miRNA慢病毒表达载体的构建及其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中的稳定表达

目的:构建miRNA的慢病毒表达载体,使其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中稳定表达。方法:将该干扰片段构建入慢病毒载体(pL KD-Ubc-eG FP-U6-shRNA)的U6启动子下游,该载体可以实现在干扰小片段RNA的同时表达绿色荧光蛋白EGFP基因,便于观察载体工作状态。通过脂质体转染法转染原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞,观察转染的原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞的形态及表达情况。结果:针对筛选的miRNA构建的慢病毒载体,经过DNA测序结果和琼脂糖凝胶电泳鉴定成功构建了筛选的miRNA的慢病毒表达载体,重组质粒转染原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞,经24 h后在荧光倒置显微镜下可以观察到部分细胞带有绿色荧光,筛选的miRNA构建的慢病毒载体在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中稳定表达。结论:筛选的miRNA的慢病毒表达载体构建成功,并稳定的转染到原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中,为miRNA对神经细胞存活功能的研究提供了平台。     

基于TOPSIS法,RSR法和线性插值法综合评价全国儿童保健工作质量

目的 比较三种评价方法在儿童保健工作中的应用价值,了解2014年全国儿童保健工作质量与开展情况。方法 采用TOPSIS法、RSR法和线性插值法对全国各地区儿童保健工作进行综合评价,应用SPSS 17.0对排序结果进行Spearman相关性分析和差异性的秩和检验。结果 3种评价方法的评价结果各异,为保证结果的客观性,对3种方法综合排序,排序前三位的分别是江苏、上海和陕西,后三位的分别是青海、新疆和西藏。经Spearman相关分析,TOPSIS和线性插值法排序结果的一致性最好(r=0.969,P=0.000),其次是TOPSIS法和RSR法(r=0.883,P=0.000),RSR法和线性插值法(r=0.795,P=0.000)。结论 3种评价方法的排序结果具有较强的相关性,多种综合方法联合评价,其排序结果更能客观、准确、全面地反映全国各省市儿童保健情况。     

基于TOPSIS法的我国妇幼保健工作质量评价

目的 对我国各省市妇幼保健服务质量进行评价，了解现状，为进一步提升妇幼健康服务提供参考。 方法 结合权威资料选取可以体现妇幼保健水平的相关合理指标，利用熵权TOPSIS法综合评价2018年全国各省市、自治区妇幼保健工作质量。 结果 依据计算所得的Ci值大小对各省市妇幼保健服务质量进行排序，前三位是上海、北京、吉林，末三位是云南、广西、西藏。 结论 我国不同省市、区域间妇幼保健服务质量仍存在较大差异，国家应加强财政投入、精准施策，重点强化中西部基层妇幼保健机构专业人才培养，提升其服务能力，以期不同区域间的妇幼群体均能享受公平、可及且优质的妇幼卫生服务。     

Flag-p107真核表达载体的构建及其在ECA109细胞表达及鉴定

目的 构建N端含flag标签的p107的真核表达载体,及其在EC109细胞表达的鉴定.方法 设计引物在p107蛋白N端增加flag标签,通过PCR扩增获得3×flag-p107 cDNA片段,将此片段插入真核表达质粒CMV-MCS-SV40-Neomycin中;再与质粒CMV-MCS-SV40-Neomycin连接,将所得的融合基因进行PCR、酶切及DNA测序验证正确后,利用电转染将其转染至ECA109细胞中;利用Western-Blotting检测融合蛋白CMV-MCS-3flag-p107-SV40-Neomycin的表达情况.结果 重组真核表达载体构建正确,该重组质粒能在ECA109细胞中表达.结论 成功构建真核表达载体CMV-MCS-3flag-p107-SV40-Neomycin并建立了其在ECA109细胞的表达.