骨髓间充质干细胞治疗大鼠重症急性胰腺炎的实验研究

目的:研究骨髓间充质干细胞(bmMSCs)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型治疗中的应用。方法:经胆管逆行注射牛磺胆酸钠诱导形成大鼠SAP模型。将大鼠随机分为5组:对照组、SAP组、SAP+bmMSCs(尾静脉)组、SAP+bmMSCs(腹腔)组和SAP+bmMSCs(尾静脉+腹腔)组,每组18只。在bmMSCs注射各组,诱导SAP后3 h分别通过尾静脉、腹膜内和尾静脉加腹膜内途径注射用DAPI标记的bmMSCs。分别在实验开始后的第24、48、72 h分别处死6只大鼠,并收集胰腺组织和血液,测定其中血清抗炎细胞因子(IL-10)和炎症细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-6)的水平。光学显微镜下观察胰腺的病理变化,同时在荧光显微镜下检测DAPI标记的体内bmMSCs分布。结果:与对照组相比,SAP组大鼠的胰腺组织有明显的出血、水肿、炎症和坏死。与SAP组相比,3种方式bmMSCs移植组胰腺的炎症、水肿、出血和坏死均明显减少(P0.05)。在3种方式bmMSCs移植组中,bmMSCs显著降低促炎细胞因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的水平,但是增加了SAP大鼠的抗炎细胞因子(IL-10)水平(P0.05)。在SAP+bmMSCs(尾静脉+腹腔)移植组中,TNF-α、IL-6和IL-1β水平进一步降低,IL-10水平进一步升高(P0.05);同时,在该组中观察到更多的bmMSCs存在。结论:与腹腔注射法相比,通过尾静脉+腹腔注射或尾静脉注射bmMSCs,可以观察到更多的bmMSCs存在于胰腺组织中,大鼠恢复的更好。     

不同方式移植骨髓间充质 干细胞治疗急性重症胰腺炎大鼠的疗效对比

目的探索骨髓间充质干细胞(bMSCs)治疗大鼠急性重症胰腺炎(SAP)模型的高效移植方式。方法将大鼠随机分为对照组(control)、急性重症胰腺炎组(SAP)(胰胆管内逆行注射5%硫磺胆酸钠)。SAP模型制作成功6 h后,分为尾静脉骨髓间充质干细胞移植组(tail vein)、腹腔注射移植组(intraperitoneal)和尾静脉-腹腔注射联合移植组(tail vein+intraperitoneal),每组18只。在移植后第24、48和72 h分别安乐死6只大鼠,收集胰腺组织及血清,使用ELISA试剂盒测定血清中抗炎因子IL-10及炎性因子IL-1β、TNF-α和IL-6的水平;HE染色后光学显微镜下观察胰腺组织病理和第72 h后各组大鼠小肠黏膜及肺泡组织病理改变;冰冻切片在荧光显微镜下观察DAPI标记的bMSCs在胰腺组织的分布。结果 SAP组胰腺组织有大量出血、水肿、炎性反应及坏死;与对照组相比, 3种不同方式bMSCs移植组胰腺组织的出血、水肿、炎性反应及坏死明显减少(P0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6水平显著降低,IL-10水平显著升高(P0.05);尾静脉+腹腔联合移植组较单纯尾静脉或腹腔移植组胰腺组织的出血、水肿、炎性反应及坏死进一步减少(P0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6水平进一步降低(P0.05),IL-10的水平进一步升高(P0.05);DAPI标记的bMSCs在移植组的胰腺组织内均有分布,且在尾静脉+腹腔联合移植组观察到更多的荧光分布;72 h后可见移植组小肠黏膜及肺泡组织完整性较SAP组明显好转,中性粒细胞浸润及出血情况较SAP组明显减轻,相比于腹腔和单纯尾静脉移植,联合移植组情况进一步改善。结论在大鼠SAP模型中,bMSCs通过尾静脉+腹腔联合移植能显著抑制炎性反应,减少SAP相关性胰腺、小肠黏膜及肺损伤,其效果显著优于单纯尾静脉移植和腹腔注射移植。     

乳腺癌组织发生的同源性与形态分化的多向性

乳腺是汗腺的变异，来源于胚胎腹面外胚层的原始表皮。在胚胎从第6周至胚龄第9月的发育过程中，其胸区乳腺始基的原始表皮增生成芽，向表皮下间叶内延伸，逐步演变为分叶的分支管道系统。虽然，乳腺的来源与发育似乎是一个不大复杂的系统，但乳腺癌的类型却相当复杂。当今认为癌是一种干细胞疾病。为了正确理解乳腺癌形态复杂性     

载脂蛋白E基因缺失促进不成熟髓系细胞的增殖和向单核细胞的极化

目的 研究载脂蛋白E（ApoE）对小鼠骨髓来源的CD11b⁺Gr-1⁺髓系细胞增殖和分化的影响,阐述ApoE基因敲除小鼠（ApoE^－/－）致动脉粥样硬化敏感的炎症相关新机制。方法 6～8周龄的ApoE^－/－小鼠和C57/B6野生型小鼠,采用流式细胞术分析骨髓、脾脏和外周血中CD11b⁺Gr-1⁺ 髓系细胞、CD11b⁺Gr-1^-单核细胞和CD11b^-Gr-1⁺粒细胞的百分比的变化。应用定量RT-PCR和免疫荧光染色,鉴定ApoE基因和蛋白在CD11b⁺Gr-1⁺ 髓系细胞的表达。从骨髓分选CD11b⁺Gr-1⁺ 髓系细胞,体外培养24 h,流式细胞术分析ApoE基因缺失对髓系细胞周期改变的作用。结果 （1）ApoE基因缺失显著增加ApoE^－/－小鼠外周血CD11b⁺Gr-1⁺ 髓系细胞和CD11b⁺Gr-1^-单核细胞;（2）ApoE基因缺失促进ApoE^－/－小鼠脾脏和骨髓中CD11b⁺Gr-1⁺ 不成熟髓系细胞的增殖;（3）定量RT-PCR和免疫荧光染色证实ApoE在CD11b⁺Gr-1⁺髓系细胞有较高水平的表达;（4）ApoE基因缺失可以促进CD11b⁺Gr-1⁺细胞周期自G₁期进入S期。结论 ApoE基因缺失显著增加ApoE^－/－小鼠脾脏和骨髓中CD11b⁺Gr-1⁺ 不成熟髓系细胞的增殖、巨噬细胞分化和动员。ApoE基因缺失促进CD11b⁺Gr-1⁺ 髓系细胞增殖与其促进细胞周期进入S期有关。