斑马鱼皮肤损伤模型的建立及分子机制

目的以皮肤荧光转基因斑马鱼(ktr4:NTR-h Kik GR)为实验动物,研究长春新碱对皮肤细胞的损伤作用及其分子机制,建立皮肤损伤模型。方法取受精后24 h皮肤荧光斑马鱼胚胎,将脱膜后的胚胎分别置于0.01~0.04 mmol·L^-1不同浓度的长春新碱中,24 h后采用荧光显像的方法对斑马鱼皮肤荧光斑点进行计数和统计处理;同时对鱼体细胞死亡情况进行TUNEL试剂盒检测,确定其皮肤细胞死亡的水平;利用蛋白免疫印迹的方法对各组斑马鱼胚胎的caspase-3、KRT4及p53表达水平进行检测。结果在长春新碱与斑马鱼胚胎共同孵育24 h后,0.02、0.04 mmol·L^-1长春新碱明显引起斑马鱼荧光皮肤细胞减少(P<0.01);TUNEL检测表明,长春新碱与对照组比较能明显引起斑马鱼皮肤细胞凋亡;Western bolt分析显示,0.02、0.04 mmol·L^-1长春新碱能诱导斑马鱼胚胎caspase-3和p53表达增加(P<0.01),同时高浓度的长春新碱可使皮肤角蛋白KRT4表达明显减少(P<0.01)。结论利用长春新碱引起斑马鱼皮肤损伤,该局部毒性作用可作为皮肤损伤的造模新方法。     

HPLC法测定蜂胶中阿替匹林的含量

建立蜂胶中抗肿瘤成分阿替匹林的含量测定方法.采用XDB-C18色谱柱;以甲醇-5 %乙酸为流动相梯度洗脱;流速1.0mL·in-1;检测波长280nm.阿替匹林在0.66～6.60μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.71%,RSD为2.15%(n=6).本方法结果准确高,重复性好,可作为蜂胶的质量评价依据.     

醋酸直肠刺激对大鼠肠道P物质、5-HT免疫阳性神经纤维的影响

目的:观察醋酸肠道刺激对大鼠肠道高敏感性的影响及其可能影响因子。方法:采用醋酸慢性刺激建立肠道高敏感性大鼠模型,观察大鼠肠道敏感性以及结肠黏膜下P物质、5-羟色胺免疫反应阳性纤维的变化.结果:醋酸注射直肠能够引起实验动物的腹壁撤离反射的阈值降低;肠道内的P物质含量低于对照组(P<0.01),肠道粘膜下的5-羟色胺免疫阳性神经元/神经纤维阳性指数(IOD)显著增加(P<0.01);结论:醋酸直肠慢性刺激可导致肠道高敏感性,其机制可能与引起5-HT免疫阳性神经纤维增加、P物质分泌紊乱有关。     

有机助溶剂对血管生成斑马鱼模型的适用性研究

目的 研究二甲基亚砜、丙酮、甲醇、异丙醇四种有机溶剂在斑马鱼模型抗血管生成药物筛选中作为助溶剂的适用性.方法 以每种有机溶剂系列浓度处理发育12h或24h斑马鱼胚胎,到发育72 h观察胚胎血管生成、畸形、死亡状况,计数体节问血管,并计算畸形率和死亡率.结果 有机溶剂中存活的斑马鱼胚胎体节间血管形态和数量正常,与对照一致.0.1%浓度二甲基亚砜、丙酮和1%浓度甲醇中斑马鱼胚胎无畸形和死亡状况,但随着浓度上升畸形率和死亡率均显著高于对照.0.1%浓度异丙醇中斑马鱼胚胎的畸形率和死亡率已显著高于对照.结论 作为助溶剂,二甲基亚砜、丙酮适宜浓度为≤0.1%,甲醇适宜浓度为≤1%,异丙醇不适合用于斑马鱼模型抗血管生成药物筛选.     

失眠与精神疾病

精神疾病引起的失眠，主要是指入睡困难、睡眠不安、睡眠恐惧、失眠多梦、睡眠过浅、睡眠片断、彻夜不眠、早醒或醒后不舒等现象。本文从失眠的临床表现，失眠与精神疾病的关系，失眠的产生与脏腑，精神疾病的病因与病理机制，精神疾病失眠的辨证施治，精神疾病失眠的预防保健等方面进行分析。     

分光光度法测定鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂

目的建立鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的测定方法。方法采用乙醇提取、正己烷萃取法得到鱿鱼生殖腺提取物,浓硫酸-高氯酸法消化样品,抗坏血酸-钼蓝法测定无机磷的量,再乘以系数26.31折算成鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的量。结果磷在0.2～1.0μg/mL线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为95.06%,RSD为1.09%。结论该方法方便、快速、准确度较高,可用于鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的测定。     

分光光度法测定鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂

摘 要：目的 建立鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的测定方法。方法 采用乙醇提取、正己烷萃取法得到鱿鱼生殖腺提取物,浓硫酸–高氯酸法消化样品,抗坏血酸–钼蓝法测定无机磷的量,再乘以系数26.31折算成鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的量。结果 磷在0.2～1.0 μg/mL线性关系良好（r＝0.999 9）,平均回收率为95.06%,RSD为1.09%。结论 该方法方便、快速、准确度较高,可用于鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的测定。     

水溶性氮酮对斑马鱼胚胎药物渗透及致畸性作用的影响

目的 研究水溶性氮酮对白藜芦醇透过斑马鱼胚胎性能与斑马鱼致畸性的影响.方法 利用对斑马鱼胚胎发育致畸作用,考察氮酮在斑马鱼筛选模型上的适用性,确定氮酮的使用剂量;利用氮酮的透皮促进作用,观察对白藜芦醇抑制斑马鱼节间血流的影响.结果 在0.01～0.5μg/ml范围内氮酮对斑马鱼较安全,0.5μg/ml溶性氮酮可显著促进斑马鱼对白藜芦醇的透过,斑马鱼节间血管的抑制率达到了22.9%.结论 浓度高于0.5 μg/ml的水溶性氮酮对斑马鱼胚胎的发育有明显致畸作用;0.5μg/ml的氮酮对白藜芦醇的斑马鱼胚胎透过效果最佳.     

枳实槟榔散对大鼠肠道高敏感性的影响及其作用机制研究

目的观察枳实槟榔散对大鼠肠道高敏感性的影响及其可能的作用机制。方法采用醋酸慢性刺激乳鼠建立肠道高敏感性大鼠模型,观察枳实槟榔散对大鼠肠道敏感性以及结肠黏膜P物质、5-羟色胺（5-HT）免疫反应阳性纤维的影响。结果枳实槟榔散组的低与高剂量组的痛阈值和最大耐受疼痛阈值与模型组比较有明显升高（P〈0.05）;肠道内P物质含量高于模型组（P〈0.01）,肠道黏膜下的5-HT免疫阳性神经元/神经纤维阳性指数（IOD）显著性减少（P〈0.01）。结论枳实槟榔散可降低大鼠肠道高敏感性,其作用机制可能与引起5-HT免疫阳性神经纤维减少、改善P物质分泌紊乱有关。     

半枝莲化学成分及抑制血管生成活性的研究

 目的 研究半枝莲的化学成分及其抑制血管生成活性。方法 采用硅胶柱色谱、sephadex LH-20凝胶柱色谱分离纯化化合物,运用理化反应和波谱分析鉴定化合物的结构。采用斑马鱼抑制血管生成模型测试化合物的活性。结果 从半枝莲体积分数75%乙醇提取物中的乙酸乙酯萃取部分中分离得到了9个化合物,分别为：汉黄芩素,4′-羟基汉黄芩素,芹菜素,黄芩素,柚皮素,木樨草素,异鼠李素,野黄芩苷,黄芩苷,其中异鼠李素有明显的抑制血管生成活性。结论 抑制血管生成是半枝莲抗肿瘤作用的途径之一。