胰腺癌患者外周血CD4+T亚群细胞因子及转录因子的表达及其临床意义

目的: 探讨胰腺癌患者外周血中CD4⁺T亚群细胞因子及转录因子表达。方法: 收集27例胰腺癌患者和30例健康者外周血标本,ELISA法检测两组血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-17、转化生长因子(TGF)-β及IL-10含量。实时荧光定量PCR检测两组血清中相关转录因子T细胞表达的T盒(T-box expressed in T cells,T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-binding factor 3, Gata-3)、视黄酸相关的孤儿受体γt (RAR-related orphan receptor gamma t, RORγt)及叉头框蛋白p3(Forkhead box protein P3, Foxp3)表达。结果： 与对照组相比,胰腺癌组外周血中细胞因子IFN-γ、IL-2水平明显降低,T-bet mRNA表达下降(P均<0.05);IL-4、IL-17、TGF-β及IL-10水平明显升高,Gata-3 mRNA、RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达明显升高(P均<0.05)。结论： 胰腺癌患者外周血中Th1类细胞因子及转录因子表达下降,Th2、Th17和Tregs类细胞因子及转录因子表达升高;Th2、Th17及Treg细胞可能协同促进胰腺肿瘤疾病的进展。     

SNL大鼠CD4+ T细胞脊髓浸润及其分子机制研究

目的:研究脊神经结扎后,外周CD4+ T细胞迁移浸润至腰段脊髓及其分子调控机制.方法:选择健康成年清洁级雄性SD大鼠,随机分为脊神经结扎组(Tx 组)、假冒手术组(S组)、对照组(C组),用up-down方法测定50％机械缩足阈值(50％ MWT),并用FACS检测腰段脊髓CD4+ T细胞的浸润情况,RT-qPCR法测定脊髓中趋化因子CCL2、CCL5、CXCL10mRNA的表达水平,ELISA检测血清中相关细胞因子的含量.结果:与S组、C组相比,术后3 d,Tx组50％ MWT明显降低(P＜0.01),至术后14 d达最低值,S组与C组在各时间点均无明显差异(P＞0.05);术后7d,Tx组腰段脊髓浸润的CD4+ T细胞明显增加(P＜0.01),同时伴有CCL2、CCL5mRNA 的表达增加(P＜0.05);术后14 d,Tx组浸润的CD4+T 细胞较术后7d减少,虽高于S组、C组,但无统计学意义,上述各趋化因子的表达水平也无明显差异;术后7d、14 d,血清中各细胞因子的含量三组均无统计学意义.结论:神经损伤后,脊髓中高表达的趋化因子促进了外周CD4+ T细胞的中枢浸润,脊髓浸润的CD4+T 细胞可能与神经病理性疼痛的维持有关.     

Act1作用的分子机制及其与免疫损伤性疾病关系的研究进展

T细胞和B细胞介导的免疫应答在自身免疫损伤性疾病的发生与调控中起着至关重要的作用.NF-kappa B Activator 1(Act1)是近年来新发现的NF-κB活化因子,参与IL-17、IL-25信号传导的正向调节与CD40L、BAFF信号通路的负向调节,与Th17细胞和B细胞介导的免疫损伤性疾病以及肿瘤的发生发展有着密切的关系.Act1在IL-17信号和CD40L-BAFF通路中如此截然相反的作用可能归因于其不同的结构域.Act1这种精巧的调节机制也许有助于机体对病原体的防御与自身耐受平衡的调节.     

Aetl作用的分子机制及其与免疫损伤性疾病关系的研究进展

T细胞和B细胞介导的免疫应答在A身免疫损伤性疾病的发生与调控中起着至关重要的作用。NF—kappaBActivator1（Actl）是近年来新发现的NF—KB活化因子,参与IL-17、IL-25信号传导的正向调节与CD40L、BAFF信号通路的负向调节,与Thl7细胞和B细胞介导的免疫损伤性疾病以及肿瘤的发生发展有着密切的关系。Actl在IL-17信号和CIMOL—BAFF通路中如此截然相反的作用可能归因于其不同的结构域。Actl这种精巧的调节机制也许有助于机体对病原体的防御与自身耐受平衡的调节。     

多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性与转座子及插入序列遗传标记研究

目的探讨多耐药鲍氏不动杆菌耐药性与转座子、插入序列等遗传原件之间的关系。方法 K-B法进行药物敏感试验,PCR进行转座子、插入序列遗传标记检测,并测序。结果临床分离的鲍氏不动杆菌对12种常见抗菌药物耐药率分别为头孢噻肟78.9%、头孢他啶63.1%、头孢吡肟78.9%、头孢西丁100.0%、亚胺培南73.7%、美罗培南73.7%、氨苄西林/舒巴坦78.9%、阿莫西林/克拉维酸78.9%、阿米卡星52.6%、庆大霉素57.8%、环丙沙星78.9%、四环素78.9%;转座子tnp513和插入序列遗传标记ISaba1、IS26检出率分别为47.4%、78.9%、47.4%。结论多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药性与转座子和插入序列遗传标记有一定的关系。     

多药耐药肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究

目的探讨多耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KPN)β-内酰胺酶基因存在状况及其膜孔蛋白编码基因ompK36在其耐药中的作用。方法应用PCR检测20种β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白编码基因ompK36,并用MEGA4.1对ompK36进行分子进化分析。结果 15株MDR-KPN共检出TEM、SHV、CTX-M-1群、LAP、KPC、DHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为66.7%、60.0%、6.7%、13.3%、13.3%、20.0%;而膜孔蛋白编码基因ompK36均检测到,经测序比对均存在突变。结论 15株MDR-KPN耐β-内酰胺类药物至少与产β-内酰胺酶和同时伴有膜孔蛋白ompK36突变相关。     

脊神经结扎模型大鼠双足痛阈变化与脊髓促炎因子表达的相关性

目的:分析脊神经结扎模型(SNL)大鼠脊髓IL-1β、IL-6 mRNA的表达与双足痛觉敏化和异常疼痛发生发展的关系.方法:选择健康成年清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为脊神经结扎组、假手术组、对照组,用up-down方法测定50%机械缩足反应阈值(mechanical paw withdrawal threshold...     

骨性关节炎关节软骨中线粒体酶表达的变化

目的：探讨正常软骨与骨性关节炎软骨中线粒体几种关键酶的表达差异。方法：收集9例骨性关节炎患者及12例正常人的软骨,HE 染色观察软骨的病理学表现。利用实时荧光定量聚合酶链式反应（RQ-PCR）和蛋白质印迹法检测两组软骨中 NADH 氧化还原酶辅酶1（NADH dehydrogenase ubiquinone 1 alpha subcomplex 1,NDUFA1）、琥珀酸脱氢酶复合体铁硫亚基（succinate dehydrogenase complex subunit B,SDHB）、细胞色素 b （cytochrome b,Cytb）、细胞色素 C 氧化酶（cytochrome c oxidase,COX）、V 型 H ＋ATP 酶（vacuolar-type H ＋-ATPase,V-ATPase H ）、苹果酸脱氢酶（cy-tosolic malate dehydrogenase,MDH）、短链羟烷基辅酶 A 脱氢酶（hydroxyacyl-coenzyme A dehydrogenase,HADHSC）的表达情况。结果：骨性关节炎软骨中滑膜细胞增生,淋巴细胞浸润,严重者甚至出现斑片状钙化和纤维化。骨性关节炎软骨中 NDUFA1与 COX 表达比正常软骨明显升高,差异有统计学意义（P ＜0．05）;SDHB、Cytb、V-ATPase H 表达比正常软骨明显下降,差异有统计学意义（P ＜0．05）;MDH 与 HADHSC 在两组中表达无明显差异。结论：线粒体关键酶的变化可能在骨性关节炎的发病中起重要作用。     

IL-17对小鼠心肌成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ胶原表达的作用研究

目的:探讨IL-17对小鼠心肌成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ胶原蛋白表达的影响及其分子机制。方法:从7～14 d BALB/c小鼠心脏中分离培养心肌成纤维细胞,分别用100 ng/mL IL-17刺激0、24、48、72 h,PCR检测其表面IL-17受体、免疫荧光检测I/III型胶原表达水平,Western blot法检测PKCβ、Erk1/2、NF-κB磷酸化水平。结果:心肌成纤维细胞表面有IL-17RA/C的表达;IL-17刺激心肌成纤维细胞24 h后Ⅰ/Ⅲ型胶原表达明显增加,Western blot显示IL-17刺激心肌成纤维细胞后分别在30、45、45 min导致PKCβ、Erk1/2、NF-κB的磷酸化。结论:IL-17可以诱导心肌成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ型胶原的表达,其分子机制可能是PKCβ-ERK1/2-NF-кB依赖性的。     

Act1作用的分子机制及其与免疫损伤性疾病关系的研究进展

T and B cell-mediated immune responses play a critical role in the control and modulation of autoimmune diseases. NF-kappa B Activator 1 (Act1) , also called (connection to Iκ B kinase and stress-activated protein kinases,CIKS), is a recently identified molecule, which activates NF-κB . Recent studies have shown that Act1 is a key positive regulator of IL-17 signaling pathway ,and an important negative regulator of B cell-mediated humeral immune responses through its function in CD40L and BAFF signaling. Act1 is critical for TH17 and B cell mediated autoimmune and inflammatory responses. Moreover, Actl may play important roles in ontogenesis. Such seemingly opposite functions of Act1 in CD40-BAFFR and IL-17R signaling are orchestrated by different domains in Act1. Such delicate regulatory mechanisms may provide a common vehicle to promote balance between host defense to pathogens and tolerance to self.