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背景:课题组前期研究表明,较软的培养基质对大鼠骨髓间充质干细胞的形态及细胞骨架有明显的影响。
目的:探讨不同弹性模量的聚丙烯酰胺凝胶软基质对人滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化的影响。
方法:无菌条件下获取骨关节炎患者滑膜组织,有限稀释法获得原代人滑膜间充质干细胞,流式细胞术进行细胞表面标记物鉴定,多向诱导分化实验进行功能鉴定。用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺制备0.4,6,30 kPa 3个弹性模量的聚丙烯酰胺凝胶软基质作为培养人滑膜间充质干细胞的基底,在转化生长因子β1存在的情况下分别培养7 d和14 d,RT-PCR方法检测软骨形成相关基因COL2A1、CRTAC1 mRNA的表达,以6孔细胞培养板作为对照组。
结果与结论:在不同弹性模量上生长的人滑膜间充质干细胞表现出不同的细胞形态;软基质的弹性模量及培养时间对人滑膜间充质干细胞成软骨基因COL2A1、CRTAC1的表达有交互作用:7 d时,CRTAC1 mRNA在6 kPa弹性模量聚丙烯酰胺凝胶上表达量最高(F=44.350,P=0.000);7 d时,COL2A1 mRNA在0.4 kPa弹性模量聚丙烯酰胺软基质上的表达量最高(F=6.384,P=0.005)。较低弹性模量的聚丙烯酰胺凝胶软基质比常规细胞培养板更具有促进滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化的作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程 相似文献
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