肥胖与PPARγ及脂肪因子的研究进展

肥胖，即脂肪细胞数量的过度增加和体积的过度增大，并以体脂的形式储存过多摄入的能量，它是糖尿病、冠心病、高血压、高脂血症等许多严重疾病的共同危险因素。肥胖的发生除与不良生活习惯有关外，遗传因素和胰岛素抵抗是导致肥胖的最主要原因。过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）是脂肪细胞基因表达和胰岛素细胞间信号传递的主要调节者，参与脂肪细胞分化和脂代谢调节，与肥胖密切相关。因此，涉及脂肪细胞的过度增殖和分化而造成生成过多脂肪细胞的分子机制，以及脂肪组织分泌的多种细胞因子在机体能量、糖、脂代谢和免疫反应等方面所发挥的调节作用，一直是肥胖和糖尿病研究领域十分关注的问题。     

改良型序列特异性引物PCR用于脂联素基因单核苷酸多态性的检测

目的运用序列特异性引物PCR技术（SSP-PCR）研究基因单核苷酸多态性。方法根据GenBank中人脂联素基因（APM1）序列及SNP信息,利用Primer5.0设计引物,通过PCR技术检测APM1的SNPs。结果建立并优化了序列特异性引物PCR（SSP-PCR）技术,并可快速、直观、准确地进行基因分型。结论改良的SSP-PCR技术是一种特异性更高、操作简便的SNP检测方法。     

浅谈开设生物化学开放性及设计性实验教学的体会

生物化学既是21世纪的前沿学科,又是重要的医学基础学科。设计性和开放性实验为实现学以致用,培养知识、素质、能力三位一体的新型医学人才提供了一个施展的平台,它有助于培养学生的创新意识和科研技能。实践证明,开展设计性和开放性实验有助于提高学生的综合素质,能够很好地培养学生的综合能力和科学的探索精神,更好地培养医学生的实践技能,并适应社会发展的需要。     

利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体

目的：在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12（hMMP-12）转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法：首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因．产物亚克隆到pGEM—T载体，测序后获得pGEM—T-hMMP-12，然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR，再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒，构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJCl3-SR．hMMP-12，最后pJCl3-SR—hMMP-12表达载体线性化，显微注射家兔受精卵制备转基因兔，并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果：（1）通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实，hMMP-12成功克隆到所需表达载体中；（2）转基因后获得仔兔36只，以PCR检测结果计算，转基因总效率为1．4％-3．4％，整合率为20％-50％；以Southern Blot检测结果计算，转基因总效率为0．5％．2．2％，整合率为13％～17％。结论：转基图表达载体的成功构建，为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。     

代谢综合征大鼠模型的实验研究

目的 通过2 种不同饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导建立代谢综合征(MS)大鼠模型,为该疾病的研究探索理想的建模方法.方法 90 只大鼠随机分为3 组:MS模型正常盐组(NS)、MS模型高盐组(HS)和对照组(NC).NS组大鼠饲喂高脂高糖饲料,HS组大鼠饲喂高脂高糖高盐饲料,NC组大鼠饲喂基础饲料.10周末,NS组和HS组选择腹围达标的大鼠,给予一次性腹腔注射 STZ 25 mg/kg.分别在不同时间点测定各组大鼠体重、腹围、血压、空腹血糖及血脂等指标.结果 NS组和HS组大鼠体重、腹围、空腹血糖与NC组相比均升高,差异有统计学意义(P＜0.05～0.01).12周末时, HS组大鼠血糖及腹围较NS组增高,差异有统计学意义(P＜0.05);12周末时,HS组大鼠高密度脂蛋白胆固醇较NS组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).NS组成模率为40.0%,HS组成模率为66.7%,2 组成模率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用高脂高糖饮食或高脂高糖高盐饮食诱导加腹腔注射小剂量STZ的方法可在短时间内成功复制稳定的MS大鼠模型,且HS组成模率较NS组高.     

新疆维吾尔族肥胖患者网膜脂肪组织脂联素mRNA表达降低

脂肪组织是功能活跃的内分泌器官,其所分泌的脂联素(adiponeetin,APN)在血脂、糖、脂代谢、抗动脉粥样硬化中发挥有益的作用[1].本研究选取肥胖与2型糖尿病发病率较高的维吾尔族人群为研究对象,利用半定量RT-PCR技术检测不同部位脂肪组织脂联素mRNA表达水平,并探讨其影响因素.     

Survivin、CyclinD1基因在哈萨克族食管癌中表达及其意义的研究

目的：研究Survivin和CyclinD1基因在哈萨克族食管癌组织中的表达。方法：采用逆转录多聚酶链反应技术检测Survivin和CyclinD1基因在20例食管癌组织及其相应癌旁组织中的表达。结果：20例食管癌组织中Survivin基因的总阳性率为50%,相应癌旁组织中Survivin基因的总阳性率为20%,且其表达量均低于其对应的癌组织。在20例食管癌组织中有10例表达CyclinD1基因,阳性率为50%,而在20例癌旁组织中有13例表达,阳性率为65%,且癌组织的表达低于其对应的癌旁组织。结论：提示Survivin基因的异常表达引起的细胞凋亡抑制在哈萨克族食管癌的发生、发展过程中起到一定的作用。CyclinD1在哈萨克族食管癌中的作用与其在其它民族中的作用可能有所不同。     

血管紧张素转换酶基因多态性与新疆地区高血压病相关性研究

目的：了解血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与新疆地区原发性高血压的易感相关性。方法：应用聚合酶链反应(PCR)对78例新疆地区原发性高血压患者与72例正常血压对照者ACE基因第16内含子插入／缺失多态性进行鉴定。结果：在新疆地区原发性高血压患者中．ACE基因缺失纯合基因型(DD)和缺失(D)等位基因频率均明显高于正常血压者(P＜0．05及P＜0．01)。结论：ACE基因缺失纯合型可能是新疆地区原发性高血压遗传易感因素之一。     

脂联素在代谢综合征大鼠网膜脂肪组织mRNA表达水平的研究

目的探讨脂联素(adiponectin,APN)在代谢综合征(metabolic syndrome,MS)发病机制中的可能作用及其与MS各组分的关系。方法 90只大鼠随机分成3组:MS正常盐模型组(NS组)、MS高盐模型组(HS组)、正常对照组(NC组),NS组大鼠给予高脂高糖饲料喂养,HS组大鼠给予高脂高糖高盐饲料喂养,NC组大鼠以基础饲料喂养。饲养过程中,每隔2w测量各组大鼠的体长、体质量、血脂、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)等指标。通过2种不同的饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导,成功建立代谢综合征大鼠模型后,MS组(NS组和HS组)和NC组大鼠运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平。结果 MS组大鼠网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平低于NC组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.05)。在MS组大鼠中,NS组大鼠网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平与HS组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关分析显示:网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平与FPG呈负相关(r=-0.334,P<0.05),与体长呈负相关(r=-0.387,P<0.05),与体质量呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论 MS大鼠网膜脂肪组织APN mR-NA的表达水平可能与MS的发病呈负相关。FPG、体质量、体长可能对MS大鼠网膜脂肪组织APN的mRNA表达水平存在负反馈作用。     

维吾尔族肥胖患者脂联素表达与胰岛素抵抗的关系

目的探讨维吾尔族肥胖患者腹部网膜和皮下脂肪组织脂联素的表达水平及其与血清脂联素、空腹血糖、血脂和胰岛素敏感性的关系。方法半定量RT-PCR方法检测41例肥胖和20例非肥胖研究对象腹部网膜和皮下脂肪组织脂联素mRNA的表达水平,ELISA法测血清脂联素,同时检测临床生化参数及胰岛素水平,并计算BMI、WHR和HOMA-IR。结果①网膜脂肪组织脂联素mRNA表达水平肥胖组显著低于非肥胖组,血清脂联素水平在两组之间无显著性差异;②肥胖组DBP和SBP均显著高于非肥胖组,HDL-C低于非肥胖组;③肥胖组网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量与血清脂联素显著正相关,与BMI显著负相关,皮下脂肪组织脂联素mRNA表达量与BMI显著负相关。血清脂联素与BMI、TC、LDL-C显著负相关。结论维吾尔族肥胖患者脂肪组织脂联素mRNA表达量对血清脂联素浓度有影响,脂联素可能在维吾尔人腹型肥胖相关的代谢紊乱性疾病中起一定作用。