特异性stealth siRNA抑制小鼠肺成纤维细胞TGF-β1表达的实验研究

目的设计特异性stealth siRNA并检测其对TGF-β1的抑制作用。方法针对BALB/c小鼠TGF-β1基因组,选择不同位点设计3套siRNA基因序列,并经化学修饰合成3种stealth siRNA,转染体外培养的小鼠肺成纤维细胞,免疫组化法检测其对TGF-β1表达的影响。结果3种stealth siRNA对TGF-β1表达在不同时间有不同程度的抑制作用,以stealth_166效果更为明显;抑制效果与转染时间长短相关,48h后就可检测出明显抑制,72h达到最高峰,96h后开始减弱。结论合成的特异性stealth siRNA可以抑制TGF-β1在小鼠肺成纤维细胞的表达,有望成为防治肺间质纤维化的一种手段。     

不同乳汁成分乙型肝炎病毒DNA定量检测的结果分析

目的分析不同乳汁成分中乙型肝炎病毒(HBV)-DNA定量检测的结果,为乳汁标本HBV-DNA检测提供参考和依据。方法对152例乙肝产妇乳汁分别选用混匀乳汁、乳酪、乳清和沉淀进行HBV-DNA定量检测。结果选用不同的检测对象时,HBV-DNA检测的阳性率差异无统计学意义(χ2=0.437,P=0.933);HBV-DNA载量间差异有统计学意义(F=2.835,P=0.043),沉淀中HBV-DNA载量高于乳清中HBV-DNA载量;两两比较后,混匀乳汁、乳酪、乳清间检测结果差异无统计学意义(P0.05),混匀乳汁、乳酪、沉淀间检测结果差异无统计学意义(P0.05)。结论对乳汁标本进行HBV-DNA定量检测时,混匀乳汁可能是更为适合的检测对象。     

光动力学疗法的临床应用

光动力学疗法（Photodynamic Therapy,PDT）是一种正在研究发展中的新型医疗技术,自20世纪70年代末开始进入临床研究以来,PDT在恶性肿瘤和各种良性疾病的治疗中取得了令人瞩目的成就,在治疗肿瘤和一些良性疾病方面显示出了强大的威力。     

RT-PCR联合凝胶电泳成像技术检测体外培养小鼠肺成纤维细胞转化生长因子β1的表达北大核心

背景:RT-PCR技术是将RNA的反转录和cD NA的聚合酶链反应相结合的技术。常用于检测细胞组织中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cD NA序列等。目的:运用RT-PCR技术检测Stealth siRNA对转化生长因子β1的抑制作用。方法:实验分为空白对照组、空转染组、stealth_48组、stealth_166组和stealth_594组。针对BALB/c小鼠转化生长因子β1基因组,选择不同位点设计3套siRNA基因序列,转染体外培养的小鼠肺成纤维细胞,RT-PCR法检测其对转化生长因子β1和下游结缔组织生长因子表达的影响。结果与结论:(1)RT-PCR结果显示3种Stealth siRNA对转化生长因子β1表达在不同时间有不同程度的抑制作用,以Stealth_166效果更为明显;抑制效果与转染时间长短相关,48 h后就可检测出明显抑制,72 h达到最高峰,96 h后开始减弱;(2)结果说明,RT-PCR技术可用于特异性Stealth siRNA抑制转化生长因子β1在小鼠肺成纤维细胞的表达效果的检测。     

血清IL-6、IL-8和TNF—α在重症急性胰腺炎早期诊断中的临床意义

目的 对血清白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子在早期诊断重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)中的价值进行研究。方法 以Ranson和APACHE—Ⅱ评分为标准，把36例急性胰腺炎患者分成轻症胰腺炎组(MAP)及重症胰腺炎组(SAP)两组，选择年龄匹配的13名健康志愿者为对照组(Con)；在患者入院24h内采静脉血并检测血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果 三种细胞因子血清水平均为SAP组最高，Con组最低，其中IL-6水平在三组之间、两两之间均有显著差异，IL-8和TNF—α水平在Con组与SAP组之间、MAP组与SAP组之间有显著差异，而Con组与MAP组之间无显著差异。结论 IL-6、IL-8、TNF—α对早期诊断鉴别轻症胰腺炎和重症胰腺炎均有重要的临床意义。     

杜仲多糖抗肝纤维化作用的实验研究

目的 研究杜仲多糖对CCl₄致肝纤维化大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法 采用大鼠首次背部sc纯CCl₄ 5 mL/kg,以后sc 40% CCl₄花生油3 mL/kg,共8周,制备大鼠肝纤维化模型。杜仲多糖ig给药8周,测定大鼠肝脏及脾脏指数,检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性及总蛋白（TP）、白蛋白(ALB)水平,计算ALB与球蛋白（GLOB）的比值（A/G）;检测血清中透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）、IV型胶原（IV-C）水平;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活性、羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）的水平;并检测肝脏中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。结果 杜仲多糖能明显对抗CCl₄所致的肝纤维化大鼠肝脏、脾脏指数的升高(P＜0.01）;显著抑制血清中ALT、AST活性的升高（P＜0.01）,降低血清中HA、LN、PCIII、IV-C、GLOB的量（P＜0.01）,升高血清中的TP、ALB的量和A/G的值（P＜0.01）;降低肝组织中MDA的水平和Hyp的量（P＜0.01）,亦能升高肝组织中SOD的活性和GSH-Px的水平（P＜0.01）,明显降低肝组织中TGF-β1的表达。杜仲多糖高剂量组抗肝纤维化的效果最好,并呈现明显的剂量依赖性。结论 杜仲多糖具有显著的抗肝纤维化作用。     

乳癖消颗粒对家兔乳腺增生的抑制作用

摘 要 目的：考察乳癖消颗粒对家兔乳腺增生的抑制作用,并探讨其抑制作用的可能机制,为该药临床应用提供理论依据。方法: 苯甲酸雌二醇联合黄体酮法构建家兔乳腺增生模型,以逍遥丸、三苯氧胺为阳性对照组,受试药乳癖消颗粒分为低、中、高（0.525,1.05,2.1 g·kg^-1）剂量组,按组别灌胃30 d,测定家兔血清中的雌二醇（E2）、孕酮（PROG）、催乳素（PRL）、促卵泡生成素（FSH）及促黄体生成素（LH）含量。并对乳腺组织进行病理组织学检查同时检测各组家兔乳腺组织中血管内皮增长因子（VEGF）的含量表达。结果: “保留卵巢 苯甲酸雌二醇联合黄体酮法” 可用于构建家兔乳腺增生模型。与模型组比较,乳癖消颗粒可使家兔血清E2及PRL含量明显下降（P<0.01）,PROG含量显著升高（P<0.01或P<0.001）。与模型组比较,乳癖消颗粒高剂量组可恢复到空白对照组家兔的乳腺结构的水平,抗乳腺增生作用优于逍遥丸和三苯氧胺。与模型组比较,各给药治疗组家兔乳腺组织中VEGF的表达均明显下降（P<0. 001）。结论: 乳癖消颗粒对家兔乳腺增生有较好的治疗作用。乳癖消颗粒对家兔乳腺增生的抑制作用可能与抑制家兔乳腺增生组织中VEGF的表达有关,其抑制水平与三苯氧胺和逍遥丸的抑制水平无差异。     

复方甘草口服溶液的制备工艺改进

目的解决复方甘草口服溶液处方中复方樟脑酊的添加工艺,得到澄清、质量合格、口感好的制剂。方法利用滑石粉的分散吸附作用,替代56%乙醇,提高樟脑、八角茴香油的溶解性。樟脑、苯甲酸加入到少量95%乙醇中溶解。八角茴香油加入到滑石粉中,充分研匀,再加樟脑乙醇溶液,研匀,加适量水充分搅拌,过滤,即得改良后的复方樟脑酊。再按药典制法即得新复方甘草口服溶液。结果制剂澄清,口感好,质量合格。结论该方法可行,工艺简单,稳定性较好,且生产成本低。