聚合酶链反应诊断女性外阴尖锐湿疣初步探讨

聚合酶链反应诊断女性外阴尖锐湿疣初步探讨郑惠方单祥年李明发蒋清龚嘉仪（南京铁道医学院附属医院妇产科，生物学教研室，附属医院病理科南京２１０００９）尖锐湿疣（ＣＡ）主要由人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６及１１型ＤＮＡ感染引起。尖锐湿疣和假性湿疣...     

解脲脲原体与自然流产关系的探讨

采用聚合酶链反应技术对３２例自然流产患者的宫颈粘液及其中２２例清宫组织进行解脲脲原体（ＵＵ）检测，并与３０例人工流产妇女比较。结果表明：自然流产与ＵＵ寄生于宫颈无关（Ｐ＞０．０５），与宫内感染ＵＵ明显相关（Ｐ＜０．０５）。     

一个遗传性非综合征型耳聋家系的突变分析

目的分析一个遗传性非综合征型耳聋家系的突变，并探讨缝隙连接蛋白beta2(gap junction protein beta 2，GJB2)基因235delC突变是否会加重线粒体A1555G突变导致的非综合征型耳聋症状。方法对一个母系遗传性非综合征型耳聋核心家系72个成员取外周血提取DNA，经聚合酶链反应扩增后，利用Alw26Ⅰ限制性内切酶酶切及直接测序验证，对其线粒体DNA突变进行研究；利用ApaⅠ限制性内切酶酶切及直接测序验证，筛查核心家系中GJB2基因235delC突变情况，并对GJB2基因235delC和线粒体A1555G突变的关系进行研究。结果在27名母系成员中均发现具有线粒体A1555G突变，呈母系遗传；具有耳聋表型的为21人(77．8％)，家族外显率高；所筛查的包括配偶在内的72名个体中，仅3例具有GJB2基因235delC杂合子突变，且均出现在母系成员中，但3例的耳聋表型却不同。结论线粒体A1555G突变是本家系耳聋遗传易感性的基础，在该家系中GJB2基因的235delC杂合子突变未加重线粒体A1555G突变导致的非综合征型耳聋。     

AT基因突变与食管癌及结肠癌的关系

目的 :探讨共济失调毛细血管扩张症 (AT)基因突变与食管癌及结肠癌发病的关系。方法 :运用PCR SSCP及DNA同位素测序等技术 ,对 17例食管癌和 15例结肠癌患者的AT基因第 41～ 5 1外显子进行突变检测。结果 :15例结肠癌标本的SSCP带型与正常对照组织无差异 ;17例食管癌标本中有 1例SSCP带型比正常对照组织多一条带 ,测序发现 ,该例标本在AT基因第 49外显子发生单碱基缺失。结论 :AT基因突变可能与某些类型的食管癌发病有关 ,但尚不能判断与结肠癌的相关性     

逆转录病毒介导IL－2基因导入肝癌细胞的研究

利用逆转录病毒载体系统ＰＡ３１７／ＬＮＣ－ＩＬ－２所产生的含有ＩＬ－２基因及新霉素抗性基因（ｎｅｏｒ）的重组病毒，经共培养转染ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株。ＩＬ－２基因受巨细胞病毒早期启动子调控，转染后的细胞置于含新霉素类毒性药物Ｇ４１８（４００ｕｇ／ｍｌ）培养基内培养、筛选３０天，结果果转染率约为１～２％。对存活下来的转染有ＩＬ－２基因和新霉素抗性基因的细胞形态和生长情况进行观察，同时从水平及蛋白质水平对外源性基因的转录和翻译进行检测。结果表明：ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞在ＩＬ－２基因转染前后形态及生长情况无明显变化；培养上清活性检测发现转染后为转染前的２０～３０倍；逆转录ＰＣＲ分析显示转染后的ＩＬ－２ｍＲＮＡ量明显高于转染前。研究表明我们已成功地将ＩＬ－２基因导入肝癌细胞并获得持续、稳定、高效表达。     

电镜下观察人类染色体的超微结构

本文作者介绍了用电镜观察人类染色体标本的新技术。他们用HeLa S_3细胞悬浮培养经过胸腺嘧啶(1mM,16h)两次同步处理,继之用较高浓度(0.1μg/ml)秋水仙素,16小时后按常规方法制片得到80～90％的有丝分裂指数,分裂相为高度收缩的粗短染色体,作者将这样的染色体直接滴在包有碳和树脂类外衣的电镜网栅(grid)上,观察染色体的结构。其结果看到了粗大的染     

p16和Rb基因蛋白在肺癌中的表达

目的：研究ｐ１６和Ｒｂ基因蛋白的表达与肺癌临床病理学特征的关系。方法：采用免疫组织化学方法对８９例肺癌进行了ｐ１６和Ｒｂ蛋白的定位观察。结果：肺癌；ｐ１６基因蛋白的总丢失率为４７．２％，且与肺癌的组织学类型，淋巴结转移，临床病理分期有关。Ｒｂ基因蛋白的总丢失率为３１．５％，与组织学类型有关。     

抗人甲状腺素单克隆抗体的制备及其初步的临床应用

本文用甲状腺素(T_4)甲酯—BSA抗原免疫BALB/C小鼠,获得4株分泌抗人甲状腺素单克隆抗体的杂交瘤细胞系。亚类鉴定均属IgG_1型。将单克隆抗体应用在放射免疫分析(RIA)中,取代多克隆抗体,证实其在甲状腺疾病诊断中,甲状腺机能亢进的诊断符合率高于多克隆抗体,显示其特异性强、灵敏度高、亲和力好(亲和常数K=1.26x10~(10)L/M)、反应平衡时间短等优点。     

江苏地区献血者中TTVDNA的PCR扩增检测及部分基因序列分析

TTV是新发现的DNA病毒［1］,为了解TTV 的流行情况,笔者在不同人群中开展了TTV感染的分子流行病学调查。本文报告对江苏地区献血者进行TTV感染状况调查及对部分TTV感染株基因分析的结果。1 材料和方法1．1 标本采集 1999年5～10月期间,在南京市红十字血液中心参加献血的职业献血者和无偿献血者195人。其中96人为ALT正常献血者,99人为ALT异常献血者。采集静脉血2ml,分离血清,分装后置-20℃备用。     

一个能诱生戊型肝炎病毒中和抗体的ORF2编码蛋白短片段

目的：比较戊型肝炎病毒（HEV）第4基因型ORF2编码蛋白片段pN472-C617（aa472～617）和pN477-C613（aa477～613）的免疫原性，找到能诱生HEV中和抗体的ORF2编码蛋白的更短片段。方法：表达和纯化pN472-C617和pN477-C613，分别免疫BALB/c小鼠，以间接ELISA检测免疫血清的抗体效价，并以基于PCR的体外中和试验检测免疫血清的中和活性。结果：pN472-C617和pN477-C613可在大肠杆菌高效可溶性表达，纯化后的重组蛋白能在小鼠体内诱导出高效价的抗体。基于PCR的体外中和试验显示pN472-C617免疫血清可有效中和HEV，阻断其在敏感细胞表面的吸附和细胞内复制；而两端仅比pN472-C617各短5个氨基酸的pN477-C613的免疫血清不具有中和HEV的活性。结论：重组蛋白pN472-C617具有良好的抗原性和诱生中和抗体的能力，是目前文献报道中含有HEV中和抗原表位的最短ORF2编码蛋白片段，可作为重组亚单位候选疫苗用于HEV疫苗的开发。