白纹伊蚊和埃及伊蚊defensin A基因克隆及序列分析

应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensinA基因 ,并与文献报道的defensinA的5个型的cDNA序列进行同源性比较 ,发现此两序列中存在内元 ;从埃及伊蚊体内扩增的片段为蚊虫defen sinAl的前体AaDefAl;从白纹伊蚊体内扩增的片段为defensinA的 1个新型 ,命名为DefA6。     

炭疽芽孢杆菌芽孢萌发研究进展

芽孢是炭疽芽孢杆菌为应对不适的外界环境而形成的一种生命形式,休眠期的芽孢可以通过萌发恢复生长成为繁殖体。萌发过程作为关键步骤,可以由营养萌发剂和一些非营养类物质或者在其他情况下触发。在萌发过程中,萌发剂通过与存在于芽孢内膜上的萌发剂受体结合来触发芽孢核内各种阳离子的释放以及芽孢核对水的吸收。在芽孢皮层的肽聚糖被酶水解后,芽孢核逐渐完全水合化,开始进行新陈代谢以及大分子的合成活动,逐渐成长为一个新的营养细胞。该文将从萌发受体、芽孢皮层水解酶功能等方面对炭疽菌芽孢萌发机制进行阐述。     

埃及伊蚊抗凝血因子Xa基因片段的克隆测序

目的：探讨我国登革热的重要媒介蚊种埃及伊蚊唾液中的抗凝血因子Xa基因。方法：用兼并引物PCR方法从我国的埃及伊蚊基因组DNA扩增抗凝血因子Xa基因片段,克隆入测序T载体进行测序。结果：扩增出抗凝血因子Xa基因片段长度约300bp,测序后发现与报道的埃及伊蚊的cDNA基因相应序列多了一段63bp内含子,并有几个碱基和氨基酸序列变化。结论：我国海南岛的埃及伊蚊抗凝血因子Xa基因有一定差异,可能对应的是一个新的基因型。     

实验感染登革Ⅱ型病毒的2种蚊媒RT-PCR检测defensin A结果分析

白纹伊蚊和埃及伊蚊在经口大剂量感染登革Ⅱ型病毒1天、2天、3天和11天后,用RT-PCR方法都未能在其体内检测到defensin A的mRNA的表达,提示登革Ⅱ型病毒感染其有效媒介宿主白纹伊蚊和埃及伊蚊后并不诱导defensin A的表达,或者表达量极低用RT-PCR方法不能检测到.     

炭疽芽孢杆菌S-层蛋白功能研究进展

炭疽芽孢杆菌是人畜共患病炭疽的病原菌。目前,对炭疽杆菌2个毒力大质粒（编码主要毒力基因的pXO1与编码合成荚膜基因的pXO2）的研究比较深入;炭疽杆菌细胞壁与荚膜间还存在一种蛋白性质的类晶体（paracrystalline）结构：S-层（surface-layer,表层）结构。炭疽杆菌的S-层蛋白主要为表面排列蛋白（surface array pro-tein,Sap）和胞外抗原1（extracellular antigen 1,EA1）,此外,在炭疽杆菌中还存在其他一些与S-层相关的蛋白,了解这些蛋白的相互作用及免疫机制对深入认识炭疽杆菌的致病机制具有重要意义。本文将就近年来关于炭疽杆菌S-层蛋白成分、与细胞壁的连接、S-层基因的调控、致病性及其与宿主免疫机制的关系等方面的研究进展做一简要综述。     

白纹伊蚊和埃及伊蚊防御素(defensin)成熟肽基因克隆及结构推测

应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensin成熟肽基因并对其分子生物学特性进行分析 ,发现埃及伊蚊 (BoraBora株、海口株 )、白纹伊蚊 (成都株、宜兴株、广州株 )推导的氨基酸序列与埃及伊蚊defensinA相同 ;通过Chou Fasman预测法对defensinA成熟肽的二级结构进行预测 ,可以看出在defensin成熟肽氨基酸序列的 15～ 2 3位有一个α 螺旋 ,35～ 39位有一个 β 折叠 ,32～ 34位有一个转角 ;通过同源性比较推测蚊虫defnsinA的三级结构     

炭疽芽孢杆菌蛋白质组学的研究进展

蛋白质组学是继基因组学后的一门新兴学科,可从整体水平上探究炭疽芽孢杆菌的致病机制和早期发病的标志物,在炭疽预防、诊断和治疗中具有重要的指导作用。本文综述了近年来蛋白质组学在炭疽芽孢杆菌中的应用进展。     

弗氏志贺菌ΔlysA突变株的构建及SILAC技术的应用尝试

目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型测评和毒力评价,并利用双向电泳技术比较二者在全菌蛋白表达谱上的差异,最后将突变株分别在含有12C6-赖氨酸和13C6-赖氨酸的培养基中培养,根据双向电泳胶图取对应蛋白点进行胶内酶切及MALDI-TOF/TOF分析。结果成功构建了301 lysA基因缺失突变株,蛋白鉴定结果显示所取对应蛋白点为同一蛋白,在质谱图上轻重同位素峰位移为6 amu。结论本研究所构建的赖氨酸营养缺陷型突变株适合进行SILAC分析。