DNMT3B对人脐带间质干细胞成骨分化能力的影响

目的 研究DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)调控人脐带间质干细胞骨生成的作用.方法 利用RNA干扰法获得两株DNMT3B基因低表达的人脐带间质干细胞(Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells,hUMSCs).在使用qPCR和免疫组织化学法确定DNMT3B表达缺失后,对hUMSCs进行骨生成定向诱导分化.并利用免疫组织化学法和茜素红染色评价突变型和野生型hUMSCs成骨能力差异.结果 由RNA干扰获得的两株突变型hUMSCs中两株突变型中DNMTI3B表达量分别下降至野生型hUMSCs的12.67 ±0.45％和35.60 ±0.76％(P ＜0.05).而在DNMT3B突变型hUMSCs中间质干细胞标记物CD73和CD90基因mRNA的表达水平也分别下降(P＜0.05).CD73水平分别是野生型细胞的15.83 ±0.44％和16.60±0.37％(P ＜0.05);CD90的水平分别是野生型细胞的35.23 ±0.30％和58.64±0.71％(P ＜0.05).在骨生成过程中,免疫组化染色后镜下比较显示DNMT3B突变型的细胞表达Osteocalcin较正常细胞低,qPCR结果表明RUNX2,IBSP和ALPL基因的mRNA表达量水平较正常细胞均明显下降(P＜0.01),其中shD3B-1和shD3B-2的RUNX2基因表达水平分别为正常细胞的55.09±0.53％和53.77 ±0.47％(P＜0.01);IBSP基因表达水平分别为正常细胞的53.21 ±0.81％和41.75±0.44％(P＜0.01);ALPL基因表达水平分别为正常细胞的15.55±0.10％和17.86±24％(P＜0.01).同时茜素红染色检测也显示其成骨后细胞成骨功能减弱.结论 DNMT3B突变或缺失会导致hUMSCs骨生成能力下降.     

脊髓损伤于细胞治疗研究进展

脊髓损伤(SCI)患者最终能完全恢复其神经功能的不足1%,而且大多数留下严重的后遗症.近年来对于脊髓损伤的病理生理的研究发现,继发性损伤导致病灶周围出现炎症浸润、进展性缺血坏死和脱髓鞘现象对于神经元再生及功能恢复起着极为不利的影响,如何促进损伤神经元修复及再生,恢复机体神经功能成为SCI治疗关注的焦点.     

联合数字标记示踪法和质心运算法对人体骨盆力学稳定性的分析

目的分析人体骨盆力学稳定性,为骨盆外科手术提供生物力学数据。方法选取6具尸体标本,保留第三腰椎至股骨中上1/3段,并固定于特制工作台上。尸体标本无结构不稳,剥离部分软组织后保留髋臼、骨盆环周围韧带。使用白色背景下的黑色标记点来显示骨盆运动学关键点。通过材料试验机对第三腰椎上缘加载0N～500N的轴向载荷。使用2个电荷耦合器件(Charge Coupled Device,CCD)图像传感器分别从前方及侧方两个视角进行拍摄。基于ImageJ软件测算标记物的位移,综合分析数据得出L5相对下沉位移、骨盆冠状位外展度以及矢状位旋转度。结果在500N的垂直轴向载荷下,L5相对下沉位移为1.157±0.794mm,骨盆冠状面外展度为0.370±0.260°和矢量面旋转度1.051±1.728°。结论联合数字标记示踪技术和质心运算法对骨盆标本进行位移测算,分析得出人体骨盆在生理垂直载荷下表现出良好的力学稳定性。     

1例巨大胰腺假性囊肿诊治体会

1 病例资料 张女士,53岁,因"中上腹部束带样胀痛一天"拟诊为"急性胰腺炎"2012年11月底,入我院普外科就诊,各项指标及参数均提示患者为"急性重症胰腺炎"[1-3].在对其进行积极抢救性治疗后,患者腹痛症状逐渐减轻,但是血、尿淀粉酶、血脂肪酶指标持续居高不下,均>1200 U/L.将奥曲肽0.1 mg 每隔6小时 皮下注射一次改为施他宁3 000 μg持续静脉泵推注一天二次,血淀粉酶降至120-140 U/L、尿淀粉酶600～800 U/L;逐渐接近正常.复查上腹部CT后发现在胰腺体尾部出现了假性囊肿,并且随着治疗的进展,有进行性增大趋势,胰腺大量分泌和胰腺周围脂肪间隙模糊及炎性包裹等影像.     

脊髓损伤的药物试验研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是人类致残率最高的疾患之一,脊髓损伤通常导致严重的神经功能障碍和残疾.机体的运动、感觉功能常常发生障碍,伴随患者的往往是长期的药物治疗和运动功能恢复训练.大多数脊髓损伤患者难以恢复正常功能,不仅影响个人生理和心理,同时也对家庭和社会造成严重负担.     

联合数字标记示踪法和质心运算法对人体骨盆力学稳定性的分析

目的 分析人体骨盆力学稳定性,为骨盆外科手术提供生物力学数据.方法 选取6具尸体标本,保留第三腰椎至股骨中上1/3段,并固定于特制工作台上.尸体标本无结构不稳,剥离部分软组织后保留髋臼、骨盆环周围韧带.使用白色背景下的黑色标记点来显示骨盆运动学关键点.通过材料试验机对第三腰椎上缘加载0N～500 N的轴向载荷.使用2个电荷耦合器件(Charge Coupled Device,CCD)图像传感器分别从前方及侧方两个视角进行拍摄.基于Image J软件测算标记物的位移,综合分析数据得出L5相对下沉位移、骨盆冠状位外展度以及矢状位旋转度.结果 在500N的垂直轴向载荷下,L5相对下沉位移为1.157±0.794 mm,骨盆冠状面外展度为0.370±0.260°和矢量面旋转度1.051±1.728°.结论 联合数字标记示踪技术和质心运算法对骨盆标本进行位移测算,分析得出人体骨盆在生理垂直载荷下表现出良好的力学稳定性.     

microRNA与肿瘤研究进展

miRNA是一类高度保守的，内源性非编码小RNA，影响着基因的表达调控，随着基因组研究的发展，越来越多的miRNA被发现，其功能和作用机制也取得了很大的进展。大量的研究表明，miRNA在疾病发生中起着及其重要的作用，尤其是在肿瘤的发展过程中，miRNA也扮演着不可替代的角色。本文从分子水平上对microrRNA在各种肿瘤发生发展过程中的影响进行综述。     

DNMT3B对人脐带间质干细胞成骨分化能力的影响

目的研究DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)调控人脐带间质干细胞骨生成的作用。方法利用RNA干扰法获得两株DNMT3B基因低表达的人脐带间质干细胞(Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells,hUMSCs)。在使用qPCR和免疫组织化学法确定DNMT3B表达缺失后,对hUMSCs进行骨生成定向诱导分化。并利用免疫组织化学法和茜素红染色评价突变型和野生型hUMSCs成骨能力差异。结果由RNA干扰获得的两株突变型hUMSCs中两株突变型中DNMT3B表达量分别下降至野生型hUMSCs的12.67±0.45%和35.60±0.76%(P<0.05)。而在DNMT3B突变型hUMSCs中间质干细胞标记物CD73和CD90基因mRNA的表达水平也分别下降(P<0.05)。CD73水平分别是野生型细胞的15.83±0.44%和16.60±0.37%(P<0.05);CD90的水平分别是野生型细胞的35.23±0.30%和58.64±0.71%(P<0.05)。在骨生成过程中,免疫组化染色后镜下比较显示DNMT3B突变型的细胞表达Osteocalcin较正常细胞低,qPCR结果表明RUNX2,IBSP和ALPL基因的mRNA表达量水平较正常细胞均明显下降(P<0.01),其中shD3B-1和shD3B-2的RUNX2基因表达水平分别为正常细胞的55.09±0.53%和53.77±0.47%(P<0.01);IBSP基因表达水平分别为正常细胞的53.21±0.81%和41.75±0.44%(P<0.01);ALPL基因表达水平分别为正常细胞的15.55±0.10%和17.86±24%(P<0.01)。同时茜素红染色检测也显示其成骨后细胞成骨功能减弱。结论 DNMT3B突变或缺失会导致hUMSCs骨生成能力下降。