脑梗死患者血管紧张素转换酶基因多态性与脑血流动力学的关系

目的探讨脑梗死患者血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与颅内动脉血流动力学的关系。方法应用聚合酶链反应（PCR）测定146例脑梗死患者ACE基因插入／缺失（D／I）多态性,以经颅多普勒超声（TCD）检测大脑主要动脉血流速度,并与对照组比较。结果观察组ACEDD基因型频率为41％,明显高于对照组的27％（P〈0.01）。观察组ACEDD基因型大脑中动脉（MCA）的平均血流速度（Vm）及脉动指数（PI）明显高于对照组,而观察组DI、II基因型MCA的Vm与对照组比较差异均无统计学意义（均P〉005）。伴MCA狭窄且脑梗死发病年龄〉60岁者的ACEDD基因型频率为0.5,明显高于发病年龄≤60岁者（P〈005）。前者MCA中重度狭窄的ACEDD基因型频率为485％,明显高于同基因型发病年龄≤60岁者的11．1％（P〈0．05）。结论年龄在60岁以上ACEDD基因携带者可能是通过引起脑动脉狭窄性改变而致脑梗死。     

光学相干断层扫描仪在多发性硬化患者中的初步应用

目的：利用光学相干断层扫描仪（OCT）评估多发性硬化（MS）患者与正常人眼视网膜神经纤维层（RNFL）厚度和黄斑中心凹厚度及体积的差异,评估OCT监测MS患者病程中轴突缺失的意义。方法选取MS患者30例（60眼）,根据有无视神经炎（ON）发作史分为MS- ON组（41眼）和MS- NON组（19眼）,同时选择年龄和性别相匹配的健康体检者30例（60眼）为对照组。对3组受试者均进行详细的眼科检查,并使用OCT测定RNFL厚度和黄斑参数。采用单因素方差分析对3组的RNFL厚度、黄斑中心凹厚度和体积的差异进行分析。结果两组MS患者的RNFL厚度和黄斑参数与对照组均有统计学差异,MS- ON组和MS- NON组之间的RNFL厚度和黄斑参数也有差异（均P＜0.05）。结论 OCT可作为MS诊断的辅助检查手段。     

多发性硬化患者血清维生素D水平变化及与临床相关性研究

目的观察多发性硬化(MS)患者体内维生素D水平,探讨维生素D水平与MS临床表型的关系。方法收集MS患者72例,包括复发缓解型MS(RRMS)62例、继发进展型MS(SPMS)7例及原发进展型MS(PPMS)3例;视神经脊髓炎(NMO)患者24例;以32名健康体检者为健康对照组(NC组)。采用电化学发光法对血清25-羟维生素D_3[25-hydroxyvitamin D_3,25(OH)D_3]进行检测,所有MS患者在留取血标本的同时进行扩展残疾状态量表(EDSS)评分,对其中15例急性复发期RRMS患者在缓解期再次行血清25(OH)D_3检测和EDSS评分。结果 MS组、NC组及NMO组间血清25(OH)D_3水平比较差异有统计学意义(F=10.55,P0.01),MS组及NMO组均低于NC组(分别P0.01,P0.05),但MS组与NMO组相比差异无统计学意义(P0.05);SPMS患者血清25(OH)D_3水平低于NC组(P0.01),但与RRMS患者比较无统计学差异(P0.05);RRMS患者血清25(OH)D_3水平缓解期高于急性复发期(t=2.92,P0.05),但仍低于NC组(P0.01)。结论 MS及NMO患者体内维生素D不足,且维生素D不足贯穿于MS的不同病程阶段,RRMS患者急性复发期维生素D不足更为明显。     

血清水通道蛋白4抗体测定对视神经脊髓炎的诊断及预后判断价值

 目的:探讨血清水通道蛋白4（AQP4）抗体检测对视神经脊髓炎（NMO）诊断及预后判断的临床价值。 方法:  收集2010年1月至2013年12月在温州医科大学附属第一医院神经内科住院或门诊就诊的48例NMO、33例脊髓炎（TM）［包括26例长节段脊髓炎(LETM)和7例复发性脊髓炎(rLETM)］、30例视神经炎（ON） ［包括25例双眼视神经炎（BON）和5例复发性视神经炎（RION）］、52例多发性硬化（MS）及16例其它神经系统疾病（OND）的患者血清及相关临床资料。采用细胞免疫荧光法检测血清AQP4抗体。分析各组患者血清AQP4抗体的阳性率及抗体滴度,比较AQP4抗体阳性NMO患者与AQP4抗体阴性患者的临床特征。通过绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）,评价AQP4对NMO诊断的敏感性和特异性。应用Kaplan-Meier曲线分析血清AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累计概率。 结果: NMO组AQP4抗体阳性率最高（87.50％）,其后依次为rLETM组（85.71%）、RION组（80.00%）、LETM组（30.70%）、 BON组（8.00%）和MS组（3.85%）, OND组抗体检测为阴性。NMO组中血清AQP4抗体阳性患者在性别构成比、确诊为NMO时间及伴有严重神经炎的比例等方面,与抗体阴性患者相比差异有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线提示血清AQP4抗体对诊断NMO的敏感性为87.5%,特异性为85.4%。Kaplan-Meier曲线提示AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累积概率明显高于抗体阴性的患者（P<0.05）。 结论: 血清AQP4抗体检测对诊断NMO具有较高的敏感性及特异性,且有助于NMO预后和转归的判断。     

应用MOG—TrxA建立小鼠EAE动物模型的新方法

目的探索利用基因工程生产的少突胶质细胞糖蛋白-硫氧还融合蛋白（MOG—TrxA）免疫C57BL／6（H-2b）小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）动物模型的方法。方法利用实验室已经重组成功的携带pET32（a）-MOG—TrxA质粒的大肠杆菌BL21和携带pET32（a）-TrxA质粒的空载大肠杆菌BL21分别诱导大量表达MOG—TrxA和TrxA,并利用蛋白金属螯合亲和层析纯化,超滤法浓缩除盐,Bradford法蛋白定量,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。利用制备的MOG—TrxA抗原免疫C57BL／6（H-2b）小鼠诱导EAE动物模型,以TrxA免疫动物作为对照组,以脊髓匀浆（SCH）免疫动物作为阳性对照组,以临床评分、体重变化、HE染色和Kluver—Barrera髓鞘染色评分等指标,评价模型的质量。结果MOG—TrxA组动物在临床评分、HE染色病理评分和Kluver—Barrera髓鞘染色病理评分等指标与TrxA组相比明显增高,体重明显下降,数据差异均有统计学意义（均P〈0．01）,与SCH组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论利用基因工程制备的MOG—TrxA免疫C57BL／6（H-2b）小鼠能成功建立慢性非缓僻型EAE动物模型。     

血清抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体对多发性硬化的诊断意义

目的：探讨血清抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）抗体对多发性硬化（MS）的诊断意义。方法利用放射免疫方法分别测定23例MS、57例临床孤立综合征（CIS）、41例其他炎症性神经系统疾病（OIND）、37例非炎症性神经系统疾病（ONND）患者的血清抗MOG抗体水平。并对MRI发现中枢神经脱髓鞘患者的病灶负荷进行测定,将其与患者血清中抗MOG抗体水平作相关性分析。通过绘制受试者受试者工作特征（ROC）曲线,比较血清抗MOG抗体水平、脑脊液IgG指数、24h鞘内IgG合成率等参数对MS诊断的敏感性和特异性。结果 MS组患者血清中抗MOG抗体的水平及抗MOG抗体阳性率明显高于CIS组、OIND组和ONND组,差异有统计学意义（P＜0.01）。MS组活动期血清抗MOG抗体的水平及阳性率高于缓解期（P＜0.05）。中枢脱髓鞘病变（MS和CIS）患者MRI显示的病灶负荷与其血清抗MOG抗体水平呈正相关（P＜0.01）。抗MOG抗体的ROC曲线下面积,高于脑脊液IgG指数、24h鞘内IgG合成率。结论血清抗MOG抗体可以成为可靠的诊断MS的生物学指标之一。     

缺血性脑卒中合并糖尿病肾病患者预后影响因素分析

目的探讨缺血性脑卒中（CIS）合并糖尿病肾病患者预后的影响因素。方法对527例初发CIS合并糖尿病肾病患者进行研究，以CIS复发或因病死亡为研究终点，分为预后不良组（达到终点事件者）58例和预后良好组（未达到终点事件者）469例，比较两组患者临床特征的差异，采用logistic回归分析法探讨预后的影响因素。结果两组患者年龄、入院改良Rankin评分（mRS）、美国国立卫生研究院卒中评分（NIHSS）、日常生活能力量表（ADL）、糖化血红蛋白、血肌酐、尿蛋白/肌酐比比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。logistic回归分析显示，入院mRS、NIHSS、ADL、尿蛋白/肌酐比、血肌酐和糖化血红蛋白为CIS合并糖尿病肾病患者预后的影响因素（均P＜0.05）。结论入院mRS、NIHSS、ADL、尿蛋白/肌酐比、血肌酐和糖化血红蛋白为CIS合并糖尿病肾病患者预后的影响因素。     

脂肪源性干细胞对多发性硬化患者Th17的免疫调控作用

 目的: 探讨人脂肪源性干细胞(hASCs)对多发性硬化(MS)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)的免疫调控作用机制。方法: 分离、纯化脂肪组织中的hASCs。采用密度梯度离心法分离MS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选CD4⁺T细胞,体外刺激细胞向Th17极化,并加入不同比例的hASCs(hASCs:CD4⁺T为1:4和1:10)共培养4 d,设立添加anti-LIF抗体组;流式细胞术检测共培养后Th17细胞占CD4⁺T细胞的比例,real-time PCR检测白细胞介素6受体(IL-6R)、白细胞介素23受体(IL-23R)、白血病抑制因子受体(LIFR)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)及白血病抑制因子(LIF)的mRNA水平变化;ELISA法检测共培养体系上清液中LIF的水平。结果: 分离的hASCs经流式细胞术鉴定可基本判定为hASCs;PBMCs经磁珠法分选后获得90%以上纯度的CD4⁺T细胞。共培养后,1:4组和1:10组中Th17细胞所占比例下降,且存在高浓度抑制效应;共培养后RORγt、IL-6R和IL-23R的mRNA表达水平下降,LIFR和LIF的mRNA表达水平均升高;加入anti-LIF抗体后,Th17细胞比例回升至对照组水平;RORγt和IL-6R的mRNA表达水平回升;ELISA检测各组LIF的水平,共培养组LIF分泌均较对照组明显增多,加入anti-LIF抗体后明显减少。结论: hASCs可抑制MS患者Th17细胞的分化,其作用可能与其分泌LIF、通过IL-6/LIF轴竞争性抑制有关。     

抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体放射免疫测定方法的建立

目的 建立以125I -抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）一硫氧还融合蛋白（MOG融合蛋白）介导的放射免疫分析技术（RIA）作为测定实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠血清抗MOG抗体的新方法.方法 Na125I标记MOG融合蛋白,以MOG融合蛋白免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,将125I -MOG融合蛋白与小鼠血清标本结合,孵育后与兔抗鼠IgG结合,收集沉淀,用γ放射性检测仪测定抗MOG抗体水平.结果 成功制备纯度较高的125I-MOG融合蛋白,当实验条件为Na125I 投料量1mCi,MOG融合蛋白量60μg时,获得较好的标记率48.3631%,最高的比放射性320 043.7 Bq/μg.应用新型放射免疫法测定小鼠血清抗MOG抗体,MOG组血清抗MOG抗体水平与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 成功建立了一种较为敏感的测定血清抗MOG抗体的放射免疫方法.     

多发性硬化Poser标准与McDonald标准的比较

目的 比较分析Poser标准与McDonald标准在多发性硬化（MS）患者诊断应用中的差异. 方法将Poser标准与McDonald标准回顾性应用于154例临床表现提示为MS的患者,分别进行诊断分类.结果 111例患者根据Poser诊断标准分类,临床确诊52例,实验室确诊17例,临床可能42例.另外有43例不能满足Poser标准中的任意一项,包括3例原发进展型MS（PPMS）和40例单个部位发作的临床孤立综合征（CIS）.154例根据McDonald诊断标准分类,确诊MS 57例,可能MS 97例,其中临床确诊PPMS 3例,可能PPMS 4例.两种诊断标准阳性率差异有统计学意义（X2=52.858,P〈0.01）,但两者仍然有较高的一致性（Kappa=0.674）.被两种诊断标准同时确诊为MS有52例,被两种诊断标准同时诊断为可能MS有54例,符合率为95.5%.结论 McDonald标准对于PPMS和单个部位发作的CIS诊断较Poser标准有明显优势,Poser标准诊断阳性率较McDonald标准高,但两种标准仍有很高的符合率.