方法的建立

本实验室建立的玻片固相抗菌抗体吸附免疫荧光技术(SPAIF)在食品沙门氏菌的快速检出中已被证明有良好的实用性能。如能在SPAIF快速诊断的同时,进行分离培养,取得纯菌种,则弥补了快速检验方法之不足。由于固相抗体技术有特异的选择性,如能从污染严重的外界标本、临床标本或增菌培养标本,经过固相抗体选择吸附,先将杂菌和杂质基本去除,有可能不用选择培养基或只用弱选择性培养基,在平板上得到比较纯的易于挑选的菌落,使分离敏感性有所提高。同时,可将SPAIF法与培养直接结合起来,建立一套新的筛选——分离程序。本文报告从玻面上将固相抗体吸附的菌细胞回收培养得到菌种的方法。