ESRP1剪接变异体的克隆及其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的克隆ESRP1剪接变异体并构建其慢病毒表达载体,研究其对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法以OVCAR3细胞的c DNA为模板,PCR扩增ESRP1剪接变异体,将其连接到带有Myc标签的pCMV-Myc真核表达载体;再以该真核表达载体为模板,将含有Myc标签的ESRP1剪接变异体克隆到慢病毒表达载体p LVt TR/KRAB-Red上,从而构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体慢病毒表达载体;用该慢病毒表达载体转染293T细胞,包装慢病毒;用该慢病毒感染MDA-MB-231细胞,用MTT法检测该细胞增殖,用Western blot检测该细胞中PARP蛋白的表达。结果成功构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;用该慢病毒感染MDA-MB-231细胞后,与空载体对照组比较,ESRP1过表达能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(P0.05);ESRP1过表达能诱导PARP蛋白的剪切。结论成功构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体的慢病毒表达载体;ESRP1过表达能抑制MDA-MB-231细胞增殖,这可能与细胞死亡有关。     

基于线粒体靶点的参附注射液对心肌损伤保护作用

心肌损伤是一种疾病状态,可以继发于缺血缺氧、免疫反应、代谢障碍、创伤、感染等各种因素,一旦出现将直接影响患者预后。其潜在机制包括氧化应激、炎症反应、能量代谢异常、凋亡途径激活、线粒体途径等,其中,线粒体的功能障碍是重要因素。越来越多研究表明介导线粒体途径可改善心肌损伤。参附注射液已广泛用于治疗各种心血管疾病,然而,有关机制仍有待充分阐明。本综述以线粒体为靶点,从线粒体动力学、线粒体能量代谢、线粒体结构、线粒体氧化应激等方面,介绍参附注射液对心肌损伤保护作用。