视网膜母细胞瘤免疫细胞特征及关键基因的识别

目的 使用生物信息学手段探究视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)潜在肿瘤标志物和免疫细胞特征.方法 对GEO数据库的3个基因表达数据集(GSE24673,GSE97508和GSE1108113)进行差异分析,Gene Ontology (GO)功能注释和Kyoto Encyclopedia of Gen...     

大鼠角膜缘新生血管微小RNA与血管内皮生长因子相关性分析

目的：研究微小RNA（MicroRNA）在大鼠角膜缘新生血管中的表达,分析其与血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）血管生成信号通路间的相关性,探讨MicroRNA在角膜缘新生血管中的作用。方法：采用缝线法建立SD大鼠角膜缘新生血管模型,选择LAN MicroRNA芯片,采用酶标记方法标记样品,将样品与芯片探针杂交,对表达谱芯片结果进行分析。结果：明显差异表达MicroRNA为16个,其中上调10个,下调6个。明显上调的MicroRNA有：miR-142、miR-146、miR-21、miR-223、miR-214、miR-199、miR-483、miR-322、miR-126 miR-1224;明显下调的有miR-30e、miR-101、miR-184、miR-200c、miR-200b、miR-204。其中与VEGF信号通路密切相关的有：miR-142、miR-146、miR-21、miR-223、miR-199、miR-322、miR-200、miR-30e、miR-204、miR-1224。通过检索,miR-142 miR-200和miR-322与VEGF相关基因重合最多。结论：miR-142 miR-200和miR-322在大鼠角膜缘新生血管模型中差异表达显著且与VEGF信号通路密切相关。     

miR-142通过上调AKT2的表达促进角膜新生血管形成

目的：研究microRNA142（miR-142）对角膜新生血管形成的影响及其相关机制。方法：实验设置空白对照组、阴性对照组、过表达miR-142组以及干扰miR-142组,分别利用miR-142模拟物（mimic）和抑制物（inhibitor）过表达和干扰miR-142;CCK-8增殖实验检测miR-142对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）增殖能力的影响;双荧光素酶报告基因验证AKT2是否为miR-142的直接靶基因;RT-PCR和Western blot实验检测miR-142对AKT2表达水平的影响。结果：CCK-8增殖实验结果显示空白对照组、阴性对照组和过表达miR-142组96 h的吸光度（absorbance,A）均值分别为872.21±44.20、842.16±49.54和1 407.91±16.58,差异具有统计学意义（F=102.8,P=0.000）。干扰miR-142后HUVECs增殖能力明显减弱（空白对照组=919.69±25.46,阴性对照组=856.76±36.22,干扰miR-142组=602.77±25.62;F=72.8,P=0.000）。双荧光素酶报告基因结果发现过表达miR-142后AKT2表达水平没有明显变化（对照组=0.36,过表达miR-142组=0.46,P=0.147）。RT-PCR结果显示过表达miR-142（0.408±0.046）后AKT2表达水平较阴性对照组（0.173±0.022）升高（P=0.018）,干扰miR-142组（0.16±0.02）较阴性对照组（0.362±0.068）明显降低（P=0.037）,差异均具有统计学意义。Western blot实验进一步验证了miR-142对AKT2基因的调控作用。进一步研究发现,shRNA干扰AKT2后miR-142促进HUVECs增殖的作用消失,对照组、过表达miR-142组、过表达miR-142+shRNA-AKT2组和shRNA-AKT2组的96 h吸光度值分别为981.80±75.40、1 357.81±47.56、806.39±49.70和921.59±40.38,差异具有统计学意义（F=40.97,P=0.000）。结论：miR-142通过上调AKT2的表达促进HUVECs增殖,从而促进角膜新生血管形成。     

GSTT1和GSTM1基因多态性与重庆地区汉族人群中原发性闭角型青光眼易感性的关系

目的 探讨中国汉族人群中谷胱甘肽硫转移酶M1(glutathione S-transferase M1,GSTM1)、谷胱甘肽硫转移酶T1(glutathione S-transferase T1,GSTT1)基因多态性与原发性闭角型青光眼易感性的关系.方法 收集211例汉族原发性闭角型青光眼患者(primary angle-closure glaucoma,PACG)以及422例健康志愿者的血液标本(对照组),并根据诊断标准将PACG组分为急性(acute primary angle-closure glaucoma,APACG)和慢性(chronic primary angle-closure glaucoma,CPACG),并采用多重等位基因特异聚合酶链反应(multiplex PCR)技术检测GSTT1和GSTM1基因多态性.结果 GSTT1缺失基因型在PACG组中分布频率为53.1％,在对照组中的分布频率为53.8％,2组间无统计学差异(x2=0.028 6,P=0.866);将PACG组分为APACG组和CPACG组后,GSTT1缺失基因型的分布频率分别为46.3％和55.4％,APACG组与对照组相比,无统计学差异(x2 =0.126 7,P=0.722),CPACG组与对照组相比,差异也无统计学意义(x2=0.036 2,P=0.849).在PACG组中GSTM1的缺失基因型的频率为58.3％,对照组中GSTM1缺失基因型的频率为56.3％,2组间的差异无统计学意义(x2 =0.206 3,P=0.650).GSTM1在APACG组以及CPACG组中的分布频率分别为61.1％及56.3％,APACG组与对照组相比,其差异无统计学意义(x2=0.027 9,P=0.867);CPACG组与对照组相比,其差异也无统计学意义(x2 =0.006 4,P=0.936).此外,将GSTT1和GSTM1基因型联合进行分析,发现其4种基因型在各个病例组与对照组的比较中都没有统计学差异.结论 在重庆地区的中国汉族人群中,未发现GSTT1缺失基因型和GSTM1缺失基因型与原发性闭角型青光眼的易感性相关,联合比较GSTT1和GSTM1基因多态性与原发性闭角型青光眼的易感性,也未发现明显相关性,而且与原发性闭角型青光眼的分类也不相关.     

WTAP通过调控SIRT1诱导小胶质细胞M1型极化的研究

目的 探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms'tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制.方法 用100 ng/mL IFNγ联合1 μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量...     

芳香烃受体在葡萄膜炎中的作用及机制研究

目的拟探究Ah R的配体2,3,7,8-四氯二苯-对-二恶英(TCDD)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)中的作用及其机制。方法选择C57BL/6雌性小鼠,随机分为Na?ve组、EAU+vehicle组和EAU+TCDD组。采用视网膜光感受器间维生素A类结合蛋白_(651-670)(IRBP_(651-670))建立小鼠EAU模型。EAU+TCDD组小鼠自免疫前1天腹腔注射TCDD,EAU+vehicle组同法给予等体积空白溶剂(橄榄油)。通过分别对小鼠眼前段和眼后段进行临床评分和病理评分,检测巨噬细胞/小胶质细胞数量和炎症因子表达水平,探讨Ah R相关通路在葡萄膜炎发生中的作用机制。结果与EAU+vehicle组相比,TCDD处理后的EAU小鼠临床评分和病理评分明显降低,F4/80标记的巨噬细胞/小胶质细胞数量明显减少,促炎因子表达水平明显降低,Notch-1表达明显减少。结论 TCDD激活Ah R后,通过减少巨噬细胞/小胶质细胞数量和促炎因子表达,从而起到控制EAU炎症反应的作用,可能的机制是抑制Notch通路来实现其抑炎作用。     

Behet病相关基因多态性研究进展

Behet病是一种累及多系统的炎性疾病,其病因及发病机制十分复杂,涉及遗传和环境因素的相互作用。多数研究表明很多种基因参与其发病过程,基于群体的关联分析确定Behet病相关的基因是MBL-2、TNFα、TNFβ、TNFR2、IL-1α、IL-1β、IL-12、HLA-B和MICA等,也有学者的研究结果与此不一致。本文就Behet病相关基因多态性方面的研究进展作一综述。     

Beh(c)et病相关基因多态性研究进展

Behcet病是一种累及多系统的炎性疾病,其病因及发病机制十分复杂,涉及遗传和环境因素的相互作用。多数研究表明很多种基因参与其发病过程,基于群体的关联分析确定Behcet病相关的基因是MBL-2、TNFα、TNFβ、TNFR2、IL-1α、IL-1β、IL-12、HLA-B和MICA等,也有学者的研究结果与此不一致。本文就Behcet病相关基因多态性方面的研究进展作一综述。