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本文采用间接ELISA法检测了11株抗B-CLL患者IgM腹水和杂交瘤上清McAb的相对亲和力。结果提示,各株McAb结合抗原的相对亲和力不同。根据50%最大结合浓度分为两组。其中4株杂交瘤上清McAb与纯化腹水McAb测得结果基本吻合。实验结果为合理地选用这些单抗提供了重要依据。 相似文献
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目的用多重PCR方法鉴别不同卡介苗菌株。方法根据卡介苗DNA的6个目的区域的特点设计引物,进行多重PCR扩增,然后电泳检测分析。结果多重PCR方法能够鉴别不同卡介苗亚株。结论应用多重PCR方法鉴别卡介苗菌株具有专一性好、重复性高、快速简便等优点。 相似文献
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抗CD_3单抗诱导淋巴细胞增殖的实验条件分析杨敬,李鸣,张悦,刘少祥同济医科大学基础医学院免疫学教研室,武汉430030关键词CD_3单抗;淋巴细胞活化增殖中图法分类号R392.12T淋巴细胞表面CO3抗原的单克隆抗体(抗CO3McAb)能激活淋巴细胞... 相似文献
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目的 采用40层细胞工厂(40-layer cell factory, CF40)工艺培养原代地鼠肾(primary hamster kidney, PHK)细胞,优化乙脑减毒活疫苗的生产工艺。 方法 用不同浓度新生牛血清培养不同接种密度PHK细胞,比较各组PHK细胞数量,确定CF40工艺的PHK细胞接种密度和新生牛血清浓度。通过对比CF40和15 L转瓶采用不同新生牛血清的PHK细胞培养情况,比较两种工艺对新生牛血清的选择性。对4个厂家CF40培养的PHK细胞数量进行单因素方差分析,判定对CF40的选择性。结果 CF40工艺的最有条件为PHK细胞接种密度为6.1×105 ml-1、新生牛血清浓度6%。CF40工艺对新生牛血清的选择性较低,能比转瓶工艺更稳定地培养更多的PHK细胞。4个厂家CF40培养的PHK细胞数量之间的差异无统计学意义(F=0.23,P>0.05),对CF40选择性低。 结论 采用CF40可以制备出满足乙脑减毒活疫苗生产要求的PHK细胞。 相似文献
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目的评价≥60岁老年人再接种23价肺炎球菌多糖疫苗(PPV23)的免疫原性和安全性。方法招募≥60岁有1剂次PPV23免疫史者作为再接种组, 无肺炎球菌疫苗免疫史者作为首次接种组, 两组研究对象接种1剂次PPV23, 于接种前后28~40 d采集血标本, 使用ELISA检测抗特定血清型肺炎链球菌荚膜多糖免疫球蛋白G浓度, 监测研究对象接种后30 d内的安全性。结果免疫前23个血清型抗体几何平均浓度(GMC)再接种组(0.73~13.73 μg/ml)高于首次接种组(0.39~7.53 μg/ml), 再接种组免疫后GMC(1.42~31.65 μg/ml)高于免疫前(0.73~13.73 μg/ml), 首次接种组免疫后GMC(1.62~43.76 μg/ml)高于免疫前(0.39~7.53 μg/ml);再接种组几何平均增长倍数(2.16~3.60)低于首次接种组(3.86~16.13);再接种组抗体平均2倍增长率[53.68%(95%CI:52.30%~55.06%)]低于首次接种组[93.16%(95%CI:92.18%~94.15%)], 差异均有统计学意义(P<0.00... 相似文献
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目的 通过喷雾式添加氨水制备氢氧化铝佐剂,分析其对佐剂质量批间一致性的影响。 方法 分别以喷雾和流加方式添加氨水至三氯化铝溶液各制备3批氢氧化铝佐剂,比较两种氨水添加工艺制备的佐剂粒径、pH、外观等质量指标。 结果 喷雾方式添加氨水制备的3批佐剂平均粒径为(96.7±8.6) nm,pH为4.93±0.02,透析后沉淀量为(20.9±0.4) g/L;流加方式添加氨水制备的3批佐剂平均粒径为(161.0±24.7) nm,pH为4.85±0.06,透析后沉淀量为(105.6±13.8) g/L。相较于流加,以喷雾式添加氨水制备的3批佐剂为均一的乳白色悬液,粒径更小,透析后透析袋底部大颗粒沉淀明显减少,批间一致性更好。 结论 采用喷雾方式将氨水加入三氯化铝溶液中,可使氨水与三氯化铝溶液接触更加充分,产物更加均匀,有助于提高氢氧化铝佐剂外观、粒径、pH等质量指标的批间一致性。 相似文献
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目的 建立用中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞检测百日咳毒素(PT)毒性的方法,并对其适用性进行初步验证。方法 根据PT能特异地使CHO细胞簇集的特性,以国家PT标准品为参考品,取多批脱毒后PT进行检测,摸索适宜的孵育时间、细胞悬液浓度等实验条件,建立PT毒性的体外检测方法。对PT参考品进行倍比系列稀释,确定本法的检测限。对5批脱毒后PT进行重复检测,验证本法的重复性。结果 利用不同浓度CHO细胞对脱毒PT进行测定,确定最佳细胞浓度为5×104/ml,并通过最佳浓度细胞确定簇集结果的最佳判定时间为PT接种后48 h。本法对PT标准品的检测限定为125~500 pg/ml。用本法重复测定5批脱毒PT的残余毒性,变异系数为0.0%~34.6%,说明该法重复性良好。结论 建立的CHO细胞检测法快捷、简便,能灵敏、准确地检测脱毒PT的残余毒性,可用于相关疫苗产品的质量控制。 相似文献
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目的 采用40层细胞工厂(CF40)替代15 L转瓶工艺制备乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗。方法 分别采用CF40和15 L转瓶工艺制备乙脑减毒活疫苗,通过显微镜观察和细胞计数来考察细胞质量。病毒收获时观察细胞病变情况,并对2种工艺制备的原液、半成品以及成品进行病毒滴度检测对比,成品37 ℃放置7 d考察成品热稳定性。结果 两种工艺相比,细胞工厂内单位面积内细胞数量差异存在统计学意义(P<0.05》),生长一致性和单只地鼠制备的细胞数量均优于15 L转瓶;CF40和15 L转瓶制备的单一病毒收获液平均滴度分别为7.59 lgPFU/ml和7.56 lgPFU/ml,没有显著差异(P>0.05),但CF40单一病毒收获液收率一致性更好;两种工艺制备的原液、半成品、成品滴度以及7 d后37 ℃热稳定性均符合企业注册标准规定。结论 使用CF40制备乙脑减毒活疫苗是可行的,并且在产品收率和一致性方面优于15 L转瓶工艺。 相似文献
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目的 验证PHK细胞残余蛋白检测试剂盒检测乙型脑炎减毒活疫苗(乙脑疫苗)原液的残余PHK细胞蛋白的适用性。 方法 对PHK细胞残余蛋白检测试剂盒检测乙脑疫苗原液的残余PHK细胞蛋白的准确性、精密度、专属性、耐用性和线性进行验证。 结果 PHK细胞残余蛋白检测试剂盒检测乙脑疫苗原液的残余PHK细胞蛋白的准确性良好,PHK细胞蛋白标准品的回收率为96.16%~111.44%。该试剂盒在PHK细胞蛋白质量浓度为6.25~200.00 μg/L时呈现良好的线性,决定系数为0.997,最低检测限和最低定量限分别为6.70和22.33 μg/L。该试剂盒检测乙脑疫苗原液中的残余PHK细胞蛋白的专属性良好,而且操作人员、时间和试剂盒批号变化对检测结果没影响(相对标准偏差均≤15%)。 结论 PHK细胞残余蛋白检测试剂盒适用于乙脑疫苗中的残余PHK细胞蛋白检测。 相似文献
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目的 探讨发酵罐酸洗钝化对百日咳杆菌生长和产毒的影响。方法 定期对百日咳发酵罐进行酸洗钝化处理,去除其表面附着的代谢螯合物。通过检测后续培养收获物菌浓度(550 nm吸光度值)、一次盐析物沉淀量、发酵产物中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)含量,比较分析判断酸洗钝化对发酵培养和产毒的影响。结果 对处理前后各连续10批相关指标进行比较,处理后菌体550 nm吸光度均值由4.663提高至5.490,一次盐析沉淀量均值由4.84 g/L提高至5.90 g/L,PT平均含量达到3.3 μg/ml,FHA平均含量达到7.6 μg/ml,处理前后各连续10批菌体浓度和一次盐析沉淀量数据采用t检验计算出P值分别为0.03和0.05,各项数据差异均有统计学意义(P≤0.05)。结论 定期对发酵罐进行酸洗钝化可有效改善百日咳杆菌发酵及产毒水平。 相似文献