产前诊断46,XN,der(21)t(20;21)(p11.1;p11.1)一例

孕妇女,32岁。自然流产3次,均发生于停经50天左右。现有一儿子,8岁,患唇腭裂、学习成绩差,拒绝行染色体检查。本次因孕10⁺⁵周行血清学产前筛查,其21-三体综合征风险值为1/86,来我院产前诊断中心就诊。夫妻表型正常,非近亲结婚,身体状态良好,无有毒有害物质接触史,否认家族性遗传病史。本研究经医院伦理委员会批准(2020055号)。     

穿透支原体膜蛋白MYPE2350的表达及免疫活性分析北大核心CSCD

目的对穿透支原体膜蛋白MYPE2350进行生物学信息学分析,构建重组原核表达质粒,表达、纯化并检测该蛋白的免疫学活性。方法从NCBI网站获得穿透支原体特有MYPE2350蛋白的氨基酸序列,利用生物信息学软件预测和分析MYPE2350蛋白的理化性质、跨膜区、信号肽和B细胞表位等生物学特性。设计引物,PCR扩增MYPE2350基因片段,将其连接到质粒pET28a。将重组质粒pET28a-MYPE2350转化入大肠埃希菌BL21,用IPTG诱导重组MYPE2350蛋白的表达。分离包含体,使用尿素溶解后利用Ni^(2+)亲和层析法纯化重组MYPE2350蛋白。用重组MYPE2350蛋白免疫小鼠,测定小鼠血清特异IgG含量和IgG2a/IgG1的比值,以及小鼠脾细胞分泌细胞因子的含量。结果 MYPE2350蛋白共有178个氨基酸,相对分子质量为19.4×10^(3),为跨膜蛋白,具有3个跨膜区。该蛋白二级结构中α螺旋占43.82%,β折叠占17.42%,无规卷曲占35.39%,β转角占3.37%。Swiss网站预测的蛋白三级结构的匹配度和可信度不高。MYPE2350蛋白含有多个B细胞表位。构建的重组质粒pET28a-MYPE2350转化BL21后,经IPTG诱导表达重组MYPE2350蛋白,通过亲和层析纯化获得了纯度较高的MYPE2350蛋白。重组MYPE2350蛋白具有良好的免疫原性,能够诱导小鼠分泌特异性抗体,且IgG2a/IgG1<1。MYPE2350蛋白能诱导小鼠脾细胞IL-4和IL-5(Th2型细胞因子)高表达,但对IFN-γ和TNF-α(Th1型细胞因子)的影响较小。结论克隆表达的重组穿透支原体特有膜蛋白MYPE2350具有良好的免疫原性,能诱导Th2型免疫应答。