Shh信号通路变化对小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬的影响

目的：探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）及平滑激动剂（smoothened agonist,SAG）干预下小鼠胚胎腭突间充质细胞Shh信号通路改变后,小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬状态的变化。方法：体外培养胚胎14.5 d的C57BL/6J小鼠胚胎腭突间充质细胞,根据干预方式分为4组：对照组、地塞米松组（DEX组）、地塞米松+SAG组（DEX+SAG组）、单独SAG干预组（SAG组）。通过透射电镜观察各组细胞自噬体或自噬溶酶体的数量,Western blot检测各组Shh、Ptch1、Smo、Gli3A/R、Cyclin D1及自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ和P62、Beclin-1的表达情况。结果：电镜结果显示,对照组和DEX组中自噬体/自噬溶酶体的数量无明显差异,而SAG干预后可观察到大量自噬体/自噬溶酶体。Western blot结果显示,与对照组相比,P62、Ptch1、Smo、Gli3A/R、CyclinD1在DEX组中明显降低（P<0.05）,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达无明显变化（P>0.05）;DEX+SAG组及SAG组中Ptch1、Smo、Gli3...     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对肝癌细胞株HepG2增殖凋亡分化的影响

目的 研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物(4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯)对人肝癌细胞株HepG2体外增殖、凋亡及分化情况的影响.方法 3种浓度(1、5、10 μmol/L)的ATRA衍生物分别处理HepG2细胞,1、2、3、7d后用MTT法检测4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对HepG2细胞增殖的影响;酶动力学法检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)比活性和甲胎蛋白(AFP)分泌量变化;流式细胞术分析细胞周期及凋亡情况;Western blot检测HepG2细胞中凋亡相关蛋白的表达量.结果 10 μmol/L的4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯可明显诱导HepG2细胞凋亡,凋亡率达到49%,并且使代表肝细胞恶变的γ-GT比活性、AFP分泌量明显下降,Western blot显示4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯显著抑制Bcl-2、Bcl-xS/L和p-Erk表达.结论 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯是肝癌细胞HepG2有效的分化诱导剂,并明显促进肝癌细胞凋亡.     

N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物[N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺]对人肺腺癌A549细胞株体外增殖及凋亡的影响。方法3种浓度的ATRA衍生物和ATRA(1、5、10mg/L)分别处理A549细胞1、2、3、7d,应用MTT法和流式细胞技术分别观察该ATRA衍生物对A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;Western blot分析凋亡相关蛋白表达的变化。结果ATRA衍生物处理组A549细胞增殖抑制率随药物浓度的增加而提高,分别为9.1%、17.8%、47.0%;抑制率亦随药物作用时间的延长而提高,分别为18.1%、20.6%、40.4%、83.4%。10mg/LATRA衍生物可明显诱导A549细胞凋亡,凋亡率达到40.9%,G0～G1期细胞比例明显下降,细胞凋亡峰较对照组明显提前,凋亡过程伴随Bcl-2表达下降,而Bax、Bak、酶原形式的Caspase-3、p53、NF-κB的表达无明显变化。结论ATRA衍生物对A549细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;并诱导细胞凋亡,可能与Bcl-2蛋白的表达下调有关。     

地塞米松和维生素B12干预下小鼠胚胎腭突Shh相关信号因子的研究

目的:探讨地塞米松及其拮抗剂维生素B12干预妊娠关键期孕鼠后,小鼠胚胎腭突上Shh信号通路重要因子、细胞周期调控因子及初级纤毛解聚相关因子的调控及三者间的变化关系.方法:予特定孕期C57BL/6J孕鼠腹腔注射一定剂量的生理盐水(空白对照组)、地塞米松(地塞米松组)、维生素B12(维生素B12组)、地塞米松+维生素B12...     

维甲酸作用下胎鼠腭突发育期间母体的血浆代谢组学分析

目的:建立维甲酸诱导C57BL/6J小鼠腭裂模型,利用核磁共振技术和主成分分析方法分析胎鼠腭突发育期间孕鼠血浆的特征性代谢变化。方法:将孕鼠随机分为维甲酸实验组和植物油对照组,分别在ED12.0予孕鼠以维甲酸和植物油灌胃,在特定孕期收集孕鼠血浆样本和统计胎鼠腭裂发生率。应用核磁共振波谱仪测定一氢核磁共振波谱图和主成分分析法(PCA)描绘胎鼠腭突发育期间维甲酸作用下C57BL/6J孕鼠血浆代谢产物的变化轨迹图。结果:PCA分析结果显示腭发育期间两组孕鼠血浆代谢轨迹不同。结论:维甲酸可以延缓孕鼠胚胎发育期间血浆的代谢轨迹,说明母体环境变化与胚胎发育两者之间存在关联性。     

转化生长因子βⅢ型受体在腭融合中的作用

为了探明腭裂的分子病理机制,腭形成的分子调节机制成为连续的研究热点。转化生长因子Ⅲ型受体(transforming growth factor-β type Ⅲ receptor,TβR-Ⅲ)在腭黏附的关键时期特异表达在中嵴上皮(medial edge epithelial,MEE)。本研究的目的是探明TβR-Ⅲ mRNA和蛋白在胎鼠体内的定位和表达水平,以及确定体外腭融合期间对TβR-Ⅲ表达的需求。     

糖皮质激素与细胞自噬关系的研究进展

糖皮质激素是临床常用药物,在各种疾病治疗中扮演着重要角色.自噬是细胞内环境稳态的维持者,近年来许多研究发现使用糖皮质激素可通过调节细胞自噬水平的变化达到治疗疾病的目的,但也会造成药物副作用产生.本文就糖皮质激素对自噬水平影响及糖皮质激素如何通过调节自噬水平达到疾病治疗目的进行综述,为糖皮质激素在治疗疾病过程中减轻或减少...     

Shh和初级纤毛在腭部发育中的作用

Sonic hedgehog （ Shh）通路在脊椎动物组织和器官发育中扮演重要角色,并且有证据表明其牵涉到包括腭裂等发育缺陷。近年关于Shh及相关因子在发育中腭部的表达模式以及条件性基因敲除小鼠的相关研究着重突出了上皮和间充质细胞间的互动在腭发育中的作用。此外, Hedgehog通路还因其独特的初级纤毛依赖性备受瞩目。文章以Shh在腭部发育中的作用,以及其与初级纤毛的关系为重点来介绍近年来相关发现。     

初级纤毛与牙颅颌面发育的相关性研究进展

初级纤毛是一种突出于细胞表面能接收和传导多种细胞信号的细胞器.近一个世纪以来,初级纤毛被视为一个孤立细胞器以及退化结构.然而,目前研究发现初级纤毛可能是一个基本的细胞感受器,能够从微环境中检测和传导机械和化学信息,且与口腔健康息息相关,因其结构或功能异常所导致的口腔疾病也引起了人们的重视.本文结合初级纤毛与牙颅颌面部发育的相关性研究进展作一综述.     

不同母体环境下小鼠腭胚突Fgf10/Fgfr2b/Shh信号通路的变化

目的：观察在腭发育关键时期不同母体环境对小鼠腭胚突Fgf10信号表达的影响。方法：建立A/WySnJ/C57BL/6两系小鼠胚胎移植模型,利用RT-PCR技术检测在胚胎12.5和13.5d胎鼠腭突Fgf10/Fgfr2b/Shh的表达。结果：胚胎12.5d,A/C两系小鼠受精卵相互之间移植前后比较,胎鼠腭突Fgf10和Fgfr2b的表达没有明显变化,A系小鼠移植到C系小鼠后,胎鼠腭突Shh表达显著下调（P〈0.01）;胚胎13.5d,A系小鼠移植到C系小鼠后,胎鼠腭突Fgf10和Fgfr2b的表达显著上调（P〈0.01）,Shh的表达显著下调（P〈0.01）,相反,C系小鼠移植到A/系小鼠后,胎鼠腭突Fgf10的水平显著下调,而Shh水平显著上调（P〈0.01）。结论：母体子宫微环境和对外界环境反应的改变可影响胚胎腭突发育过程中关键信号因子的表达。