单抗亲和层析生产高比活HCG方法的建立

本实验以健康孕妇尿为原料，利用苯甲酸沉淀，有机溶剂沉积，离子交换层析和凝胶过滤等方法得到ＨＣＧ纯品（１４０００ＩＵ／ｍｇ）。用该产品免疫小鼠。将产生的免疫鼠脾脏与ＮＳ－１骨髓瘤细胞用半固相法要交细胞融合，筛选纯化出ＨＣＧ单抗克隆抗体（Ｋａ＝７．５×１０＾８ｍ＾－＾１）。将ＨＣＧ单抗与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制成免疫吸附亲和层析柱，可将ＨＣＧ粗品（２０００ＩＵ／ｍｇ）一次纯化得到ＨＣＧ纯品（１５０     

消炎痛脂质体对兔角膜穿孔伤的疗效观察

以兔眼前房水蛋白含量的变化为药效指标，对消炎痛脂质体和混悬水剂进行了抑制角膜穿孔伤炎性反应的疗效观察。结果表明两种剂型均能使伤后房水蛋白明显降低，且消炎痛脂质体较混悬水剂具有更好的疗效。     

RNA干扰中小干扰RNA的设计原则

RNA干扰(RNAi)是由内源性或外源性双链RNA介导的一种高度保守的序列特异性基因表达调控机制,主要通过小干扰RNA(siRNA)和微小RNA发挥作用。由于其具有高效、高特异性、作用稳定等特点,已被广泛地应用于基础实验和疾病治疗的研究中。在进行siRNA介导的RNAi实验时,如何设计高效、特异性抑制靶mRNA的siRNA是实验成败的关键。     

1325例海洛因依赖者HIV检测分析

目的：调查海洛因依赖者HIV的易感行为,为控制和减少HIV在海洛因依赖者中的流行提供资料。方法：对1999年我院收治的1325例自愿戒毒的海洛因依赖者HIV感染情况进行调查分析。结果：发现12例（0．91％）HIV感染的海洛因依赖者,其中男性11例（11／1134）,女性1例（1／191）,全部为静脉注射吸毒者,静脉注射者中均有共用和注射器具史。75．0％的HIV感染者同时具有性混乱史。结论：静脉注射吸毒和性混乱是海洛因依赖者HIV感染的主要因素。     

海洛因滥用者中22例HIV感染分析

目的··:了解海洛因滥用者HIV感染行为 ,评估海洛因滥用者人群HIV感染的趋势。方法·· :对我院1997年至1999年收治的3015例海洛因依赖者感染HIV的情况进行调查分析。结果··:发现22例 (占0.73 % )海洛因依赖者HIV抗体阳性 ,其中男性19例 (19/2613 ,占0.73 % ) ,女性3例 (3/402 ,占0.75 % );86.36 %(19/22)为静脉注射毒品者 ,静脉注射者中大部分 (89.47 % )有共用注射器具史。72.73 % (16/22)的HIV感染者同时具有性混乱史。结论··:海洛因滥用者是HIV感染的高危人群 ,海洛因滥用者的感染行为主要包括共用注射器具和性混乱行为     

牛血清白蛋白的化学修饰及免疫反应活性的测定

用活化的聚乙二醇（２－０－甲氧聚乙二醇－４．６－二氯１．３．５－三嗪三氮杂萘）修饰牛血清白蛋白，白蛋白与不同含量的聚乙二醇偶联后，其抗原性随修饰度的增加而减少，当牛血清白蛋白６０个氨基中的２８个被修饰后，失去与抗牛血清白蛋白抗血清的免疫反应活性。     

shRNA表达载体对HSV-2 ICP4基因的干扰效应

目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71%,使蛋白表达减少71.81%,并且病毒滴度也明显降低(P<0.05)。结论构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上干扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制。     

靶向UL5小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒的抑制

背景：解旋酶-引发酶复合体是Ⅱ型单纯疱疹病毒进行复制的必需基因,UL5基因为Ⅱ型单纯疱疹病毒解旋酶-引发酶复合体的组成单位之一。 目的：应用RNA干扰技术分析特异性小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因的干扰作用。 方法：以Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因为靶目标,设计、合成5对特异性小干扰RNA。通过LipofeCtamine 2000脂质体将特异性小干扰RNA转染HEK293细胞。48 h后行荧光定量RT-PCR检测UL5基因转录水平,终点滴定法测定干扰后病毒滴度,观察其干扰效果。 结果与结论：小干扰RNA成功转染入细胞内。荧光定量RT-PCR结果显示,siRNA 722、siRNA 2 394、siRNA 2 513和siRNA 2 627均可不同程度降低靶mRNA表达,病毒滴度检测结果显示siRNA 722、siRNA 2 394、siRNA 2 513和siRNA 2 627均可不同程度降低上清液中病毒感染滴度,阴性对照组和siRNA 374对病毒感染滴度无影响。针对UL5基因的有效小干扰RNA可以特异性降低Ⅱ型单纯疱疹病毒的复制水平。