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目的:从幽门螺杆菌(Hp)分离热休克蛋白A基因,并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达,方法:提取Hp染色体DNA,用PCR方法扩增hspA基因。经克隆、测序后,构建融合分泌表达载体pMAL-HspA,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达。结果:分离得到了高度保守的354bp的hspA基因片段,并在大肠杆菌中实现了该基因的融合分泌表达。在37℃诱导表达3h后,基融合分泌表达蛋白可占细菌周质总蛋白的66.6%。 相似文献
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本实验采用国标规定的常规检验法对从长春市采集的62份肉样,152份奶样共214份食品样品进行了金黄色葡萄球菌的检验,结果有26份呈现阳性,阳性率为12.15%。同时,对这些样品进行了溶血试验与DNase试验,分别有35份和59份呈现阳性。 相似文献
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目的将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因和热休克蛋白A亚单位基因融合,并实现其在大肠杆菌中的表达,为构建该菌的基因工程二价苗打下基础.方法通过交叠延伸拼接PCR法将幽门螺杆菌ureB基因和hspA基因通过(Gly4Ser)3linker连接起来,经NcoⅠ和NotⅠ双酶切后定向克隆入表达载体pET22b+的pelB前导序列下游,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL31(DE3),用1PTG诱导表达.结果幽门螺杆菌的尿素酶B亚单位基因和热休克蛋白A亚单位基因通过linker获得了融合,序列分析表明,此融合基因序列拼接正确,且是通读的.含有该融合基因表达载体的表达菌株BL31(pET-BA)在30℃经IPTG诱导表达4h后,用10%SDS-PAGE电泳分析表明,在细菌周质表达有约与预期融合基因表达蛋白大小一致的外源蛋白质表达带.结论幽门螺杆菌ureB与hspA成功地实现了在大肠杆菌中的融合表达,为进一步评价其对Hp的免疫保护效果和构建Hp二价基因工程苗打下了基础. 相似文献
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抗体技术发展至今已走过了三代的历程,第一代抗体是1890年德国学者Behring和日本学者北里首先从抗原被动免疫后获得的免疫清中发现的,即多克隆抗体;第二代是1975年德国学者Kohler和英国学者Mistein利用细胞融合技术,通过杂交瘤来制得 相似文献
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目的 调查几种细胞因子及其受体在放射性肺纤维化(RPF)发生中的作用。方法 采用免疫组织化学、细胞免疫化学和原位杂交的方法对RPF大鼠肺组织细胞进行了研究。结果 正常大鼠肺组织有TGFβ1和TGFβR的弱表达,照射动物肺脏TGFβ1的表达于照射后2周开始增高,从第8周直到3月表达水平最高,肺脏表达TGFβ1的部位主要是支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、支气管和血管平滑肌细胞以及成纤维细胞等,TGFβ2的表达变化规律除了比TGFβ1稍弱外类似于TGFβ1。TGFβR表达增强的时间比TGFβ1稍晚,于第8周开始增强,直到1年也保持较高水平的表达,bFGF和PDGF在照射后2~3个月表达水平明显增高。对支气管肺泡灌洗液中的细胞TGFβ1免疫细胞化学研究表明:其中的细胞,特别是巨噬细胞表达时间的出现得较早,于 相似文献