Motic显微数码互动系统在留学生组胚教学中的应用

为探讨Motic显微数码互动平台在留学生组织学与胚胎学教学中的应用效果,利用Motic显微数码互动对留学生进行理论、实验同步教学,通过理论、实验考核及问卷调查的形式对教学效果进行评价。与传统教学组相比,Motic显微数码互动平台下留学生组织学与胚胎学教学实验、理论同步教学法能显著提高教学质量。     

ZAK-β蛋白激酶基因真核表达载体的构建

目的 将人源ZAK-β基因定向克隆入MSCV-IRES-GFP质粒,构建真核表达载体pMSCV-IRES-GFP-ZAK-β.方法 以肺癌A549细胞的cDNA为模板,通过PCR得到ZAK-β特异性基因产物,克隆入真核表达载体pMSCV-IRES-GFP中,获得重组真核表达载体pMSCV-IRES-GFP-ZAK-β,测序验证.结果 扩增了ZAK-β基因,经双酶切、测序鉴定证实目的基因克隆到真核表达载体pMSCV-IRES-GFP中,测序结果与预测完全一致.结论 成功构建了ZAK-β逆转录病毒表达载体,为进一步研究ZAK蛋白激酶的功能奠定了基础.     

白癜风患者血浆和皮肤组织液内皮素1的测定

目的了解白癜风患者血浆和皮肤组织液内皮素1(ET-1)水平,并讨论其临床意义。方法采用放射免疫方法对30例白癜风患者和12例健康体检者血浆中ET-1水平进行测定,以及对20例稳定期白癜风白斑部位和对侧部位非白斑的皮肤组织液中ET-1水平进行测定。结果患者白斑部位皮肤组织液ET-1值明显低于非白斑部位(P<0.01);白癜风患者血浆ET-1水平与正常人群差异无显著性(P>0.05)。结论在白癜风色素恢复过程中不仅受黑素细胞存在与否的影响,还与邻近角质形成细胞ET-1分泌功能异常有关。     

WDR5真核表达载体的构建及其在LNCaP细胞中的稳定表达

目的 构建人源WDR5全长结构基因真核表达载体, 建立稳定表达WDR5的LNCaP细胞株.方法PCR扩增WDR5基因, 将WDR5插入pCI-neo载体中, 酶切及测序鉴定重组质粒.利用脂质体转染法将重组质粒转染LNCaP细胞, Real Time-PCR检测转染细胞WDR5的m RNA表达水平.结果 经酶切及测序证实真核表达载体pCI-neo-WDR5构建正确.重组质粒转染到LNCaP细胞后, 用G418筛选获得稳定表达的细胞株, Real Time-PCR方法检测到WDR5基因在转录水平的表达.结论 PCI-neo-WDR5成功转染LNCaP细胞株中并稳定表达, 为下一步WDR5的深入研究及应用奠定了基础.     

IRF4逆转录病毒表达载体的构建及鉴定

目的将小鼠IRF4基因定向克隆入MSCV-IRES-GFP质粒,得到长期稳定表达IRF4的逆转录病毒载体.方法以含IRF4 cDNA质粒作为模板,PCR扩增所需目的片段;将该片段连接入MSCV-IRES-GFP质粒;以磷酸钙法转染293T细胞,收集病毒上清感染GP+E86细胞后,流式细胞术和蛋白印迹技术检测IRF4的表达.结果经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功连接到逆转录病毒MSCV载体上.逆转录病毒上清成功感染GP+E86细胞系.结论成功构建了小鼠IRF4逆转录病毒表达载体,并实现了IRF4在GP+E86细胞系中的外源性表达.     

磷脂酶Cγ2对自身反应性B细胞的调控作用

目的应用基因敲除小鼠模型研究磷脂酶Cγ2对无能B细胞产生的调节机制.方法采用流式细胞术分析野生型和PLCγ2缺失型小鼠无能B细胞的表型;同时用末端转移酶标记技术检测无能B细胞凋亡;溴脱氧尿嘧啶核苷掺入标记技术研究无能B细胞增殖情况.结果 PLCγ2缺失小鼠与PLCγ2野生小鼠相比,无能B细胞数量显著减少(P<0.01),无能B细胞凋亡率显著增加(P<0.01),而无能B细胞增殖率无明显差异(P>0.05).结论 PLCγ2信号提供了存活信号,PLCγ2参与了无能B细胞的调控过程.     

UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响

  目的  探讨UBE2C基因沉默对人胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。  方法  将用RNA 干扰技术构建的UBE2C-shRNA表达载体转染到293T细胞，用含有病毒颗粒的上清感染人胃癌AGS细胞，经puromycin筛选获得稳定表达的AGS细胞株。实验分为UBE2C表达沉默人胃癌AGS细胞组（干扰组）和对照组。采用qRT-PCR验证人胃癌AGS细胞中UBE2C的mRNA 表达水平，随后利用实时无标记细胞分析仪（RTCA）检测UBE2C沉默对人胃癌AGS细胞的增殖和迁移情况；同时应用CCK-8 细胞增殖检测试剂盒进一步印证UBE2C表达水平对人胃癌AGS细胞增殖能力影响。  结果  干扰组中UBE2C mRNA 表达 水平与对照组相比明显降低，AGS细胞增殖和迁移能力显著下降（P < 0.01）。  结论  靶向沉默UBE2C基因表达能抑制人胃癌AGS细胞恶性生物学行为。     

无肢畸形1例

无肢畸形１例云南省大理医学院组胚教研室（６７１０００）何颖红病例摘要某女，２６岁，初孕，既往健康，非近亲结婚，无家族病史。患者怀孕前曾在农贸公司销售农药五年，怀孕后调离。否认孕期患过各种疾病和服用过药物。孕３８周时因阴道流水而入院，不久经侧切负压吸引...     

荧光标记法检测神经节细胞轴突再生

目的：检测神经节细胞轴突在坐骨神经移植到视网膜后的再生。方法：荧光染料粒兰施于移植坐骨神经逆行荧光标记后，在荧光显微镜下观察视网膜神经节细胞。结果：在移植坐骨神经的诱导下，视网膜神经节细胞受损的轴突可以再生长入到该移植段内。结论：荧光标记法对检测神经再生，是一种有价值的方法