新嗜酸染色法

我们对瑞氏染色或伊红-美兰快速染色法作了一点小的改进,染色效果更好,特别是嗜酸细胞更易辨认,现介绍如下: 用瑞氏染色或快速染色先将血片染好,然后用 200mg/L萘酚绿复染10-20秒,清水冲洗即可。 染色后,嗜中性粒细胞,淋巴细胞,单核等均比瑞氏染色和伊红一美兰快速染色法更清晰,尤其酸性粒细胞经萘酚绿复染后呈鲜明的桔红色,酸性颗粒,胞浆,胞核清楚,很容易辨认,血液骨髓片经过瑞氏染后再用萘酚绿复染也取得了更好效果。     

介绍一种革兰氏细菌的快速鉴别法

在微生物鉴定的日常工作中,发现革兰氏染色法存在着某些缺点,如涂片厚薄不均,可造成所有的细菌和革兰氏染色未必完全一致,出现革兰氏阴性菌变成革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌变成阴性菌,等现象,为了克服此缺点,我们采用了     

三尖杉酯碱类的高速液相色谱法分离与测定

本文报道以Lichrosorb SI-60及Nucleosil C-18为固定相,用正相和反相高速液相色谱法分离三尖杉总生物碱、混合酯碱、及半合成三尖杉酯碱差向异构化合物,并用于混合酯碱、半合成三尖杉酯碱差向异构化合物的含量测定,比较了各种参数变化对色谱过程的影响,以拟定的方法对各种酯碱提取物、制剂及半合成产品作了定量分析。本法的灵敏度为1×10^-6g,平均偏差1.9%。     

Sirt1增强人慢性粒系白血病K562细胞耐药性

 目的 研究Ⅲ类去乙酰化酶Sirt1对人慢性粒系白血病K562细胞耐药性的影响及其机制。方法 分别将酶活性缺失突变型Sirt1（H363Y）和Sirt1 shRNA的表达质粒转染K562细胞后,用G418筛选出稳定表达酶活性缺失突变型Sirt1或 Sirt1 shRNA的K562细胞。用H2O2和 etoposide处理筛选出来的稳定细胞株,Western Blot检测凋亡标志物caspase3的剪切及Bax的表达,同时检测DNA损伤的标志物H2A.X磷酸化;在MCF-7和293A中过表达野生型Sirt1,检测H2O2和 etoposide处理后H2A.X的磷酸化。结果 在K562细胞中,酶活性缺失突变型Sirt1（H363Y）的表达和Sirt1的干扰均能促进H2O2和 etoposide诱导的caspase3的剪切及Bax的表达并同时显著抑制H2O2和 etoposide诱导的H2A.X磷酸化;在MCF-7和293A细胞中,野生型Sirt1的过表达能明显增强H2O2和 etoposide诱导的H2A.X的磷酸化。结论 Sirt1能保护K562细胞对抗DNA损伤药物诱导的凋亡,增强DNA损伤修复的信号。     

直肠癌肺淋巴管转移一例

正肺外癌性淋巴管炎为呼吸科少见病例,其临床表现可有咳嗽、咳痰、气短、喘息,体征可伴有双肺呼吸音降低、弥散干啰音。典型的CT表现为:(1)小叶间隔不均匀增厚;(2)支气管血管束增粗;(3)胸膜增厚/病变多见;(4)肺外癌性淋巴管炎多不伴有肺门淋巴结肿大。由于该病通常易被误诊为肺间质感染、心源性肺水肿、淋巴管结核等[1],因此现将我院收治的1例肺外癌性淋巴管炎患者治疗情况报道如下,以加强呼吸科同仁对该病的认识。     

IFN-γ促进红系终末分化

目的探索IFN-γ对体外红系终末分化的调节作用。方法用real-time PCR法检测IFN-γR1/R2在血红素(hemin)诱导K562细胞红系分化过程中的表达变化。以IFN-γ处理hemin诱导的K562细胞和人脐血CD34+细胞来源的红系细胞,用real-time PCR检测红系分化标志物CD235a和CD71表达。用联苯胺染色展现IFN-γ处理的K562细胞中血红蛋白含量,通过Western blot和real-time PCR检测红系相关转录因子GATA1和NFE2的表达。结果 Hemin诱导下分化的K562细胞中IFN-γR1/R2 mRNA先减少后增高,IFN-γ促进K562及造血干祖细胞红系分化晚期CD71及CD235a的表达,增加联苯胺阳性染色率。IFN-γ对红系分化的促进作用具有时间依赖性。机制研究表明IFN-γ可促进红系关键转录因子NFE2的表达。结论 IFN-γ促进K562细胞及人脐血造血干祖细胞的红系终末分化。     

转录因子Ikzf1促进小鼠胎肝来源红系细胞终末分化

目的 通过分析单细胞转录组数据,挖掘红系终末分化过程中潜在的转录因子Ikzf1,并探究其在终末红系分化中的功能。方法 利用SCENIC方法对人和小鼠红系细胞的单细胞转录组数据进行转录因子预测,从bulk转录组数据获取所预测因子Ikzf1在红系终末分化过程中的表达情况并在小鼠胎肝红系分化体系中进行RT-qPCR验证。在小鼠胎肝来源的红系细胞中利用短发夹RNA (shRNA)干扰技术敲低Ikzf1,流式分选GFP阳性的成功转染细胞,RT-qPCR验证其敲低效率,流式细胞术分析Ikzf1敲低后对红系分化和脱核的影响。结果 SCENIC预测Ikzf1是人与小鼠红系终末分化共同的转录因子,转录组及RT-qPCR分析显示其在终末分化较早期的原红和早幼红细胞阶段表达量较高。将小鼠胎肝来源红系细胞中Ikzf1基因的表达成功敲低,流式细胞术检测发现Ikzf1敲低导致红细胞分化阻滞在早幼红细胞时期,细胞脱核率显著降低(P<0.05)。结论 转录因子Ikzf1在红系终末分化早期高表达并参与促进红系终末分化和脱核。