融合蛋白DnaJ-△A146Ply对小鼠肺炎链球菌脑膜炎感染的保护效果

目的 探究融合蛋白DnaJ-ΔA146Ply对小鼠肺炎链球菌脑膜炎感染的保护效果。方法 侧脑室法构建模型的免疫保护实验:C57BL/6雌鼠随机分为抗DnaJ-ΔA146Ply血清+Ⅲ型组、WT血清+Ⅲ型组、抗DnaJ-ΔA146Ply血清+Tigr4组、WT血清+Tigr4组,经侧脑室注射血清及肺炎链球菌血清型Ⅲ型和Tigr4,构建被动免疫模型,24 h后计数菌载量、ELISA测定脑匀浆炎症因子情况及脑组织切片HE染色,观察抗DnaJ-ΔA146Ply血清被动免疫保护效果。尾静脉法构建模型的免疫保护实验:C57BL/6雌鼠随机分为DnaJ-ΔA146Ply组和PBS组,经3次皮下免疫后,通过尾静脉注射肺炎链球菌血清型Tigr4构建肺炎链球菌脑膜炎,24 h后进行脑匀浆、心脏血等菌载量计数,观察免疫保护作用。结果 侧脑室法注射抗DnaJ-ΔA146Ply血清并进行肺炎链球菌攻毒后,脑组织中细菌载量明显降低,脑中TNF-α表达量下调,侧脑室及软脑膜炎症细胞浸润情况减轻。小鼠3次皮下免疫DnaJ-ΔA146Ply后抗体效价达到106,在尾静脉法构建的Tigr4脑膜炎小鼠中,免疫组脑组织中细菌载量降低。结论 融合蛋白DnaJ-ΔA146Ply对不同血清型肺炎链球菌导致的小鼠脑膜炎感染具有保护作用,能够降低细菌侵袭和脑组织炎性反应。     

自动化智能药柜在神经科病区的应用及效果分析

目的 探讨自动化智能药柜在神经科病区的应用效果,为创建信息化药品管理模式提供参考。方法 对比智能药柜应用前后的使用资料,分析自动化智能药柜在神经科病区的应用效果。结果 应用智能药柜后,药师备药时间、护士执行医嘱时间、退药时间、临嘱摆药次数均明显缩短(P<0.05),但临时医嘱退药次数无明显差异(P>0.05)。在安全性方面,智能药柜有效降低与取药相关错误(P<0.05),且未增加用药差错。在满意度方面,护士及药师对其应用效果的总体满意率达93.18%。在成本方面,总节省成本为6945.72(5556.57～8272.49)元/月。结论 自动化智能药柜的应用可以优化病区的药品管理模式,提高医务人员的工作效率,保证危重患者用药的及时性。     

不同预处理方法消除流式细胞术检测细胞因子分析干扰的效果

目的 采用不同方法预处理流式细胞术多细胞因子检测结果异常升高的血浆样本,比较其消除分析干扰的效果。方法选取流式细胞术多细胞因子检测结果异常升高的血浆样本32例,分别采用样本稀释、20%聚乙二醇6000 (PEG-6000)沉淀法和嗜异性抗体阻断管（HBT）预处理上述血浆样本后,检测白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子（TNF） 7种细胞因子的表达水平,并与电化学发光法的IL-6检测结果进行比较。结果 流式细胞术细胞因子检测结果异常升高的血浆样本经过倍比稀释后,7种细胞因子检测结果与稀释倍数未呈线性关系的比例>60%;与稀释倍数未呈线性关系的血浆样本经过PEG-6000沉淀法和HBT预处理后,与未经预处理的样本相比,7种细胞因子流式细胞术检测结果均明显下降（均P <0.05）;与稀释倍数呈线性关系的血浆样本经过PEG-6000沉淀法和HBT预处理后,与未经预处理的样本相比,IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF亦呈下降趋势（均P <0.05）。PEG-6000沉淀法和HBT预处理后血浆样本的流式细胞术...     

1例Lemierre’s综合征患者的药物治疗分析与监护

目的 为Lemierre’s综合征的早期诊断、药物治疗及用药监护提供参考。方法 医师根据患者病情及血宏基因组二代测序检测结果确诊患者为Lemierre’s综合征,临床药师参与了该患者的治疗全过程。治疗过程中,临床药师针对坏死梭杆菌感染,建议予哌拉西林钠他唑巴坦钠联合甲硝唑抗感染治疗;针对左侧颈内静脉炎并血栓形成,建议予依诺肝素钠注射液抗凝治疗。结果 医师采纳临床药师建议,患者病情好转,准予带药出院。结论 临床药师通过解读血宏基因组二代测序检测结果,同时结合患者病情,协助医师为该患者制定了个体化抗感染治疗及抗凝治疗方案,并进行用药监护,确保了患者用药的安全有效。     

转化缺陷的R6菌株经黏膜免疫小鼠可抵抗肺炎链球菌有毒株感染

摘要：目的：研制一种无转化能力的肺炎链球菌（S.pn）减毒株R6ΔcomE,评价其作为S.pn活菌疫苗的保护效果。 方法：构建comE基因缺陷的R6ΔcomE株,评价R6、R6ΔcomE株的转化能力及其毒力;用R6、R6ΔcomE株分别对BALB/c小鼠进行黏膜免疫,用ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体效价和脾细胞上清中IFN-γ、IL-4及IL-17A水平;用D39株经鼻腔黏膜感染免疫小鼠,观察生存时间和生存率。 结果：成功构建comE缺陷的R6ΔcomE株。体外转化实验中R6株转化菌量中位数为1 970 CFU/mL,体内转化实验中每只小鼠34 CFU,体内外实验中R6ΔcomE株转化菌量均为0;感染1×10⁸ CFU D39株的小鼠于3 d内全部死亡,而感染相同剂量R6、R6ΔcomE株的小鼠均存活＞21 d,且均于感染后72 h内清除细菌。R6、R6ΔcomE株黏膜免疫小鼠后,血清抗体滴度的中位数（P₂₅,P₇₅）分别达1.0×10⁶（6.4×10⁵,1.8×10⁶）、1.2×10⁶（8.1×10⁵, 1.6×10⁶）,与相应阴性对照组比较差异有统计学意义（P均＜0.01）;与相应阴性对照组比较,R6、R6ΔcomE株免疫组IL-4、IL-17A均升高（P均＜0.01）,而IFN-γ水平差异无统计学意义（P＞0.05）。黏膜免疫R6、R6ΔcomE株的BALB/c小鼠可抵抗D39株感染,生存率分别为60%和70%。 结论: R6ΔcomE株毒力弱,无转化能力,可诱导对S.pn感染的免疫保护,是一株安全有潜力的S.pn减毒活菌疫苗。     

聚合酶链反应对酶联免疫吸附试验HBsAg阴性样本中病毒核酸的检测

乙型肝炎是HBV感染引起的全球性疾病,而我国是乙型肝炎的高度流行区。据调查统计,在我国人群（〉3岁）中HB-sAg携带率为9.09%,HBV流行率高达60%以上。发病例数约为50万[2],乙型肝炎的主要传播途径是临床输血传播,我国各级采供血机构对乙型肝炎的筛查检测为酶联免疫检测,但由于酶联免疫吸附法（ELLSA）检测＂窗口期＂的问题,标本检测漏检在所难免。     

外科药师参与结直肠肿瘤患者围手术期用药管理的药物经济学评价

目的对外科药师参与普外科结直肠肿瘤患者围手术期用药管理进行药物经济学评价,为进一步开展外科药学服务提供参考。方法选取某院普外科2018年10月～2020年9月109例行肿瘤切除手术的结直肠肿瘤患者(按时间顺序分为对照组52例和干预组57例),对比外科药师干预前后,两组患者用药合理性、治疗总有效率、并发症发生率、成本-效果比,并进行敏感度分析。结果干预组治疗成本低于对照组(P<0.05),用药合理性高于对照组(P<0.05),治疗总有效率差异无统计学意义。干预组平均治疗成本为93 414.45元,总有效率为98.25%,C/E为95 078.32;对照组平均治疗成本为107 885.55元,总有效率为96.15%,C/E为112 205.46。说明在用药合理性提高的同时,干预组成本-效果比值低于对照组。结论外科药师参与普外科围手术期的药物治疗可提高合理用药水平,保障患者安全用药的同时节约医疗成本支出。     

无标签NT-proBNP重组蛋白的获得及多克隆抗体的制备

摘要：目的：通过原核表达,获得不带标签的NT-proBNP重组蛋白,并用其免疫新西兰大白兔,制备兔抗NT-proBNP抗体。 方法：从重组菌pET-32a(+)-NT-proBNP提取重组质粒,通过PCR扩增出目的DNA片段,插入pCold TF载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白。经镍柱亲和纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、镍柱亲和纯化,制备不带标签的纯蛋白质,并用临床商品化试剂盒验证其抗原性。用该蛋白质免疫新西兰大白兔制备抗体,western blot鉴定其特异性。 结果：成功获得高纯度的不带标签的NT-proBNP蛋白,该蛋白质能被商品化的试剂盒识别。用该蛋白质免疫新西兰大白兔成功制备出高效价高特异的抗体。 结论：成功制备高纯度的无标签NT-proBNP蛋白及其多克隆抗体,为NT-proBNP在临床上的广泛应用奠定了基础。     

人附睾蛋白4化学发光定量测定法的建立与评价

目的建立人附睾蛋白4(HE4)的化学发光定量检测方法,并进行方法学评价。方法血清中HE4与包被抗HE4单克隆抗体的微磁珠和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗HE4单克隆抗体反应形成双抗体夹心结构,HRP可催化发光底物液(含鲁米诺-H2O2-增强剂)产生大量光信号,根据光信号的量计算血清中HE4的浓度。依据国家体外诊断试剂性能评价指南性文件和美国临床和实验室标准化协会(CLSI)指南性文件,对本方法进行系统评价。结果建立的方法空白限(LoB)为1.014pmol/L、检测限(LoD)为5.252 pmol/L、定量检测限(LoQ)为10.568 pmol/L;甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)≤400 IU/mL、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)≤1 777μg/L、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)125≤3 500 U/mL、CA19-9≤3 500U/mL对本方法无明显交叉反应;线性范围为20~1 700 pmol/L;在100 000 pmol/L时未出现明显钩状(Hook)效应;批内变异系数(CV)为1.5%~3.6%;日间CV为3.8%~6.4%;回收率为98.36%~99.14%;血红蛋白≤4.8 g/L、胆红素≤1 077.5μmol/L、乳糜微粒≤6 000浊度、生物素≤50μg/L、类风湿因子≤1 000 U/L对测定结果无明显影响;37℃保存7 d后相对偏差为-6.63%~10.23%;建立的方法(Y)与Fujirebio公司的ELISA试剂(X)进行方法学比对,相关曲线为Y=1.023X-12.280,r=0.989 7(P0.01)。结论本研究建立的HE4磁微粒化学发光免疫测定法各项性能符合临床实验室需求,为卵巢癌的辅助诊断提供了有效工具。     

临床药师参与1例利奈唑胺引发的周围神经炎患者的药学实践

临床药师参与1例利奈唑胺致周围神经炎不良反应的分析和监护,以期引起临床重视,减少严重不良反应发生。临床药师根据药物引发周围神经炎的时间相关性和药物与不良反应因果关系的判断准则,建议临床停用利奈唑胺,患者周围神经炎好转。临床药师积极参与临床治疗实践,可保障患者用药安全,促进临床合理用药。