幽门螺杆菌感染与胃上皮细胞间隙连接功能的体外研究

目的　探讨幽门螺杆菌(H.pylon,Hp)对胃上皮细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响及其发病机制。方法　应用Hp(包括Cag A 和Cag A-株)全菌和超声粉碎上清分别作用胃上皮细胞株SGC- 790 1。采用激光扫描共焦显微镜(L SCM,L eica TCS SP)以荧光光漂白后再恢复(FRAP)技术测定SGC- 790 1细胞GJIC功能(以荧光传递速率K表示,×10 - 3/ s)。结果　Cag A 和Cag A- Hp株均下调SGC- 790 1细胞GJIC功能(Cag A :F=5 7.98;Ca-g A- :F=2 9.5 9,P<0 .0 1) ;且Cag A 与Cag A- Hp相比前者更显著下调胃上皮细胞GJIC功能(全菌:t=13.86 ,P<0 .0 1;超声粉碎上清:t=11.87,P<0 .0 1)。结论　Cag A 比Cag A- Hp显著抑制胃上皮细胞的GJIC功能,提示其在胃癌发生中起重要作用。     

相关主题分析看尘肺研究的新动向

文献情报科学可以为学科的研究提供各方面的详尽的信息，诸如当今某一研究领域的主要内容、主要的研究手段和研究方向。采用一种新的科技文献情报分析方法——相关主题分析，对近１１年来《ＭＥＤＬＩＮＥＣＤ－ＲＯＭ》（ＳｉｌｖｅｒＰｌａｔｅｒ）收录的所有有关尘肺主题文献中的加权主题词（ＭＪＭＥ），按文献计量学方法进行统计分析，提出尘肺研究的新动态和新方向，为尘肺研究工作的管理和研究方向的确立提供理论依据。     

用因子分析法综合评价粉尘的细胞毒性

用因子分析法综合评价粉尘的细胞毒性浙江医科大学尘肺研究室毛国根，叶少菁，张琪凤粉尘致肺泡巨噬细胞（Ｐｕｌｍｏｎａｒｙａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＰＡＭ）的毒作用，是尘肺发生发展的中心环节。有关ＰＡＭ毒作用的实验观测指标较多，内容也较广泛［１...     

幽门螺杆菌全长cagA基因和霍乱毒素B亚单位基因的克隆与表达

目的：构建表达幽门螺杆菌（Hp)细胞毒素相关蛋白（CagA)及粘膜免疫佐剂量霍乱毒素B亚单位（CTB）的重组质粒，并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法：用PCR方法从幽门螺杆菌扩增CagA基因片段，从霍乱弧菌扩增CTB基因片段，将它们转入原核载体质粒pGEMEX-1，在大肠杆菌DH5α中克隆，并在JM109DE3中表达。结果：重组质粒pEGEMEX-CTB的全长序列经分析与GenBank公布的序列相符；各表达蛋白经SDS－PAGE分析，相对分子量与文献相符；重组蛋白经Westem blot检测有较强的抗原性。结论：基因重组菌表达的融合蛋白有可能作为有效抗原用于幽门螺杆菌疫苗的研制及检测试剂盒的制备。     

二氧化硅致肺成纤维细胞连接蛋白Cx43定位的改变

目的：研究SiO2刺激肺泡巨噬细胞（PAM）培养基上清液对肺成纤维细胞连接蛋白Cx43定位的影响,以深入探索SiO2抑制肺成纤维细胞间隙连接通讯（GJIC）的作用水平。方法：用0－500μg/ml SiO2刺激PAM和佛波酯（TPA）诱导分化的THP－1（TPA－primed THP-1,pTHP-1）细胞（具有PAM特性的人血单核细胞株）的培养上清液对培养的中国仓鼠肺成纤维细胞（GHL）作用24h,采用间接免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦扫描显微镜（LCSM）进行连接蛋白Cx43定位的测定。结果：正常对照线相邻细胞连接处有明亮的斑片状标记,聚集分布连接成线;SiO2刺激PAM和pTHP-1细胞培养上清液作用的CHL细胞连接处标亡斑点逐渐减少,Cx43蛋白标记斑点出现在胞浆内,呈无特异性定位状态;随着SiO2剂量的增加,细胞内Cx43蛋白标记斑点向细胞核聚集。结论：SiO2刺激PAM和pTHP-1细胞培养上清液可以改变肺成纤维细胞Cx43蛋白的定位。推测SiO2抑制成纤维细胞GJIC功能可能与细胞连接蛋白Cx43的内移有关。     

SiO2刺激肺泡上皮细胞间隙连接功能下调的研究

目的探索矽肺发病过程中,SiO2对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能(GJIC)的影响.方法不同剂量的SiO2刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)培养上清液,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL-64细胞.用四唑盐(MTT)法测定CCL-64细胞增殖(以A570nm值表示);采用激光扫描共焦显微镜(LSCM,LeicaTCS SP)用荧光光漂白后再恢复(FRAP)技术测定CCL-64细胞GJIC功能[以荧光扩散率K(×10-3/s)]表示.结果体积分数为5%的SiO2刺激的PAM上清液能诱导CCL-64细胞增殖(F=9.679,P＜0.01),并抑制CCL-64细胞间GJIC功能(F=20.587,P＜0.01).在50～500 μg/mlSiO2范围内,随SiO2浓度增加,两者均呈良好的剂量依赖性关系(GJICr=-0.943,P＜0.05;增殖r=0.891,P＜O.05).结论SiO2刺激PAM培养上清液可以抑制肺泡上皮细胞的GJIC功能,并诱导细胞增殖.推论肺泡上皮细胞GJIC功能下调在SiO2介导的肺泡上皮组织损伤中有重要的作用.     

嗜银蛋白在矽肺纤维化过程中的意义

目的探索ＳｉＯ２刺激ＴＨＰ１细胞（具有肺泡巨噬细胞特性的人血单核细胞株）上清液对中国仓鼠肺成纤维（ＣＨＬ）细胞核仁组成区相关的嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）形成及其增殖的关系。方法通过５个系列浓度（０、５０、１００、２００和５００μｇ／ｍｌ）的ＳｉＯ２刺激ＴＨＰ１细胞培养上清液作用于ＣＨＬ细胞,采用综合改良ＡｇＮＯＲｓ染色技术,观察其ＡｇＮＯＲｓ形成并计数;四唑盐（ＭＴＴ）比色法检测ＣＨＬ细胞的增殖。结果随ＳｉＯ２浓度增大,ＣＨＬ细胞ＡｇＮＯＲｓ颗粒均数、颗粒分散度以及ＭＴＴ分析Ａ５７０ｎｍ值均相应增大,呈良好的剂量反应关系,并和ＳｉＯ２尘的肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）的细胞毒性指数呈高度负相关（ｒ＝－０．９６８,Ｐ＜０．０１）。结论ＳｉＯ２刺激的ＴＨＰ１细胞上清液可以引起肺成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ含量的改变,并与成纤维细胞的增殖和ＳｉＯ２尘ＰＡＭ细胞毒性相一致。     

幽门螺杆菌CagA基因及其与致病性关系的研究进展

自本世纪８０年代初,Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌ［１,２］最先从胃炎及胃溃疡患者的胃粘膜活检标本中发现并分离到幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,ＨＰ）以来,开创了感染与胃部疾病发生有关的新领域。随后,大量研究资料确证ＨＰ与慢性胃炎、消...     

慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌babA2和cagA及vacA基因型分析

目的 :研究慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌 (Hp) bab A2、cag A、vac A基因型的分布 ,探讨 Hpbab A2、cag A、vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。方法 :用聚合酶链反应测定 5 8株从浙江省慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2基因、cag A基因和 vac A基因亚型。结果 :5 8株 Hp中 bab A2、cag A、vac A s1a、vac A m1、vac A m2基因的阳性率分别为 87.9%、10 0 %、93.1%、1.7%、65 .5 %。慢性胃炎和消化性溃疡患者感染的Hp bab A2、vac A s1a、vac A m2基因阳性率差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :从浙江地区慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2、cag A、vac A基因型均以 bab A2阳性、cag A阳性和 vac A s1a/ m2型为主 ,未发现 Hp bab A2、cag A和 vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。