加减陷胸桃承汤合参麦针抗大鼠呼吸窘迫综合征的实验研究

用中药复方“加减陷胸桃承汤”合参麦针对大鼠ＲＤＳ模型进行了治疗并作病理形态观察与有关检测。结果发现：给药组大鼠肺系数明显低于对照组（ Ｐ＜ ０－０１） ,给药组肺组织病理变化比对照组减轻或消失,仅见肺血管充血,少量炎细胞渗出,特染显示微血栓形成少,表明该药对ＲＤＳ模型大鼠的急性肺损伤有明显治疗作用。其机理主要是抑制了肺毛细血管微血栓的形成。     

流式细胞术检测复宫宁诱导异位子宫内膜细胞凋亡的研究

目的 :从分子水平探讨中药制剂复宫宁治疗子宫内膜异位症的作用机理 ,观察其是否能诱导异位子宫内膜细胞发生凋亡。方法 :用手术移植法复制内异症的大白鼠模型 ,将其分成对照组、复宫宁组、丹那唑组及联合用药共 4组 ,采用灌胃给药 4周后 ,通过流式细胞仪观察异位子宫内膜细胞是否有凋亡出现。结果 :1 肉眼观察 ,用药组的移植物体积明显小于对照组 ,其异位病灶生长受抑制。 2 用药组异位子宫内膜细胞凋亡指数显著高于对照组 (P <0 0 1)。 3 在流式细胞仪直方图上 ,用药组均可见有凋亡峰 (即“亚G1”峰 ) ,且S期细胞明显增多 (P <0 0 1) ,提示细胞周期阻滞于S期而出现凋亡。对照组则没有明显凋亡峰出现。 4 复宫宁组 ,丹那唑组及联合用药组血清E2 水平均显著低于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :本研究说明复宫宁能诱导异位子宫内膜细胞凋亡 ,其机制可能是通过降低血清E2 水平 ,致使细胞上bc1 2的表达下降。     

恙虫病东方体58kDa热休克蛋白与47kDa外膜蛋白的基因嵌合及58-47嵌合基因在大肠杆菌中的表达

采用PCR方法 ,从恙虫病东方体Karp株基因组DNA中扩增 5 8kDa热休克蛋白的基因 ,将该基因分别与原核表达载体pQE30及 4 7kDa外膜蛋白的基因重组质粒 (pQE30 4 7)连接 ,构建pQE30 5 8及pQE30 5 8 4 7重组质粒 ,用重组质粒转化大肠杆菌。SDS PAGE显示 ,pQE30 5 8和pQE30 5 8 4 7转化的大肠杆菌分别产生一 5 8kDa重组蛋白和一 90kDa的双抗原 (5 8- 4 7)融合蛋白。免疫印迹分析显示Karp株免疫血清能特异识别 5 8kDa重组蛋白和 90kDa融合蛋白 ,90kDa融合蛋白既与 4 7kDa重组蛋白也与 5 8kDa重组蛋白的免疫血清特异反应 ,5 8kDa与 4 7kDa重组蛋白也被 90kDa融合蛋白免疫血清所识别。研究结果证明 5 8 4 7融合蛋白具有恙虫病东方体Karp株 4 7kDa外膜蛋白和 5 8kDa热休克蛋白的抗原特性     

“复宫宁”对大鼠子宫内膜异位症的作用

应用临床有效中药复方制剂（复宫宁１号,每ｍＬ含生药２ｇ）,对大鼠子宫内膜异位症肝郁型模型（手术移植＋肾上腺素皮下注射法复制,共４２只）进行了实验性治疗,并与西药丹哪唑组（ｎ＝１２）生理盐水对照组（ｎ＝１４）作了对比观察（共给药３０ｄ）。着重从病理形态...     

证、病结合的子宫内膜异位症动物模型的复制

目的 复制具有中医“肝郁”表现的子宫内膜异位症大鼠模型。并进行病理观察。方法 采用手术移植法加用肾上腺素皮下注射法复制模型，取动情期大鼠子宫内膜片段移植于卵巢周围或腹壁内侧面，3-4周后再以0.1%肾上腺素0.15ml/只，作皮下注射，每周一次，共4次，3周后，“肝郁”模型即成，对照组只作腹壁切开术，不作内膜移植。结果 移植物大体呈小囊状，色白透明或暗红，显微镜下小囊具有子宫内膜的基本组织结构，模型动物具有中医“肝郁”的临床症状及其肾上腺的病理改变，结论 造型方法简便易行，周期短，成活率高，有利于中医药研究应用。     

复宫宁诱导异位子宫内膜细胞凋亡的超微病理学研究

目的;从超微病理水平探讨中药制剂复宫宁治疗子宫内膜异位症的作用机理,观察其是否能诱导异位子宫内膜细胞发生凋亡。方法：用手术移植法复制子宫内膜异位症的大白鼠模型,将其分组灌胃给药4周后,再通过透射电子显微镜观察异位子宫内膜细胞是否有凋亡出现。结果：①肉眼观察,用药组的移植物体积明显小于对照组（P＜0．05）,其异位病灶生长受抑制。②电镜下观察各用药组的异位子宫内膜细胞可见凋亡特有的形态学变化。③复宫宁组血清E2值显著低于对照组（P＜0．05）。结论：复宫宁能诱导异位子宫内膜细胞凋亡。     

恙虫病东方体Karp株47kDa蛋白成熟肽的克隆与表达

目的 :克隆表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot)Karp株 4 7kDa表面蛋白的成熟肽 ,探索其作为疫苗及诊断抗原的可能性。方法 :采用PCR方法 ,从 OtKarp株菌种基因组DNA中扩增出 4 7kDa成熟蛋白基因片段 ,将该片段克隆于原核表达载体pQE30 ,构建成重组质粒pQE30 4 7,转化大肠杆菌 (E coli) ,经IPTG诱导表达 ,SDS_PAGE和Western_blotting检测目的蛋白的表达。结果 :①获得长约 12 72bp的OtKarp株 4 7kDa外膜蛋白基因 ;②SDS_PAGE和免疫印迹显示该重组质粒转化的E coli有一相对分子量约为 4 3× 10 4 的独特蛋白带 ;③重组表达质粒序列分析结果显示pQE30 4 7中插入的基因片段的序列与已报告的OtKarp株 4 7kDa外膜蛋白基因序列基本一致 ,并与已知序列相同。结论 :获得了OtKarp 4 7kDa蛋白基因 ,并在E coli中实现了表达 ,表达的重组蛋白具有免疫反应性     

恙虫病东方体Karp株56kDa与47kDa外膜蛋白基因的嵌合和嵌合基因在大肠杆菌的表达

目的　将恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot)Karp株的 5 6kDa和 4 7kDa外膜蛋白基因嵌合 ,并使嵌合基因在大肠杆菌细胞内表达 ,产生双抗原融合蛋白。方法　采用PCR方法 ,从OtKarp株基因组DNA中扩增 5 6kDa蛋白基因片段 ,将该片段分别与原核表达载体pQE30及 4 7kD蛋白基因重组质粒 pQE30 / 4 7连接 ,构建 pQE30 / 5 6及pQE30 / 5 6 - 4 7重组质粒 ;用IPTG诱导转入大肠杆菌内的重组质粒的目的基因表达。结果　SDS -PAGE显示 ,pQE30 / 5 6转化的大肠杆菌产生一约 4 5kDa的融合蛋白和 pQE30 / 5 6 - 4 7转化大肠杆菌产生一约 90kDa融合蛋白 (5 6 - 4 7融合蛋白 ) ,免疫印迹分析显示两融合蛋白均与OtKarp株感染鼠血清产生特异性反应 ,5 6 - 4 7融合蛋白分别与 4 7kDa、5 6kDa重组蛋白免疫的小鼠血清产生特异性反应 ,以及 5 6 - 4 7融合蛋白免疫血清与 5 6kDa和 4 7kDa重组蛋白反应。结论　OtKarp株的 5 6kDa与 4 7kDa外膜蛋白基因嵌合后在大肠杆菌细胞内实现了表达 ,表达的融合蛋白具有 5 6kDa和 4 7kDa外膜蛋白的抗原特性。